秦文婧　張雙林河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南開(kāi)封　475000

雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2在肺腺癌中的表達(dá)

秦文婧張雙林
河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南開(kāi)封475000

目的 探討雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及原癌基因Her-2（C-erbB-2）在肺腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用。方法 選擇2013年3月～2015年2月在我院手術(shù)治療的肺腺癌患者組織切塊60例為研究對(duì)象。分析不同性別、年齡、分化程度、臨床分期患者肺腺癌中ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)，分析肺腺癌患者組織中C-erbB-2的表達(dá)與ER、PR表達(dá)的相關(guān)性，分析骨轉(zhuǎn)移患者與無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR、C-erbB-2的表達(dá)。結(jié)果 60例患者，14例ER陽(yáng)性表達(dá)，占23.3%，13例PR陽(yáng)性，占21.7%，6例C-erbB-2陽(yáng)性，占10.0%。分化程度越低的患者ER陽(yáng)性率及C-erbB-2陽(yáng)性率越高（P＜0.05）。不同性別、臨床分期肺腺癌患者組織中ER、PR及C-erbB-2表達(dá)無(wú)差異（P＞0.05）。相關(guān)性分析：C-erbB-2與ER表達(dá)呈顯著正相關(guān)的關(guān)系（r=0.461），C-erbB-2表達(dá)與PR呈正相關(guān)（r=0.326）；C-erbB-2與ER及PR均為陽(yáng)性呈顯著正相關(guān)的關(guān)系（r=0.329），ER與PR表達(dá)無(wú)相關(guān)性（r=0.081）。骨轉(zhuǎn)移患者與無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達(dá)無(wú)差異（P＞0.05）。結(jié)論 肺腺癌中均可表達(dá)一定程度的雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2水平。

雌激素受體；孕激素受體；原癌基因Her-2；肺腺癌

[Abstract]Objective To discuss expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma.Methods Diced tissues of 60 cases with lung adenocarcinoma from Mar 2013 to Feb 2015 were selected.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients of different sex，age，degree of differentiation，clinical stage were analyzed.Association of C-erbB-2 expression with ER and PR was analyzed.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients with bone metastases and non bone metastasis were analyzed.Results In 60 cases，ER positive expression in 14 cases，accounted for 23.3%，13 cases of PR positive，accounted for 21.7%，and 6 cases of C-erbB-2 positive，accounted for 10%.ER and C-erbB-2 positive rates in patients with the lower the degree of differentiation were higher（P＜0.05）.ER，PR and C-erbB-2 positive rates in patients with different sex，there was no significant difference in the clinical stage（P＞0.05）.C-erbB-2 and ER expression was significantly positive correlation relationship（r=0.461），C-erbB-2 expression and PR were positively correlated（r=0.326）;C-erbB-2，ER and PR were positive significant positive correlation relationship（r=0.329），ER and PR expression no correlation（r=0.081）.ER，PR and C-erbB-2 expressions showed no significant difference in patients with bone metastases and non bone metastasis（P＞0.05）.Conclusion ER，PR and C-erbB-2 express in lung adenocarcinoma.

[Key words]ER;PR;C-erbB-2;Lung adenocarcinoma

近年來(lái)內(nèi)分泌治療腫瘤取得了較大的進(jìn)展，相關(guān)研究也越來(lái)越多，尤其是前列腺癌、乳腺癌等內(nèi)分泌相關(guān)癌癥。有學(xué)者報(bào)道肺癌組織中存在雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR），隨后這種結(jié)論由多種方法證實(shí)[1]。肺腺癌容易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，而骨骼中雌激素受體高表達(dá)，且兩者之間可能存在一定的相關(guān)性。孕激素是雌激素的調(diào)控基因產(chǎn)物，反映了雌激素的功能及活性，而原癌基因Her-2（Proto-oncogene HER-2，C-erbB-2）是與雌激素受體表達(dá)相關(guān)受體，與肺癌的預(yù)后相關(guān)[2，3]。本研究分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2表達(dá)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年3月～2015年2月在我院手術(shù)治療的肺腺癌患者的組織切塊60例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：手術(shù)治療，術(shù)后病理確認(rèn)，標(biāo)本石蠟固定；所有患者在手術(shù)前未接受放療或者化療治療；臨床資料及隨訪(fǎng)資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他系統(tǒng)腫瘤，合并其他疾病，隨訪(fǎng)過(guò)程中因其他原因死亡。60例患者男39例，女21例，年齡37～77歲，平均（56.1±12.7）歲；其中Ⅰ期22例，Ⅱ期29例，Ⅲ期9例。隨訪(fǎng)：28例發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，其中男19例，女9例；32例患者未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，其中男20例，女12例。

1.2方法

組織切塊中ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)檢測(cè)采用免疫組化方法，試劑盒由上海撫生實(shí)業(yè)有限公司提供。操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。石蠟切塊制作為4～5 μm切片，脫蠟，梯度酒精水化，蒸餾水沖洗2次，隨后PBS液沖洗3次，每次沖洗3 min，輕微震蕩。進(jìn)入濃度為0.01 mol/L，pH 6.0的枸櫞酸鹽內(nèi)煮沸15 min。加53%過(guò)氧化氫，室溫下孵育10 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加1∶100的50 μL一抗，室溫下孵育60 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加即用型 Max Vision試劑50 μL，室溫下孵育10 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加DAB溶液100 μL，3~5 min后，自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染，PBS沖洗，梯度濃度乙醇脫水，風(fēng)干，二甲苯溶液過(guò)2 min，樹(shù)膠封片。

1.3結(jié)果判斷[4]

在光鏡下隨機(jī)選擇10個(gè)高倍視野，計(jì)1000個(gè)細(xì)胞。核表達(dá)受體判斷細(xì)胞核有黃棕色顆粒為陽(yáng)性。每個(gè)高倍鏡視野內(nèi)，陽(yáng)性細(xì)胞占0%~10%為陰性，11% ~33%為（+），34%~66%為（++），67%~100%為（+++）。膜表達(dá)受體判斷細(xì)胞膜染色：陰性為無(wú)染色細(xì)胞；超過(guò)10%的癌細(xì)胞細(xì)胞膜染色，染色在細(xì)胞膜上間斷分布，為環(huán)繞細(xì)胞膜為（+）；癌細(xì)胞細(xì)胞膜染色超過(guò)10%，染色強(qiáng)度為弱到中度，連續(xù)，環(huán)繞整個(gè)細(xì)胞膜為（++）；癌細(xì)胞細(xì)胞膜強(qiáng)度染色超過(guò)10%，連續(xù)，環(huán)繞整個(gè)包膜為（+++）。陰性為0-+；弱陽(yáng)性為++，強(qiáng)陽(yáng)性為+++。

1.4觀(guān)察指標(biāo)

分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2陽(yáng)性情況，分析不同性別、分化程度、臨床分期患者ER、PR及C-erbB-2的陽(yáng)性表達(dá)。分析C-erbB-2陽(yáng)性與ER、PR陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性。分析患者是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移與ER、PR及C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1　ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達(dá)[n（%）]

2　結(jié)果

2.1ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達(dá)

60例患者，14例ER陽(yáng)性表達(dá)，占23.3%，13例PR陽(yáng)性，占21.7%，6例C-erbB-2陽(yáng)性，占10.0%。不同性別、年齡、臨床分型、臨床分期患者ER、PR及C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)比較見(jiàn)表1。分化程度越低的患者ER陽(yáng)性率及C-erbB-2陽(yáng)性率越高（P＜0.05）。

2.2C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達(dá)與ER及PR表達(dá)的相關(guān)性

相關(guān)性分析：C-erbB-2與ER表達(dá)呈顯著正相關(guān)的關(guān)系 （r=0.461），C-erbB-2表達(dá)與PR呈正相關(guān) （r= 0.326）；C-erbB-2與ER及PR均為陽(yáng)性呈顯著正相關(guān)的關(guān)系（r=0.329），ER與PR表達(dá)無(wú)相關(guān)性（r=0.081）。

2.3是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達(dá)比較

見(jiàn)表2。骨轉(zhuǎn)移患者與無(wú)骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達(dá)無(wú)差異（P＞0.05）。

3　討論

越來(lái)越多的研究證實(shí)，性激素參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展，包括子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、前列腺癌，性激素具有促癌作用。近來(lái)的研究顯示，性激素受體也廣泛存在肺癌組織中。性激素具有調(diào)節(jié)肺細(xì)胞分化、成熟的作用，同時(shí)肺癌組織中雌激素受體、孕激素受體高表達(dá)導(dǎo)致肺癌組織內(nèi)分泌環(huán)境發(fā)生變化。另外肺癌細(xì)胞在癌變過(guò)程中，可能啟動(dòng)了雌激素受體及孕激素受體的蛋白合成基因，合成受體蛋白[5，6]。雌激素與雌激素受體結(jié)合發(fā)揮生理效應(yīng)。既往認(rèn)為ER是一種配體依賴(lài)性轉(zhuǎn)錄激活因子，近年來(lái)的研究顯示，在沒(méi)有配體的情況下，ER也會(huì)與其他細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路發(fā)生作用，即配體非依賴(lài)性激活，包括其磷酸化，其與生長(zhǎng)因子、孕激素受體、癌基因/抑癌基因蛋白等通路的相互作用，從而參與靶細(xì)胞的分化、增生、正常生理功能維持的調(diào)節(jié)，并且雌激素相關(guān)腫瘤發(fā)病以及對(duì)雌激素拮抗劑藥物耐藥等與ER的這些作用有關(guān)[7-9]。雌激素是乳腺癌的生物學(xué)標(biāo)志物，是目前用于比較可靠的治療、判斷乳腺癌預(yù)后的指標(biāo)[10，11]。研究顯示乳腺癌ER呈陽(yáng)性的組中，ERαmRNA水平呈高表達(dá)，且ERα基因突變率高，這些變化導(dǎo)致雌激素受體對(duì)雌激素的敏感性顯著增加，從而促使細(xì)胞增殖，誘發(fā)癌癥的發(fā)生[12，13]。也有學(xué)者研究，結(jié)腸癌、直腸癌中ER的表達(dá)水平也顯著升高，尤其是進(jìn)展期的結(jié)腸癌及直腸癌，其水平高于早期，并且同時(shí)表達(dá)ER及PR的患者生存期縮短，因此認(rèn)為雌激素受體及孕激素受體的表達(dá)與惡性腫瘤的進(jìn)展具有相關(guān)性[14]。

表2　是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)比較[n（%）]

肺腺癌（lung adenocarcinoma）是肺癌的一種，屬于非小細(xì)胞癌。不同于鱗狀細(xì)胞肺癌，肺腺癌較容易發(fā)生于女性及不抽煙者[15]。起源于支氣管黏膜上皮，少數(shù)起源于大支氣管的黏液腺。發(fā)病率比鱗癌和未分化癌低，發(fā)病年齡較小，女性相對(duì)多見(jiàn)。多數(shù)腺癌起源于較小的支氣管，為周?chē)头伟?。早期一般沒(méi)有明顯的臨床癥狀，往往在胸部X線(xiàn)檢查時(shí)被發(fā)現(xiàn)。表現(xiàn)為圓形或橢圓形腫塊，一般生長(zhǎng)較慢，但有時(shí)早期即發(fā)生血行轉(zhuǎn)移。淋巴轉(zhuǎn)移則發(fā)生較晚。在本次研究中，肺腺癌組織均有不同程度的ER、PR表達(dá)，提示肺腺癌為內(nèi)分泌相關(guān)的惡性腫瘤。在不同性別、臨床分期的肺腺癌組織中ER、PR表達(dá)沒(méi)有顯著差異。但是ER表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的分化程度具有一定的相關(guān)性，對(duì)于低分化及中分化的腺癌，ER的表達(dá)更高。但是PR的表達(dá)與肺腺癌分化程度沒(méi)有明顯的相關(guān)性，不同分化程度的肺腺癌PR的表達(dá)相似。目前的研究顯示，ER、PR在不同的腫瘤組織中與臨床分期、病理分型、分化程度等的相關(guān)性不同。目前的研究顯示性激素與肺癌的關(guān)系具有兩方面性，一方面具有抑癌的作用，一方面也有致癌的作用。機(jī)體內(nèi)的激素環(huán)境失衡，無(wú)論過(guò)多或者減少，都是導(dǎo)致癌癥發(fā)生的誘因。性激素本身不致癌，但是其能夠促進(jìn)靶細(xì)胞增殖，導(dǎo)致致癌物質(zhì)更容易發(fā)生作用，啟動(dòng)致癌過(guò)程。性激素也有促催化劑作用，促進(jìn)癌細(xì)胞起始階段的增殖，還能夠促使癌細(xì)胞的迅速增殖。在本次研究中C-erbB-2在肺腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為10.0%。研究顯示，C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)提示肺腺癌的惡性程度較高。本研究發(fā)現(xiàn)低分化腺癌的陽(yáng)性率更高，提示患者預(yù)后較差。另外本研究還提示，發(fā)生骨轉(zhuǎn)移患者與未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的患者ER、PR及C-erbB-2的陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

綜上所述，肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2均有一定程度的表達(dá)，說(shuō)明肺腺癌是內(nèi)分泌相關(guān)腫瘤，內(nèi)分泌靶向治療可以作為今后研究的方向之一。

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Expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma

QIN WenjingZHANG Shuanglin
Department of Respiratory Medicine，the First Affiliated Hospital of He'nan University，Kaifeng475000，China

R734.2

A

1673-9701（2016）12-0008-03

河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目（13A320061）

2016-01-16）