孫　燁，劉　威，鄭　劍，呂　媛，黃海燕，潘柳波，王　舟，黃　薇，劉建軍，

2011—2014年深圳市貝類產(chǎn)品生物毒素污染狀況調(diào)查

孫燁1，2，劉威2，鄭劍1，2，呂媛1，黃海燕2，潘柳波2，王舟2，黃薇2，劉建軍2，*

（1.湖 南師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系，湖南長沙410006；2.深 圳市疾病預(yù)防控制中心，廣東深圳518055）

目的： 了解2011-2014年深圳市貝類產(chǎn)品的生物毒素污染狀況。方法：采集2011—2014年深圳市6個區(qū)386份23種貝類樣品。依據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測了樣品的麻痹性貝類毒素(PSP)、腹瀉性貝類毒素(DSP)、神經(jīng)性貝類毒素(NSP)和遺忘性貝類毒素(ASP)水平。結(jié)果：386份樣品的毒素超標(biāo)率為20.21%(78/386)，其中PSP超標(biāo)率3.11%(12/386)，DSP超標(biāo)率18.13% (70/386)，未檢出NSP和ASP超標(biāo)樣。23種貝類中，有16種DSP超標(biāo)，3種PSP超標(biāo)。DSP超標(biāo)以花蚧、毛蚶、生蠔等貝類最為嚴(yán)重，而PSP超標(biāo)以圓貝最為突出。結(jié)論：近年來深圳市貝類產(chǎn)品存在DSP和PSP污染，應(yīng)加強衛(wèi)生監(jiān)管，確保消費者食用安全。

生物毒素；麻痹性貝類毒素；腹瀉性貝類毒素；酶聯(lián)免疫法

【ABSTRACT】OBJECTIVE: To investigate toxin contaminations of shellfish products in Shenzhen city from 2011 to 2014. METHODS：We collected 386 samples of 23 types of shellfish from six districts of Shenzhen city. We tested and evaluated the levels of paralytic shellfish poison (PSP)，diarrheic shellfish poison(DSP)，neurotoxin shellfish poison(NSP) and amnesic shellfish poison(ASP) in the samples by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS：There were 78 samples exceeded limits in 386 samples with a over-limit ratio of 20.21%，among which PSP was 3.11% (12/386) and DSP was 18.13%(70/386). But NSP and ASP were both normal. There were 16 kinds of shellfish with DSP and 3 kinds of shellfish with PSP over limits. DSP contamination was serious in Ruditapes philippinarum，Scapharca subcrenata and Ostrea gigas thunberg，while PSP excess was mostly in Circle Shellfish. CONCLUSION：In recent years DSP and PSP were contaminants in shellfish products in Shenzhen city. We need to strengthen health supervision and guarantee consumer food safety.

【KEY W ORDS】biotoxin；paralytic s hellfish p oison；diarrheic s hellfish p oison；enzyme-linked i mmunosorbent a ssay

近年來，海洋環(huán)境的惡化已致人類食用海產(chǎn)品出現(xiàn)健康損傷的事件不斷增多，海洋生物毒素已對人們的健康構(gòu)成潛在威脅[1-2]。生物毒素是由各種生物(動物、植物、微生物)產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，為天然毒素。生物毒素的種類繁多，幾乎包括所有類型的化合物，生物活性也很復(fù)雜，其不僅具有毒性作用，而且也具有藥理作用，常用作生理科學(xué)研究的工具藥，也被用作藥物。按來源可分為植物毒素、動物毒素、海洋毒素和微生物毒素等。為了解深圳經(jīng)濟特區(qū)內(nèi)海產(chǎn)品的生物毒素污染狀況，本研究在2011—2014年間從深圳市采集了23種貝類海產(chǎn)品，并對多種貝類毒素進(jìn)行了檢測，為保障市民的食品安全，采取有針對性的預(yù)防措施提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1貝樣采集

2011—2014年在深圳市6個城區(qū)的菜市場、生鮮批發(fā)市場采集新鮮貝樣，包括生蠔、蟶子、元貝、帶子等23個品種，386份樣品。其中福田區(qū)77份，羅湖區(qū)54份，南山區(qū)54份，鹽田區(qū)49份，寶安區(qū)79份，龍崗區(qū)73份。每份樣品采集5 kg。

1.2樣品前處理

采集后的貝樣冷凍保存后迅速送至實驗室。去離子水洗凈貝殼，切斷閉殼肌，開殼，去離子水淋洗內(nèi)部去除泥沙等雜質(zhì)，取出全部的貝肉及腺體，勿割破肉體，充分瀝干水分，勻漿機勻漿。勻漿后的貝肉逐個編號分裝，進(jìn)行貝類毒素的提取或置-20 ℃冰箱冷凍儲藏備用。

1.3樣品檢測

采用酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)分別對樣品中麻痹性貝類毒素(paralytic shellfish poison，PSP)、腹瀉性貝類毒素(diarrheic shellfish poison，DSP)、神經(jīng)性貝類毒素(neurotoxin shellfish poison，NSP)和遺忘性貝類毒素(amnesic shellfish poison，ASP)含量進(jìn)行檢測。按照檢測試劑盒(Abraxis公司)操作說明書進(jìn)行。利用TECAN 3000全波長酶標(biāo)儀在450 nm處測量吸光度值。以標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值對質(zhì)量濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，使得R2達(dá)到0.99以上。根據(jù)測量樣品的吸光度值，查得樣品的質(zhì)量濃度，計算樣品中的毒素含量。每個樣品設(shè)3個復(fù)孔，計算平均值。要求標(biāo)準(zhǔn)品變異系數(shù)＜10%，樣品變異系數(shù)＜15%。

1.4評價依據(jù)及分析

參照文獻(xiàn)[3]和中國國家標(biāo)準(zhǔn)及國際食品法典(Codex Alimentarius Commission，CAC)標(biāo)準(zhǔn)對污染物進(jìn)行評價。應(yīng)用Excel建立數(shù)據(jù)庫，對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。

2　結(jié)果

2.1不同年份貝類毒素超標(biāo)率

我們對全部386份樣品進(jìn)行檢測，測其吸光度取平均值，結(jié)果變異系數(shù)＜10%，所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線R2均在0.99以上，吸光度變異系數(shù)＜15%。我們檢測發(fā)現(xiàn)386份樣品中有78份樣品毒素超標(biāo)，超標(biāo)率20.21%。其中PSP超標(biāo)率3.11%(12/386)，DSP超標(biāo)率18.13% (70/386)， 而NSP和ASP均未檢出超標(biāo)情況。如表1所示，2011-2014年，DSP檢測樣本每年均存在超標(biāo)情況，分別是20%、17.5%、9.8%和22.9%，以2014年為最高；超標(biāo)范圍是203.4～521.9 μg/kg。PSP只有2011年和2012 年存在超標(biāo)情況，分別是18.3%和0.6%；超標(biāo)范圍是901.8～1 619.2 μg/kg。

表1　2011—2014年386份樣品貝類毒素超標(biāo)檢測結(jié)果

2.2不同種類貝類DSP和PSP超標(biāo)率

我們進(jìn)一步對23種貝類進(jìn)行DSP檢測，發(fā)現(xiàn)有16種超標(biāo)，7種未超標(biāo)，其中白貝、太白、貴妃蚌、花螺、角螺和東岡螺雖然只檢測了1份樣本，但均超標(biāo)。選取抽檢數(shù)量≥8份的樣本，對10種貝類進(jìn)行DSP檢測，發(fā)現(xiàn)8種超標(biāo)，2種未超標(biāo)，見表2。對于樣本量較多的生蠔、蟶子、圓貝、帶子和扇貝，超標(biāo)率在11.59%～23.81%之間不等，以生蠔為最高。在樣本量較少的花蚧、毛蚶、象牙蚌等樣本中，超標(biāo)率最高的是花蚧，為44.44%。

表2　不同種類貝類DSP和PSP超標(biāo)率*

PSP檢測發(fā)現(xiàn)只有生蠔、圓貝和帶子存在超標(biāo)情況，分別是3.17%、15.79%和1.59%，以圓貝為最高。

3　討論

隨著人們生活水平的普遍提高和食品消費結(jié)構(gòu)的普遍升級，人們對海產(chǎn)品的需求大為增加，海產(chǎn)品的食品安全問題也倍受重視，而海水的環(huán)境污染是影響海產(chǎn)品食品安全的首要因素。除水體污染外，關(guān)注較多的為貝類毒素、河豚毒素、雪卡毒素、芋螺毒素等的污染狀況，這些海洋生物毒素已成為社會非常重視的食品安全問題。有些有毒有害物質(zhì)常以蓄積方式殘留在水生動物體內(nèi)，由于半衰期較長，不易分解、排泄，形成急性、慢性的毒性反應(yīng)，有的還具有致畸、致癌、致突變的潛在危害。貝類毒素是因為貝殼類動物攝取有毒藻類而在體內(nèi)積累的毒素。貝類毒素按其侵襲的器官組織和臨床表現(xiàn)可分為4類，即PSP、DSP、NSP和ASP。從近4年的監(jiān)測數(shù)據(jù)來看，深圳市存在PSP和DSP的污染。且DSP的超標(biāo)率(18.13%)遠(yuǎn)高于PSP(3.11%)，這與往年文獻(xiàn)報道[4-5]的食品安全風(fēng)險監(jiān)測的結(jié)果較為一致。

DSP的主要成分大田軟海綿酸(okadaic acid，OA)具有一定的促癌作用，在很低的劑量下也會對人體健康產(chǎn)生威脅[6]。有關(guān)文獻(xiàn)顯示深圳市近岸海域存在DSP的污染，且夏秋季含量較高，提示DSP在貝類體內(nèi)的積累具有一定的季節(jié)性變化特征，這種變化與氣候有關(guān)，推測氣溫的升高，增加了藻類的滋生和蔓延，貝類有機會攝入更多的藻類導(dǎo)致毒素的蓄積[4]。而DSP的中毒癥狀主要是腹瀉，其危害性往往被人們忽視。目前雖然尚未有食用含DSP貝類致死的報道，但是食用含DSP貝類或被其污染后的食物的中毒事件卻常有報道[1]。因此，在注重食品安全的大環(huán)境下，加強對DSP的宣傳、監(jiān)管和檢測是十分必要的。

貝類種類眾多，現(xiàn)存種類約1.1萬種，常見的有牡蠣、貽貝、文蛤、生蠔等，貝類中絕大多數(shù)種類均可食用。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)深圳市內(nèi)有16種貝類DSP超標(biāo)，3種貝類PSP超標(biāo)。因此，市民在消費時應(yīng)慎食花蚧、毛蚶、生蠔、蟶子、圓貝和扇貝等雙殼貝類，每次進(jìn)食量不宜過多。如進(jìn)食貝類后出現(xiàn)舌尖、指端等部位麻痹、刺痛或胃腸道不適等癥狀，應(yīng)立即就醫(yī)。此外，加強宣傳教育、建立監(jiān)控和檢測網(wǎng)絡(luò)是防治其危害的主要措施。

[1] 周潔，周志峰，鄧凱杰，等. 一起貝類毒素引發(fā)的食物中毒[J]. 職 業(yè)與健康，2013，29(16)：2025-2029.

[2] 鐘苑芳，江海棠，李云峰，等. 一 起因食用響螺所致食物中毒的調(diào)查與分析[J]. 中 國初級衛(wèi)生保健，2014，28(2)：104-105.

[3] 鄭云雁. 食品中污染物的中國國家標(biāo)準(zhǔn)及國際法典標(biāo)準(zhǔn)對比——化學(xué)污染物[J]. 中 國食品衛(wèi)生雜志，2002，14(1)：4 7-53.

[4] 黃海燕，黃愛君，劉建軍，等. 深 圳市海域貝類腹瀉性毒素的污染狀況分析[J]. 中 國衛(wèi)生檢驗雜志，2010，20(3)：624-625.

[5] 王舟，黃薇，潘柳波，等．2011年深圳市水產(chǎn)品衛(wèi)生狀況及風(fēng)險評估[J]．中國公共衛(wèi)生管理，2012，28(5)：595-597．

[6] Matias WG，Creppy EE．5-Methyldeoxy cytosine as a biological marker of DNA damage induced by okadaic acid in vero cells[J]．Environ T oxicol W ater Q ual，1998，13：83-881．

Biotoxin of shellfish products in Shenzhen city from 2011 to 2014

SUN Ye1，2，LIU Wei2，ZHENG Jian1，2，LVU..Yuan1，HUANG Haiyan2，PAN Liubo2，WANG Zhou2，HUANG Wei2，LIU Jianjun2，*
(1. Department of Preventive Medicine, The Medicine school of Hunan Normal University, Changsha 410006, Hunan; 2. Key Laboratory of Modern Toxicology of Shenzhen, Shenzhen Center for Disease Control and Prevention, Nanshan District, Shenzhen 518055, Guangdong, China)

R994.4

A

1004-616X(2016)02-0149-03

1 0.3969/j.issn.1004-616x.2016.02.014

2015-04-07；

2015-10-22

深圳市基礎(chǔ)研究項目(JCYJ20130329103949656)

作者信息： 孫燁，E-mail：cxd0540@sina.cn。*

，劉建軍，E-mail：j unii8@126.com