李亞君，劉　宇，牛龍剛，楊逸童，張明升

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乙醇對(duì)大鼠不同臟器微動(dòng)脈的作用及其機(jī)制研究

李亞君，劉宇，牛龍剛，楊逸童，張明升

目的觀察不同預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上乙醇對(duì)大鼠不同臟器微動(dòng)脈的作用及其機(jī)制的研究。方法采用PowerLab Chart和DMT微血管環(huán)張力記錄系統(tǒng)，觀察靜息狀態(tài)及不同預(yù)收縮劑(0.3 μmol/L U46619、39 mmol/L KCl、0.000 3 μmol/L ET)基礎(chǔ)上乙醇對(duì)大鼠不同臟器微動(dòng)脈環(huán)的收縮作用并比較其差異性；觀察不同激酶抑制劑SB239063、PD98059、Y27632對(duì)乙醇所致的冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響；觀察鈣通道阻斷劑硝苯地平對(duì)乙醇所致的大腦中動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響。結(jié)果靜息狀態(tài)下，0.1%、0.3%、1%濃度的乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)的靜息張力無明顯作用；在不同的預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上，乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)有濃度依賴性的收縮作用；在預(yù)孵不同激酶抑制劑后，對(duì)于不同濃度的乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮有不同程度的抑制作用；鈣通道阻斷劑硝苯地平可以抑制乙醇所致大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮作用。結(jié)論在預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上，乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈具有濃度依賴性的收縮作用，該收縮作用可能與絲裂原活化蛋白激酶、Rho激酶和鈣通道有關(guān)。

微動(dòng)脈；乙醇；激酶；鈣通道；血管平滑肌

酒主要成分是乙醇，隨著生活水平的提高，全球飲酒人數(shù)呈遞增趨勢(shì)，而乙醇對(duì)人類健康的影響也受到越來越多的關(guān)注，作為心腦血管疾病的誘因之一，乙醇已成為近年來研究的熱點(diǎn)。已有研究證明適量飲酒可以降低冠心病的死亡率[1-2]，在高血壓的模型大鼠中，低劑量的乙醇可以降低血壓[3]；乙醇可以引起家兔胸主動(dòng)脈舒張，而這種舒張作用可能與血管平滑肌細(xì)胞肌質(zhì)網(wǎng)Ca2+的釋放和胞外Ca2+的內(nèi)流有關(guān)[4]。前期研究表明：長(zhǎng)期大量飲酒可以改變大鼠冠狀動(dòng)脈肌源性的反應(yīng)，表現(xiàn)出對(duì)硝普鈉和吡那地爾舒張作用的減弱，對(duì)血栓素A2(TXA2)受體激動(dòng)劑U46619、K-IR通道抑制劑BaCl2、K-Ca通道抑制劑四乙胺(TEA)的收縮反應(yīng)敏感性增加[5]，但缺乏急性酒精的刺激對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)影響的研究。

絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族中p38MAPK與血管舒縮反應(yīng)的調(diào)節(jié)有著密切的關(guān)系，其抑制劑SB239063能在磷酸化水平阻斷生物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)在血管的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用[6]，其抑制劑PD98059可以抑制ERK的上游激酶MEK；Rho激酶與細(xì)胞有絲分裂、骨架調(diào)整、細(xì)胞收縮等一系列生命活動(dòng)現(xiàn)象有關(guān)，Y27632是選擇性的Rho激酶抑制劑，通過與GTP結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)性的抑制Rho激酶的活性[7]，使平滑肌松弛。乙醇引起的冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮是否與以上激酶有關(guān)，國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。

鈣通道普遍存在于各種組織中，是控制細(xì)胞外Ca2+跨膜內(nèi)流的主要途徑，胞外Ca2+的內(nèi)流是興奮-收縮耦聯(lián)和興奮-分泌耦聯(lián)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，而對(duì)于乙醇引起的大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮與Ca2+有無關(guān)系，需要進(jìn)一步的證明。

本實(shí)驗(yàn)擬采用離體血管環(huán)的實(shí)驗(yàn)方法，觀察在靜息狀態(tài)下乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈肌源性的反應(yīng)；在不同預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上，乙醇對(duì)各微動(dòng)脈的收縮作用及其差異性；在預(yù)收縮基礎(chǔ)上，SB239063、PD98059、Y27632對(duì)乙醇引起的冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響；在預(yù)收縮基礎(chǔ)上，硝苯地平對(duì)乙醇引起的大腦中動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響。

1　材料與方法

1.1藥品與試劑乙醇購自天津市大茂化學(xué)試劑廠，TXA2受體激動(dòng)劑U46619、內(nèi)皮素(ET)、SB239063、PD98059、Y27632均購自Sigma公司。正常生理平衡液PSS： NaCl 144 mmol/L，KCl 5.8 mmol/L，MgCl21.2 mmol/L，CaCl22.5 mmol/L，Glucose 11.1 mmol/L，HEPES 5 mmol/L；含60 mmol/L KCl PSS：NaCl 89.8 mmol/L，KCl 60 mmol/L，MgCl21.2 mmol/L，CaCl22.5 mmol/L，Glucose 11.1 mmol/L，HEPES 5 mmol/L；含39 mmol/L KCl PSS：NaCl 110.8 mmol/L，KCl 39 mmol/L，MgCl21.2 mmol/L，CaCl22.5 mmol/L，Glucose 11.1 mmol/L，HEPES 5 mmol/L，試劑均為市售分析純。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康雄性SD大鼠，體重220 g～250 g，3個(gè)月齡，購自山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，在藥理教研室動(dòng)物房喂養(yǎng)2周后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備離體微血管環(huán)張力測(cè)定儀，購自丹麥DMT公司；PowerLab Chart 生物信號(hào)采集記錄系統(tǒng)，購自澳大利亞 AD 儀器；恒溫水浴箱，購自成都泰盟科技有限公司；體視顯微鏡，購自江西鳳凰體視顯微鏡XTL-165-VT連續(xù)變倍45×/90×/180×；PHS-3C pH 計(jì)，購自上海雷磁公司；賽多利斯 BS 124 S 精密電子天平，購自德國(guó) Sartorius 公司；顯微外科手術(shù)器械，購自上海醫(yī)療器械(集團(tuán))有限公司。

1.4離體微動(dòng)脈環(huán)的制備取大鼠，斷頭處死，立即取出心臟置于4 ℃的PSS液中，迅速擠壓心臟，直至液體清亮無血；打開腹腔，沿腹主動(dòng)脈取出兩側(cè)腎臟；打開顱骨，在頭顱下輕輕取出大腦組織；取出的組織均放在提前在冰箱中預(yù)冷的PSS液中以備用。在顯微鏡下，用顯微器械輕輕剖離周圍組織，分別分離出大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈，將游離的動(dòng)脈剪成2 mm長(zhǎng)的動(dòng)脈環(huán)，放入含有5 mL預(yù)冷的PSS液浴槽中，并用鋼絲固定在DMT傳感器上。

1.5實(shí)驗(yàn)方法①動(dòng)脈環(huán)在浴槽中維持1 h，在此過程中，持續(xù)通入100%的氧氣并給予恒溫，每隔15 min用恒溫的PSS液更換1次，在實(shí)驗(yàn)開始前，用含有60 mmol/L KCl的PSS液連續(xù)刺激血管，當(dāng)兩次血管收縮幅度相差不超過10%時(shí)，認(rèn)為血管反應(yīng)良好，可正式開始實(shí)驗(yàn)。②靜息狀態(tài)下，在正常的PSS液中累計(jì)加入0.1%、0.3%、1%的乙醇，觀察不同濃度乙醇對(duì)大鼠微動(dòng)脈環(huán)張力的影響。③在不同的預(yù)收縮劑(0.3 μmol/L U46619、39 mmol/L KCl、0.000 3 μmol/L ET)基礎(chǔ)上，觀察不同濃度乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)張力的影響，并比較其有無組織間差異性。以60 mmol/L KCl對(duì)微動(dòng)脈的收縮幅度為100%，計(jì)算在不同預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上不同濃度乙醇對(duì)微動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度。④在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，預(yù)孵不同激酶抑制劑SB239063、PD98059、Y27632，觀察不同激酶抑制劑對(duì)不同濃度乙醇所致的冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響，以60 mmol/L KCl對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為100%，計(jì)算預(yù)孵不同激酶抑制劑后，不同濃度乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度。⑤在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，預(yù)孵硝苯地平，觀察對(duì)不同濃度乙醇所致的大腦中動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響，以60 mmol/L KCl對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為100%，計(jì)算預(yù)孵硝苯地平后，不同濃度乙醇對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度。

2　結(jié)　果

2.1不同濃度乙醇對(duì)大鼠微動(dòng)脈環(huán)靜息張力的影響在靜息狀態(tài)下，向浴槽中累計(jì)加入0.1%、0.3%、1%的乙醇，對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)的張力并沒有顯著的影響。

2.2在U46619(0.3 μmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇對(duì)微動(dòng)脈的收縮作用在U46619 (0.3 μmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上，大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)的張力隨著乙醇濃度(0.1%、0.3%、1%)的升高而增高。以60 mmol/L KCl對(duì)各微動(dòng)脈的收縮幅度為100%，在U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，不同濃度乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(8.34±1.78)%、(28.76±2.99)%、(78.27±17.11)%，對(duì)腎動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(6.46±1.37)%、(12.43±3.19)%、(37.81±6.99)%，對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(11.46±3.40)%、(33.41±8.49)%、(87.93±8.40)% 。以乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為對(duì)照組，0.3%、1%的乙醇在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上對(duì)腎動(dòng)脈環(huán)的收縮差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見圖1。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

2.3在KCl(39 mmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇對(duì)微動(dòng)脈環(huán)的收縮作用在39 mmol/L KCl的預(yù)收縮基礎(chǔ)上，大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)的張力隨著乙醇濃度(0.1%、0.3%、1%)的增高而增高，以60 mmol/L KCl 對(duì)微動(dòng)脈的收縮幅度為100%，在KCl預(yù)收縮基礎(chǔ)上，不同濃度乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(5.93±0.87)%、(17.50±4.42)%、(36.74±2.02)%。對(duì)腎動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(3.03±2.28)%、(9.52±4.55)%、(25.16±2.26)%。對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別是(2.79±0.75)%、(16.32±5.61)%、(41.55±7.84)%。以乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為對(duì)照組，在39 mmol/L KCl預(yù)收縮基礎(chǔ)上，0.3%、1%的乙醇對(duì)腎動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，0.1%的乙醇對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見圖2。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

2.4在ET(0.000 3 μmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇對(duì)微動(dòng)脈的收縮作用在0.000 3 μmol/L ET 的預(yù)收縮基礎(chǔ)上，大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)的張力隨著乙醇濃度(0.1%、0.3%、1%)的增高而增高，以60 mmol/L KCl對(duì)微動(dòng)脈的收縮幅度為100%，在ET預(yù)收縮基礎(chǔ)上，不同濃度乙醇對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈的收縮幅度分別為(9.36±4.02)%、(19.08±7.91)%、(63.05±8.58)%，對(duì)腎動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(3.65±1.46)%、(11.98±3.32)%、(26.69±5.77)%，對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(11.00±1.97)%、(25.86±5.76)%、(60.91±6.13)%。以乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為對(duì)照組，在0.000 3 μmol/L ET預(yù)收縮基礎(chǔ)上，0.1%、1%的乙醇對(duì)腎動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見圖3。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

2.5SB239063對(duì)U46619(0.3 μmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上不同濃度乙醇所致的冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響以60 mmol/L KCl對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為100%，在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，0.1%、0.3%、1%的乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(10.92±6.41)%、(24.87±5.38)%、(70.97±22.57)%，預(yù)孵3μmol/LSB239063時(shí)，可以抑制0.3%乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮(P<0.05)，其收縮百分比為(10.16±7.06)%。SB239063對(duì)0.1%、1%乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮無顯著影響。詳見圖4。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

圖4SB239063對(duì)U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上不同濃度乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響

2.6PD98059對(duì)U46619(0.3 μmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上不同濃度乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響 以60 mmol/L KCl對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為100%，在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，0.1%、0.3%、1%的乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(9.54±7.59)%、(23.12±13.77)%、(51.17±17.86)%，預(yù)孵3 μmol/L PD98059時(shí)，可以抑制0.1%、0.3%乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮作用(P<0.05)，其收縮百分比分別為(0.25±3.08)%、(4.24±8.45)%，PD98059對(duì)1%乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮無顯著影響。詳見圖5。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

圖5PD98059對(duì)U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上不同濃度乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響

2.7Y27632對(duì)U46619(0.3 μmol/L)預(yù)收縮基礎(chǔ)上不同濃度乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響以60 mmol/L KCl對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為100%，在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，0.1%、0.3%、1%的乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(7.10±2.52)%、(28.46±18.49)%、(68.34±12.07)%。預(yù)孵1 μmol/L Y27632時(shí)，可以抑制0.1%、1%的乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮作用(P<0.05)，其收縮百分比分別為(0.61±0.20)%、(33.33±12.49)%，Y27632對(duì)0.3%乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮無顯著影響。詳見圖6。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

圖6Y27632對(duì)U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上不同濃度乙醇所致冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響

2.8硝苯地平對(duì)U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇所致的大腦中動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響以60 mmol/L KCl對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度為100%，在0.3 μmol/L U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上，0.1%、0.3%、1%的乙醇對(duì)大腦中動(dòng)脈環(huán)的收縮幅度分別為(12.30±8.73)%、(32.16±16.76)%、(80.19±20.15)%，預(yù)孵硝苯地平0.3 μmol/L時(shí)，可以抑制0.1%、0.3%、1%的乙醇對(duì)大腦中動(dòng)脈的收縮作用(P<0.05)，其收縮百分比分別為(2.30±1.29)%、(11.52±8.26)%、(55.42±21.98)%。詳見圖7。

注：與對(duì)照組比較，★P<0.05。

圖7硝苯地平對(duì)U46619預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇所致的大腦中動(dòng)脈環(huán)收縮作用的影響

3　討　論

本實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度乙醇在不同預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上對(duì)不同組織來源微動(dòng)脈的收縮作用，結(jié)果表明：在預(yù)收縮劑基礎(chǔ)上，大鼠冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈環(huán)的張力隨著乙醇濃度的增高而增高，并具有組織差異性，且該收縮可能與絲裂原活化蛋白激酶、Rho激酶和鈣通道有關(guān)。

U46619作為血栓素A2受體激動(dòng)劑，可以引起大鼠不同臟器微動(dòng)脈環(huán)收縮，前期研究證明：U46619引起的微動(dòng)脈收縮與一氧化氮(NO)和前列環(huán)素有關(guān)[8]，乙醇可以加強(qiáng)U46619 引起的微動(dòng)脈的收縮作用，也可能與NO和前列環(huán)素有關(guān)，而NO和前列環(huán)素是血管內(nèi)皮細(xì)胞生成和釋放的主要舒張血管物質(zhì)。在體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，乙醇可以降低其生存率，增加凋亡比例，破壞內(nèi)皮細(xì)胞的正常形態(tài)[9]，國(guó)外已有報(bào)道，通過長(zhǎng)期乙醇的攝入，可以破壞NO介導(dǎo)的腦小動(dòng)脈的舒張作用[10]，因此進(jìn)一步的血管環(huán)實(shí)驗(yàn)探討在預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇引起的微動(dòng)脈的收縮是否與NO和前列環(huán)素有關(guān)。在血管平滑肌細(xì)胞上存在多種類型的離子通道，其中鉀通道分布最廣泛，本實(shí)驗(yàn)觀察到在KCl預(yù)收縮基礎(chǔ)上乙醇可以引起微動(dòng)脈收縮，說明乙醇可以加強(qiáng)KCl引起的膜去極化的作用，這可能與乙醇阻斷血管平滑肌細(xì)胞上某些K+通道的作用有關(guān)。內(nèi)皮素是血管內(nèi)皮生成的縮血管物質(zhì)，在心血管動(dòng)態(tài)平衡中起關(guān)鍵作用，其縮血管效應(yīng)與鈣通道的開放和磷脂酶活化有關(guān)[11]，乙醇對(duì)ET引起的微動(dòng)脈收縮具有協(xié)同作用，該協(xié)同作用可能與激活某些鈣通道有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)：乙醇可以引起胸主動(dòng)脈的收縮，而這種收縮作用是通過增加細(xì)胞內(nèi)鈣離子來實(shí)現(xiàn)的，與氧化還原反應(yīng)和環(huán)氧酶依賴途徑有關(guān)[12]。本實(shí)驗(yàn)在預(yù)孵鈣通道阻斷劑硝苯地平時(shí)，可以抑制乙醇所致的大腦中動(dòng)脈的收縮作用，更加證實(shí)了這一觀點(diǎn)。

血管平滑肌細(xì)胞在調(diào)節(jié)血管舒縮方面起到很重要的作用，而乙醇可以通過抑制MAPK來防止大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖分裂[13-14]，MAPK在調(diào)節(jié)平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)過程中扮演關(guān)鍵的角色。本實(shí)驗(yàn)中選用MAPK家族中p38MAPK、ERK的抑制劑SB239063、PD98059，觀察到SB239063可以抑制0.1%的乙醇引起的冠狀動(dòng)脈收縮，PD98059可以抑制0.1%、0.3%的乙醇引起的冠狀動(dòng)脈的收縮；Rho激酶在MAPK系統(tǒng)的上游，自身活化可以激活MAPK，Rho相關(guān)激酶ROCK的抑制劑之一Y27632可以抑制0.1%、1%的乙醇對(duì)冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮作用。由此可以推斷乙醇引起的冠狀動(dòng)脈環(huán)的收縮作用可能與MAPK家族、Rho相關(guān)激酶有關(guān)。

乙醇在心腦血管系統(tǒng)中的作用機(jī)制比較復(fù)雜，本實(shí)驗(yàn)只是在血管環(huán)水平簡(jiǎn)單觀察乙醇對(duì)微動(dòng)脈的收縮作用及其與激酶抑制劑的作用，其具體的收縮機(jī)制還需要在細(xì)胞水平和分子水平上做進(jìn)一步的證明。近年來，全球飲酒人數(shù)越來越多，乙醇對(duì)人類健康的危害也受到重視，探討乙醇的作用機(jī)制變得愈發(fā)重要。

[1]Belleville J.The French paradox： possible involvement of ethanol in the protective effect against cardiovascular diseases[J].Nutrition，2002，18(2)：173-177.

[2]Albert C，Manson M，Cook JE，et al.Moderate alcohol consumption and the risk of sudden cardiac death among US male physicians[J].Circulation，1999，100(9)：944-950.

[3]Vasdev S，Gill V，Singal PK.Beneficial effect of low ethanol intake on the cardiovascular system：possible biochemical mechanisms[J].Vasc Health Risk Manag，2006，2(3)： 263-276.

[4]Ru X，Qian L，Gao Q，et al.Alcohol induces relaxation of rat thoracic aorta and mesenteric arterial bed [J].Alcohol Alcohol，2008，43(5)：537-543．

[5]侯曉敏.長(zhǎng)期大量飲酒大鼠冠狀動(dòng)脈肌源性反應(yīng)性的改變以及?；撬岷途S生素C的保護(hù)作用[D].太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2011.

[6]郝志楠，鄭勇斌.PI3K/ AKT 及 MEK/ ERK 信號(hào)通路抑制劑對(duì)結(jié)直腸癌血管內(nèi)皮細(xì)胞管道形成的作用[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2014，11(23)：30-35.

[7]Rembold CM.Regulation of contraction and relaxation in arterial smooth muscle[J].Hypertension，1992，20：129-137.

[8]阮耀祥.大鼠不同部位微動(dòng)脈對(duì)收縮劑反應(yīng)的比較性研究[D].太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2013.

[9]齊倩.乙醇對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞黏著斑激酶的影響及其細(xì)胞毒性作用[D].石家莊：河北醫(yī)科大學(xué)，2014.

[10]Toda N，Ayajiki K.Vascular actions of nitric oxide as affected by exposure to alcohol [J].Alcohol Alcohol，2010，45(4)：347-355.

[11]Maaaki T，Kimura S，Yanagisawa M，et al.Molecular and cellular mechanism of endothelin regulation.Implications for vascular function[J].Circulation，1991，84(4)：1457-1468.

[12]Yogi A，Callera GE，Hipolito UV，et al.Ethanol-induced vasoconstriction is mediated via redox-sensitive cyclo-oxygenase-dependent mechanisms [J].Clin Sci(Lond)，2010，118(11)：657-668．

[13]Hendrickson RJ，Cahill PA，Mc Killop IH，et al.Ethanol inhibits mitogen activated protein kinase activity and growth of vascular smooth muscle cells in vitro[J].Eur Pharmacol，1998，362：251-259.

[14]Mii S，Khalil RA，Morgan KG，et al.Mitogen-activated protein kinase and proliferation of human vascular smooth muscle cells[J].Am J Physiol，1996，270：H142-H150.

(本文編輯郭懷印)

山西醫(yī)科大學(xué)(太原 030001)

張明升，E-mail：18335170902@139.com

R329R256.2

Adoi：10．3969/j．issn．1672-1349．2016．14．013

1672-1349(2016)14-1606-05

2015-10-25)