李國(guó)鋒 楊富民 張安林(.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,蘭州 70070;.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,蘭州70070;.臨夏華安生物制品有限責(zé)任公司,甘肅 臨夏 700)
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酸水解酪蛋白生產(chǎn)工藝條件優(yōu)化
李國(guó)鋒1楊富民2張安林3
(1.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,蘭州 730070;2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,蘭州730070;3.臨夏華安生物制品有限責(zé)任公司,甘肅 臨夏 731100)
為提高酸水解酪蛋白品質(zhì),試驗(yàn)采用單因素和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)水解和噴霧干燥工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明,在水解溫度92℃、鹽酸濃度35%、料液比1∶1.6、水解時(shí)間為3h時(shí),酪蛋白水解度可達(dá)到87.00%;在進(jìn)風(fēng)溫度120℃、出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h、噴霧壓力0.18Mpa時(shí),噴霧干燥產(chǎn)品感官品質(zhì)最好。
酸水解;酪蛋白;噴霧干燥
Abstract∶In order to improve the quality of casein, single factor and orthogonal design were used to optimize the process of hydrolysis and spray drying.The results show that,the degree of hydrolysis of casein was 87% when the temperature of hydrolysis was 92, the concentration of hydrochloric acid was 35%, the ratio of liquid to solid was 1.6∶1, the hydrolysis time was 3H.The sensory quality of the spray dried product was the best when the inlet temperature was 120, the air temperature was 90, and the air volume was 25m3/h and the spray pressure was 0.18Mpa.
Key words∶ Acid hydrolysis;Casein;Spray drying
牛乳蛋白的水解主要有酶水解、化學(xué)水解(如酸水解、堿水解)、物理水解(如加熱、高壓)等[1]。酸水解酪蛋白產(chǎn)品可直接用于微生物發(fā)酵中培養(yǎng)基或營(yíng)養(yǎng)發(fā)酵液的配制,提高菌種快速繁殖能力及產(chǎn)酶能力縮短發(fā)酵周期[2],提高發(fā)酵中的產(chǎn)出率。本文通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),對(duì)水解,噴霧干燥過(guò)程進(jìn)行優(yōu)化,確定酸水解酪蛋白工藝優(yōu)化的最優(yōu)條件。
1.1材料
1.1.1試劑
酪蛋白,臨夏州華安生物制品有限公司,食品級(jí);鹽酸,分析純;氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液;甲醛溶液
1.1.2設(shè)備
堿性陰離子樹(shù)脂交換柱:上海匯珠樹(shù)脂有限公司;酸水解釜:上海亞榮儀器廠(chǎng);精密pH計(jì)pHS-3C:上海精密科學(xué)儀器有限公司;TD電子天平:余姚市金諾天平儀器有限公司;LRP-5噴霧干燥塔:常州力馬干燥工程有限公司。
1.2方法
1.2.1酸水解酪蛋白生產(chǎn)工藝
具體工藝流程為:酪蛋白→酸水解→過(guò)濾→濃縮洗滌→脫色→脫酸→濃縮→噴霧干燥→成品→檢驗(yàn)包裝
1.2.2 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.2.2.1水解工藝單因素試驗(yàn)
以水解度為指標(biāo),對(duì)水解溫度、水解時(shí)間、鹽酸濃度、料液比四個(gè)因素[3]進(jìn)行單因素試驗(yàn)。采用單因素與正交試驗(yàn)相結(jié)合的方法進(jìn)行優(yōu)化工藝參數(shù),單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下:
1.水解溫度單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(料液比1∶1.6、鹽酸濃度35%、水解時(shí)間3h)設(shè)置水解溫度83℃、86℃、89℃、92℃、95℃,以水解度為指標(biāo),篩選較優(yōu)溫度。
2.水解時(shí)間單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(料液比1∶1.6、鹽酸濃度35%、水解溫度92℃),設(shè)置水解時(shí)間2h、2.5h、3h、3.5h、4h,以水解度為指標(biāo),篩選較優(yōu)時(shí)間。
3.鹽酸濃度單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(料液比1∶1.6、水解溫度92℃、水解時(shí)間3h),設(shè)置鹽酸濃度分別為15%、20%、25%、30%、35%,以水解度為指標(biāo),篩選較優(yōu)濃度。
4.料液比單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(水解溫度92℃、水解時(shí)間3h、鹽酸濃度35%),設(shè)置料液比分別為1∶1、1∶1.2、1∶1.4、1∶1.6、1∶1.8,以水解度為指標(biāo),篩選較優(yōu)液固比。
1.2.2.2噴霧干燥工藝單因素試驗(yàn)
以產(chǎn)品感官品質(zhì)為指標(biāo),對(duì)噴霧壓力、進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)風(fēng)量四個(gè)因素[13]進(jìn)行單因素試驗(yàn)。以噴霧干燥產(chǎn)品感官評(píng)分最高為終點(diǎn),采用單因素與正交試驗(yàn)相結(jié)合的方法進(jìn)行優(yōu)化工藝參數(shù),單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下:
1.噴霧壓力單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(進(jìn)風(fēng)溫度120℃、出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h)設(shè)置噴霧壓力為0.14MPa、0.16MPa、0.18MPa、0.20MPa、0.22MPa,以感官評(píng)分為指標(biāo),篩選較優(yōu)噴霧壓力。
2.進(jìn)風(fēng)溫度單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(噴霧壓力0.18MPa、出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h)設(shè)置進(jìn)口溫度為80℃、100℃、120℃、140℃、160℃,以感官評(píng)分為指標(biāo),篩選較優(yōu)進(jìn)風(fēng)溫度。
3.出風(fēng)溫度單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(噴霧壓力0.18MPa、進(jìn)風(fēng)溫度120℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h)設(shè)置出口溫度為70℃、80℃、90℃、100℃、110℃,以感官評(píng)分為指標(biāo),篩選較優(yōu)出風(fēng)溫度。
4.進(jìn)風(fēng)量單因素試驗(yàn):固定其他條件不變(噴霧壓力0.18MPa、進(jìn)風(fēng)溫度120℃、出風(fēng)溫度90℃)設(shè)置進(jìn)風(fēng)量為10m3/h、15m3/h、20m3/h、25m3/h、30m3/h,以感官評(píng)分為指標(biāo),篩選較優(yōu)進(jìn)風(fēng)量。
1.2.3正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.2.3.1水解工藝正交試驗(yàn)
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,以水解溫度、水解時(shí)間、鹽酸濃度、液固比作為因素,以水解度為指標(biāo),選用L9(34)正交表設(shè)計(jì)4因素3水平正交試驗(yàn),具體方案見(jiàn)表1。
表1 正交試驗(yàn)因素水平表
1.2.3.2噴霧干燥工藝正交試驗(yàn)
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,以噴霧壓力、進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)風(fēng)量作為因素,以感官評(píng)分為指標(biāo),選用L9(34)正交表設(shè)計(jì)4因素3水平正交試驗(yàn),具體方案見(jiàn)表2。
表2 正交試驗(yàn)因素水平表
1.2.4水解工藝水解度測(cè)定
酪蛋白水解物水解度的測(cè)定,是按照國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道[3~5]通用方法進(jìn)行,具體如下:
將所得的水解物定容至100mL,取3mL溶液于100mL燒杯中,加入57mL的蒸餾水,用0.05mol/L的NaOH溶液預(yù)先滴定至pH值等于8.2,再加入10mL的甲醛溶液,攪拌1min后再用0.05mol/LNaOH溶液滴定至pH值至9.2,并記錄消耗的NaOH溶液的體積(mL)做空白試驗(yàn)。酪蛋白水解物的水解度按下式計(jì)算:
水解度(DH%)=[M(Vi-Vo)×100/3/W-0.45]/8.2×100%
式中:M—NaOH溶液的濃度(mol/L)
Vi,Vo—樣品滴定,空白試驗(yàn)時(shí)消耗的NaOH溶液的體積(mL)
W—所用酪蛋白的質(zhì)量(g)
8.2—每克酪蛋白水解后所含的肽鍵毫摩爾數(shù)(mmol/g)
1.2.5噴霧干燥工藝感官評(píng)定
感官:感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表3,按其進(jìn)行產(chǎn)品的感官評(píng)價(jià)[6]。
表3 感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定均依照國(guó)標(biāo)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
2.1水解工藝單因素試驗(yàn)
2.1.1水解溫度對(duì)酪蛋白水解度的影響
圖1 水解溫度對(duì)酪蛋白水解度的影響
由圖1可以看出,固定水解時(shí)間、鹽酸濃度、料液比的基礎(chǔ)條件不變,在試驗(yàn)范圍內(nèi),83℃時(shí)水解度最低,隨著溫度的逐漸升高,水解度也逐漸增大[7]。到溫度達(dá)到92℃時(shí)水解達(dá)到最大。當(dāng)溫度高于92℃時(shí),隨著溫度的升高,水和蛋白質(zhì)分子親水基團(tuán)之間的氫鍵遭到破壞,酪蛋白的水解度逐漸下降。因此選溫度為92℃時(shí)為水解溫度適宜溫度。
2.1.2水解時(shí)間對(duì)酪蛋白水解度的影響
圖2 水解時(shí)間對(duì)酪蛋白水解度的影響
由圖2可以看出,固定水解溫度、鹽酸濃度、料液比的基礎(chǔ)條件不變,在試驗(yàn)范圍內(nèi),水解時(shí)間越長(zhǎng),水解度越高[4]。但是到水解時(shí)間超過(guò)3h以后,水解度增加緩慢,從生產(chǎn)工藝角度看,在最短的時(shí)間內(nèi)就能達(dá)到理想的水解度最好,且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)水解度變化不大故選擇3h為最佳水解時(shí)間。
2.1.3鹽酸濃度對(duì)酪蛋白水解度的影響
圖3 鹽酸濃度對(duì)酪蛋白水解度的影響
由圖3可以看出,固定水解溫度、水解時(shí)間、料液比的基礎(chǔ)條件不變,在試驗(yàn)范圍內(nèi),隨著鹽酸濃度的增加,水解度不斷增加[4]。當(dāng)鹽酸濃度達(dá)到35%時(shí),水解度達(dá)到最高。且鹽酸用量關(guān)系到成本高低及水解效率, 用量過(guò)高(超過(guò)35%), 中和時(shí)需消耗太多的氫氧化鈉并會(huì)給后處理帶來(lái)困難,故選擇鹽酸濃度為35%適宜。
圖4 料液比對(duì)酪蛋白水解度的影響
2.1.4料液比對(duì)酪蛋白水解度的影響
由圖4可以看出,固定水解溫度、水解時(shí)間、鹽酸濃度的基礎(chǔ)條件不變,在試驗(yàn)范圍內(nèi),隨著料液比的增加,水解度逐漸增加[4]。當(dāng)料液比達(dá)到1∶1.6時(shí),水解度已經(jīng)達(dá)到理想狀態(tài),為了節(jié)約工藝成本、結(jié)合其他三個(gè)影響因素對(duì)水解度的影響,料液比1∶1.6時(shí)為水解工藝的最佳選擇。
2.2正交試驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交試驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表4:
表4 正交試驗(yàn)結(jié)果
由極差R分析比較即C>A>D>B可以看出∶ 因素對(duì)酸水解酪蛋白的影響主次順序是CADB,即鹽酸濃度對(duì)酪蛋白的水解度影響最大,其次是水解溫度、液固比和水解時(shí)間。根據(jù)k1、k2、k3確定各因素的最優(yōu)水平組合為A2B2C3D2, 即最佳水解條件為∶ 水解溫度為92℃、水解時(shí)間為3h、鹽酸濃度為35%、料液比為1:1.6時(shí),酪蛋白水解最好。
2.3驗(yàn)證試驗(yàn)
水解試驗(yàn)結(jié)果表明,最優(yōu)提取工藝為A2B2C3D2
表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果
由表5可以看出,驗(yàn)證試驗(yàn)測(cè)得水解度平均值為87.16%,水解度高于正交試驗(yàn)中包括最優(yōu)組合在內(nèi)的任何一種組合,證明正交試驗(yàn)確定A2B2C3D2,即在水解溫度為92℃,水解時(shí)間為3h、鹽酸濃度為35%、料液比為1∶1.6時(shí),是最佳酪蛋白水解工藝。
2.4噴霧干燥工藝單因素試驗(yàn)
2.4.1噴霧壓力對(duì)酸水解酪蛋白制品感官評(píng)分的影響
噴霧壓力對(duì)酸水解酪蛋白制品[8]感官評(píng)分的影響單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6
表6 噴霧壓力對(duì)酸水解酪蛋白性質(zhì)的影響
水分含量隨噴霧壓力的升高逐漸減少。噴霧壓力對(duì)產(chǎn)品的水分含量和色澤有很大影響。噴霧壓力低,產(chǎn)品水分含量高,噴霧干燥中會(huì)有大量的粘壁現(xiàn)象,影響產(chǎn)品的感官評(píng)分。提高噴霧壓力,水分含量逐漸降低,但噴霧壓力過(guò)高,使產(chǎn)品的色澤加深,失去產(chǎn)品原有的白色和淡黃色,影響感官評(píng)分。由表6可見(jiàn),噴霧壓力選擇0.18MPa較好。
2.4.2進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)酸水解酪蛋白制品感官的影響
進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)酸水解酪蛋白制品感官的影響單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。
表7 進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)酸水解酪蛋白性質(zhì)的影響
水分含量隨進(jìn)風(fēng)溫度的提高逐漸減少[9]。進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)產(chǎn)品的吸濕性、顆粒結(jié)構(gòu)以及色澤有很大影響。進(jìn)風(fēng)溫度過(guò)低,料液干燥速度慢,產(chǎn)品水分含量高,噴霧干燥過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)粘壁現(xiàn)象,不利于產(chǎn)品的收集及保存。提高進(jìn)風(fēng)溫度,水分含量逐漸降低,但進(jìn)風(fēng)溫度過(guò)高,可能會(huì)使噴霧干燥后段物料溫度升高至其黏流溫度,因此發(fā)生熱黏壁現(xiàn)象,色澤也較深。影響產(chǎn)品的感官評(píng)分。由表7可見(jiàn),進(jìn)風(fēng)溫度120℃較適宜。
2.4.3出風(fēng)溫度對(duì)酸水解酪蛋白制品感官的影響
出風(fēng)溫度對(duì)酸水解酪蛋白制品感官的影響單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8
表8 出風(fēng)溫度對(duì)酸水解酪蛋白性質(zhì)的影響
隨著出風(fēng)溫度的提高,產(chǎn)品水分含量逐漸減少[9]。出風(fēng)溫度影響產(chǎn)品的干燥時(shí)間、水分含量和顆粒結(jié)構(gòu)。出風(fēng)溫度適宜,能縮短顆粒干燥時(shí)間,降低水分含量,避免干燥物回潮和粘壁。影響產(chǎn)品的感官評(píng)分。由表8可見(jiàn),出風(fēng)溫度應(yīng)控制在90℃為宜。
2.4.4 進(jìn)風(fēng)量對(duì)酸水解酪蛋白制品感官評(píng)分的影響
進(jìn)風(fēng)量對(duì)酸水解酪蛋白制品感官評(píng)分的影響單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表9
表9 進(jìn)風(fēng)量對(duì)酸水解酪蛋白性質(zhì)的影響
隨著進(jìn)風(fēng)量的提高,產(chǎn)品水分含量逐漸減少[10]。進(jìn)風(fēng)量影響產(chǎn)品的干燥時(shí)間、水分含量。進(jìn)風(fēng)量適宜,能縮短顆粒干燥時(shí)間,降低水分含量,避免干燥物回潮和粘壁。進(jìn)風(fēng)量過(guò)高,產(chǎn)品完全失水,影響產(chǎn)品的感官評(píng)分。由表9可見(jiàn),進(jìn)風(fēng)量應(yīng)控制在25m3/h為宜。
2.5正交試驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交試驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表10:
表10 噴霧干燥正交試驗(yàn)結(jié)果
由正交試驗(yàn)結(jié)果表10可知,噴霧壓力(A)、進(jìn)風(fēng)溫度(B)、出風(fēng)溫度(C)、進(jìn)風(fēng)量(D)等4個(gè)因素的極差(R)關(guān)系為B> C > D> A,即影響蛋白粉品質(zhì)的因素依次是進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)風(fēng)量和噴霧壓力。最優(yōu)噴霧干燥工藝條件組合為A1B2C2D2,即噴霧壓力0.18MPa、進(jìn)風(fēng)溫度120℃,出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h時(shí),噴霧干燥產(chǎn)品感官品質(zhì)最好。
2.6驗(yàn)證試驗(yàn)
噴霧干燥試驗(yàn)結(jié)果表明,最優(yōu)提取工藝為A1B2C2D2
表11 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果
由表11可以看出,驗(yàn)證試驗(yàn)測(cè)得感官評(píng)價(jià)平均值為97.0,感官評(píng)價(jià)高于正交試驗(yàn)中包括最優(yōu)組合在內(nèi)的任何一種組合,證明正交試驗(yàn)確定A1B2C2D2,即在噴霧壓力為0.18MPa,進(jìn)風(fēng)溫度為120℃、出風(fēng)溫度為90℃、進(jìn)風(fēng)量為25m3/h時(shí),是噴霧干燥產(chǎn)品感官品質(zhì)最好的工藝。
2.7成品檢測(cè)
感官指標(biāo):色澤為乳白或淡黃色,呈均勻粉末狀,無(wú)明顯顆粒,具有醬香味。
理化指標(biāo):總氮11.2%、水分5.5%、灰分1.2%,pH 值6.6、氨基氮10.0%、氯化物0%、硝酸鹽0.2%、磷酸鹽0.05%、鈉0%。
微生物指標(biāo):細(xì)菌總數(shù)<10cfu/g、大腸菌群<30MPN/100g、致病菌未檢出。
重金屬:砷(以As計(jì))≤0.0002%,鉛(以Pb計(jì))≤0.0006%。
檢測(cè)結(jié)果表明,產(chǎn)品各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到了企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
以酪蛋白為原料,用鹽酸在80-92℃下水解2-4h、為解決氯化鈉殘留問(wèn)題,在生產(chǎn)工藝上增加濃縮洗滌工序,通過(guò)3次濃縮洗滌,使產(chǎn)品質(zhì)量得到了顯著提高?;钚蕴棵撋?、強(qiáng)堿性或弱堿性陰離子樹(shù)脂一步法交換、120-90℃下噴霧干燥,生產(chǎn)酸水解酪蛋白產(chǎn)品,依據(jù)文獻(xiàn)知工藝技術(shù)是可行的[3]。本試驗(yàn)重點(diǎn)對(duì)其水解和噴霧干燥過(guò)程進(jìn)行優(yōu)化,影響水解的四個(gè)因素水解溫度、水解時(shí)間、鹽酸濃度、料液比中,本試驗(yàn)得出四個(gè)因素中鹽酸濃度對(duì)酪蛋白的水解度影響最大,其次是水解溫度、液固比和水解時(shí)間,且鹽酸濃度還影響著水解時(shí)間,與楊震等(2011)鹽酸快速水解酪蛋白工藝研究相一致;與楊葉昆(2001)酪蛋白的酸水解及其棕色化反應(yīng)產(chǎn)物在卷煙加香中的應(yīng)用相比較,水解時(shí)間由原來(lái)的18h縮短為3h,鹽酸濃度由原來(lái)的18%提高到了35%,料液比與其試驗(yàn)結(jié)論相同。提高鹽酸濃度,縮短水解時(shí)間仍可以得到較高的水解度。影響噴霧干燥的四個(gè)因素噴霧壓力、進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)風(fēng)量中,通過(guò)對(duì)鄧建華等(2006)噴霧干燥條件對(duì)速溶胡蘿卜、大豆蛋白復(fù)合飲料品質(zhì)影響研究結(jié)論以及結(jié)合酪蛋白自身的特性,本試驗(yàn)得出影響蛋白粉品質(zhì)的因素依次是進(jìn)風(fēng)溫度、出風(fēng)溫度、進(jìn)風(fēng)量和噴霧壓力,據(jù)陳啟聰(2010)香蕉粉噴霧干燥工藝優(yōu)化可知,進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度對(duì)產(chǎn)品的感官影響最大。本試驗(yàn)進(jìn)而得出產(chǎn)品最佳感官品質(zhì)的優(yōu)化條件為噴霧壓力0.18MPa、進(jìn)風(fēng)溫度120℃,出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h。
綜上所述,本試驗(yàn)對(duì)水解工藝和噴霧干燥工藝優(yōu)化,確定出了最優(yōu)條件即:水解溫度為92℃、水解時(shí)間為3h、鹽酸濃度為35%、料液比為1:1.6時(shí),酪蛋白水解最好,水解工藝達(dá)到最優(yōu)。噴霧壓力0.18MPa、進(jìn)風(fēng)溫度120℃,出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h時(shí),噴霧干燥產(chǎn)品感官品質(zhì)最好,噴霧干燥工藝達(dá)到最優(yōu)。
通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)可知,在水解溫度為92℃、水解時(shí)間為3h、鹽酸濃度為35%、料液比為1∶1.6時(shí),酪蛋白水解度可達(dá)到87.00%。
通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)可知,在噴霧壓力0.18MPa、進(jìn)風(fēng)溫度120℃,出風(fēng)溫度90℃、進(jìn)風(fēng)量25m3/h時(shí),噴霧干燥產(chǎn)品感官品質(zhì)最好。
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Optimization of production technology of acid hydrolysis of casein
LI Guo-feng1, YANG Fu-ming2, ZHANG An-lin3
(1.Gansu academy of agricultural sciences, Lan zhou 730070; 2.College of Food science and Engineering of Gansu
Agricultural University Lan zhou 730070; 3.Linxia hua an biological products co., LTD Gansu 731100 )
甘肅省科技重大專(zhuān)項(xiàng)(0801XKDN025)