江茂旺　蔣霞敏　梁晶晶　王鵬帥　阮　鵬　韓慶喜

(寧波大學(xué)海洋學(xué)院，寧波315211)

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不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼營養(yǎng)成分含量分析比較

江茂旺蔣霞敏*梁晶晶王鵬帥阮鵬韓慶喜

(寧波大學(xué)海洋學(xué)院，寧波315211)

摘要：通過探究不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼的營養(yǎng)成分及礦物元素含量變化，為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)。采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)不同生長時(shí)期(60、90、120、150日齡)虎斑烏賊內(nèi)殼營養(yǎng)成分(水分、粗灰分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、多糖、氨基酸、脂肪酸)及礦物元素[5種常量元素——鈉(Na)、鉀(K)、鎂(Mg)、鋁(Al)、鈣(Ca)和8種微量元素——銅(Cu)、鐵(Fe)、鋅(Zn)、硒(Se)、錳(Mn)、鎘(Cd)、砷(As)、鍶(Sr)]的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明：不同生長時(shí)期時(shí)，粗灰分均是虎斑烏賊內(nèi)殼的主要成分，含量為89.98%～92.06%，其含量隨著生長不斷增加，表現(xiàn)為150日齡時(shí)顯著高于其他日齡時(shí)(P<0.05)；粗蛋白質(zhì)的含量為2.82%～3.11%，其含量隨著生長不斷增加，表現(xiàn)為150日齡時(shí)顯著高于60日齡時(shí)(P<0.05)；水分含量為3.93%～6.21%，其含量隨著生長不斷降低，表現(xiàn)為60日齡時(shí)顯著高于其他日齡時(shí)(P<0.05)；相對(duì)于其他營養(yǎng)成分，虎斑烏賊內(nèi)殼中粗脂肪、多糖含量較少，分別為0.41%～0.47%、0.34%～0.38%。不同生長時(shí)期的虎斑烏賊內(nèi)殼中均檢測(cè)出17種氨基酸，其中7種必需氨基酸(EAA)。不同生長時(shí)期的虎斑烏賊內(nèi)殼中總氨基酸(TAA)、EAA和酸性氨基酸(AAA)含量分別為2.79%～2.93%、0.87%～0.98%和0.69%～0.87%，其中AAA含量隨著生長不斷增加，表現(xiàn)為150日齡時(shí)顯著高于其他日齡時(shí)(P<0.05)。各生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中均以谷氨酸(Glu)含量(0.31%～0.43%)最高，組氨酸(His)含量(0.03%～0.07%)最低。不同生長時(shí)期的虎斑烏賊內(nèi)殼中均檢測(cè)出7種脂肪酸，包括3種飽和脂肪酸(SFA)、1種單不飽和脂肪酸(MUFA)和3種多不飽和脂肪酸(PUFA)；在脂肪酸組分中以C22∶6n-3、C16∶0和C18∶0為主，其中C22∶6n-3含量(35.68%～37.62%)最高。生長時(shí)期對(duì)常量元素Na、Mg、Al和Ca及微量元素Cu、Zn和Sr含量有顯著影響(P<0.05)，尤其是Ca、Mg、Zn含量，隨著生長不斷增加；重金屬元素Cd、As含量很低，分別為0.001～0.003 mg/g和0.012～0.030 mg/g。綜上所述，虎斑烏賊內(nèi)殼營養(yǎng)豐富，Ca、Mg、Zn含量高，且隨著生長不斷增加，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：虎斑烏賊；內(nèi)殼；不同生長時(shí)期；營養(yǎng)成分；礦物元素

烏賊內(nèi)殼，俗稱海螵蛸(cuttlebone)、烏賊骨，其性咸、澀、溫、有收斂止血、澀精止帶、制酸、斂瘡等功效，是一味常用的海洋動(dòng)物藥物[1]。烏賊內(nèi)殼很早便作藥用，《本草綱目》記載其可治多種內(nèi)外出血，如胃潰瘍、十二指腸潰瘍及部分慢性胃炎等，可臨床用于皮膚潰瘍、褲瘡等的治療；《本經(jīng)》也記載，其能“治女子赤白漏下”。近年來，關(guān)于烏賊內(nèi)殼的報(bào)道主要集中在臨床應(yīng)用[2-5]、生理性研究[6]、活性成分提取及應(yīng)用[7-11]等方面。目前烏賊內(nèi)殼除了少量用于中藥材外，大部分作為食品加工的廢棄物，造成資源嚴(yán)重浪費(fèi)。

虎斑烏賊(Sepiapharaonis)隸屬軟體動(dòng)物門(Mollusca)烏賊目(Sepioidea)烏賊科(Sepiidae)烏賊屬(Sepia)，是一種海洋經(jīng)濟(jì)頭足類，具有個(gè)體大、殼重(可達(dá)1 kg以上)、生長快等特點(diǎn)。有關(guān)虎斑烏賊的研究目前國內(nèi)外主要集中在生物學(xué)特性[12-13]、繁殖生物學(xué)[14-15]、營養(yǎng)成分[16-17]和養(yǎng)殖技術(shù)[18]等方面，未見虎斑烏賊內(nèi)殼營養(yǎng)成分含量的相關(guān)報(bào)道。關(guān)于烏賊內(nèi)殼礦物元素含量的研究也鮮有報(bào)道，僅見于金烏賊[19-20]、無針烏賊[21]。本文對(duì)不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼營養(yǎng)成分及礦物元素含量進(jìn)行分析，旨在為烏賊內(nèi)殼的利用與開發(fā)提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2014年6月至2014年10月在浙江舟山市水產(chǎn)研究所朱家尖基地進(jìn)行，虎斑烏賊幼體為本課題組人工育苗所得。本試驗(yàn)選取同一時(shí)間出膜，規(guī)格整齊、活力好、健康的幼體開始試驗(yàn)，初

始胴長2.2～2.6 cm、體重1.8～2.3 g，用于試驗(yàn)研究的虎斑烏賊養(yǎng)殖于水泥池(4.5 m×4.0 m×1.4 m)中，培養(yǎng)條件：水溫24.2～28.6 ℃，鹽度23.7～25.4，pH 7.81～8.04，水深0.6～1.2 m，連續(xù)充氣(1個(gè)氣頭/m2)；每日投喂冰鮮小雜魚2次，日投喂量為體重的10%～15%。日換水1～2次(砂濾自然海水)，換水量為50%～60%，并吸污，及時(shí)清除死亡個(gè)體及殘?jiān)酃福火B(yǎng)殖周期為150 d。取樣：每隔30 d取樣1次，每次從水泥池隨機(jī)捕獲8～10只虎斑烏賊，冰鎮(zhèn)帶回實(shí)驗(yàn)室測(cè)量體重、胴長，解剖取其內(nèi)殼，測(cè)量殼重、殼長(表1)，后將內(nèi)殼置于鼓風(fēng)干燥箱(DGG-9620A型)105 ℃烘干至恒重，研磨粉碎后待用，進(jìn)行各項(xiàng)營養(yǎng)成分、礦物元素含量測(cè)定。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1基本營養(yǎng)成分含量測(cè)定

采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行基本營養(yǎng)成分含量測(cè)定：水分含量測(cè)定采用105 ℃烘干恒重法[22]；粗灰分含量測(cè)定采用550 ℃灼燒恒重法[23]；粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定采用凱氏定氮法[24]；粗脂肪含量測(cè)定采用索氏抽提法[25]。

表1　虎斑烏賊不同生長時(shí)期采樣記錄Table 1　Sampling records of Sepia pharaonis at different growth stages

1.2.2多糖含量測(cè)定

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線[26]的制備：精確吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于25 mL比色管中，以超純水補(bǔ)至2 mL，依次加入5%苯酚液1.0 mL、硫酸5.0 mL，混勻。室溫靜置30 min后，490 nm處測(cè)定吸光度值，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：

C=0.123 1A+0.001 2(R2=0.995 6)。

式中：C為吸光度值；A為葡萄糖含量(mg/mL)。

多糖提取[27]：精確稱取干燥后一定量烏賊內(nèi)殼，用95%乙醇回流提取2次。殘?jiān)鼡]干溶劑后，再以水回流提取2次，每次2 h，合并水提液并濃縮。向濃縮水提液中加入95%乙醇，直至溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為80%，置4 ℃冰箱中過夜，次日離心并將沉淀除醇后冷凍干燥，即得烏賊內(nèi)殼多糖。采用苯酚-硫酸法[28]測(cè)定多糖含量。

1.2.3氨基酸含量測(cè)定

參照國家標(biāo)準(zhǔn)方法[29]測(cè)定氨基酸含量，具體操作如下：烏賊內(nèi)殼樣品經(jīng)微波消解后，用鄰苯二甲醛(OPA)和9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)試劑進(jìn)行衍生化色譜分析。檢測(cè)條件：Zorbax Eclipse-AAA氨基酸分析柱(4.6 mm×150 mm×5 μm)，流動(dòng)相A為40 mmol/L磷酸氫二鈉(用8 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7.8)，流動(dòng)相B為乙腈-甲醇-水(45∶45∶10)，梯度洗脫，流速為2 mL/min，檢測(cè)波長分別為338、262 nm，柱溫40 ℃。

1.2.4脂肪酸含量測(cè)定

索氏抽提法測(cè)定粗脂肪含量后，將粗脂肪提取物進(jìn)行皂化甲酯化，通過Agilent 7890A氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。色譜條件：DB-WAX聚乙二醇?xì)庀嗝?xì)管柱(30 mm×0.25 mm×0.25 mm)，10 μL自動(dòng)液體進(jìn)樣器(ALS)，進(jìn)樣量為1 μL，進(jìn)樣口溫度250 ℃；采用不分流進(jìn)樣，恒壓控制溫度模式，柱頭壓力5.3 MPa。升溫程序：初始溫度50 ℃，保持2 min；以10 ℃/min速率升至250 ℃，保持23 min；檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，穩(wěn)定為300 ℃，載氣為氮?dú)?N2)。各檢測(cè)氣體流量：氫氣(H2)為40 mL/min，空氣為450 mL/min。

1.2.5礦物元素含量測(cè)定

對(duì)不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼進(jìn)行5種常量元素[鈉(Na)、鉀(K)、鎂(Mg)、鋁(Al)、鈣(Ca)]和8種微量元素[銅(Cu)、鐵(Fe)、鋅(Zn)、硒(Se)、錳(Mn)、鎘(Cd)、砷(As)、鍶(Sr)]含量的測(cè)定。

樣品預(yù)處理：準(zhǔn)確稱取0.100 0 g烘干烏賊內(nèi)殼樣品于消化管，加入混合酸(高氯酸∶硝酸為1∶4)20～30 mL消解至溶液呈透明，降至室溫后加入超純水定容至100 mL。采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(Optima 5300DV)和美國PE公司提供的進(jìn)口混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 000 mg/L)進(jìn)行測(cè)定。

混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制：量取1 000 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用10%硝酸溶液配制0.1、1.0、5.0、10.0 mg/L含Na、K、Mg、Al、Cu、Fe、Zn、Se、Mn、Cd、As、Sr、Ca等13種礦物元素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

儀器ICP-AES工作參數(shù)：等離子氣流量15 L/min，載氣流量0.8 L/min，輔助氣流速為0.2 L/min，霧化器流速為0.8 L/min，泵流量為1.5 mL/min，軸向觀測(cè)距離15 mm，儀器穩(wěn)定時(shí)間延遲30 s，功率為1 300 W。

1.3數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003軟件和SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行相關(guān)分析，描述性統(tǒng)計(jì)值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示，以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1基本營養(yǎng)成分

由表2可知，不同生長時(shí)期時(shí)，粗灰分均是虎斑烏賊內(nèi)殼的主要成分，含量為89.98%～92.06%，且隨著生長含量不斷增加，以150日齡時(shí)含量最高(92.06%)，顯著高于其他日齡時(shí)(P<0.05)；虎斑烏賊內(nèi)殼中水分含量為6.21%～3.93%，以60日齡時(shí)水分含量最高(6.21%)，顯著高于120、150日齡時(shí)(P<0.05)；虎斑烏賊內(nèi)殼中粗蛋白質(zhì)含量為2.82%～3.11%，以150日齡含量最高(3.11%)，顯著高于60日齡時(shí)(P<0.05)；虎斑烏賊內(nèi)殼中其他營養(yǎng)成分含量較少，其中粗脂肪含量為0.41%～0.47%，多糖含量為0.34%～0.38%。

表2　不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼基本營養(yǎng)成分含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 2　Common nutritional component contents in cuttlebone of Sepia pharaonis at different growth stages (DM basis)　%

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

In the same column,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05).

2.2氨基酸組成與含量

不同生長時(shí)期的虎斑烏賊內(nèi)殼中均檢測(cè)出17種氨基酸(表3，色氨酸未檢測(cè))，其中7種必需氨基酸。各生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中總氨基酸(TAA)含量差異不顯著(P>0.05)，60、90、120、150日齡時(shí)分別為2.79%、2.84%、2.85%、2.93%；各生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中必需氨基酸(EAA)含量差異不顯著(P>0.05)，60、90、120、150日齡時(shí)分別為0.87%、0.97%、0.82%、0.98%；各生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中均以谷氨酸(Glu)含量(0.31%～0.43%)最高，組氨酸(His)含量(0.03%～0.07%)

最低；絲氨酸(Ser)、賴氨酸(Lys)和甘氨酸(Gly)含量在各生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中雖無顯著差異(P>0.05)，但均較高，分別為0.25%～0.27%、0.23%～0.24%、0.19%～0.20%；虎斑烏賊內(nèi)殼中酸性氨基酸(AAA)[天門冬氨酸(Asp)+Glu]含量在60、90、120、150日齡時(shí)分別為0.56%、0.62%、0.69%、0.78%，分別占TAA含量的20.07%、21.83%、24.2%、26.62%，且隨著生長其含量不斷增加，150日齡時(shí)含量最高(26.62%)，顯著高于其他日齡時(shí)(P<0.05)。

表3　不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼氨基酸組成與含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 3　Amino acid composition and contents in cuttlebone of Sepia pharaonis at different growth stages (DM basis)　%

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

*為酸性氨基酸；#為必需氨基酸。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

* means acid amino acids; # means essential amino acids.

2.3脂肪酸組成與含量

不同生長時(shí)期的虎斑烏賊內(nèi)殼中均檢測(cè)出7種脂肪酸(表4)，包括3種飽和脂肪酸(SFA)、1種單不飽和脂肪酸(MUFA)(C18∶1)和3種多不飽和脂肪酸(PUFA)[C20∶4、C20∶5n-3(EPA)和C22∶6n-3(DHA)]。不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中不飽和脂肪酸含量差異不顯著(P>0.05)，60、90、120、150日齡時(shí)分別為57.38%、57.71%、58.50%、57.00%。在脂肪酸組分中以C22∶6n-3、

C16∶0和C18∶0為主，其中C22∶6n-3含量(35.68%～37.62%)最高，C16∶0含量(25.36%～26.61%)次之。

表4　不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼脂肪酸組成及含量Table 4　Fatty acid composition and contents in cuttlebone of Sepia pharaonis at different growth stages　%

2.4礦物元素含量

由表5可知，生長時(shí)期對(duì)常量元素Na、Mg、Al和Ca及微量元素Cu、Zn和Sr含量有顯著影響(P<0.05)，尤其是Ca、Mg、Zn含量，隨著生長不斷增加。常量元素中，Ca含量最高，60、90、120、150日齡時(shí)分別為334.23、393.30、452.39和474.28 mg/g；Mg含量次之，60、90、120、150日齡

時(shí)分別為29.85、36.11、39.89和54.82 mg/g。微量元素中，Zn含量最高，60、90、120、150日齡時(shí)分別為14.05、16.36、19.21和23.02 mg/g，Cu含量次之，60、90、120、150日齡時(shí)分別為2.34、2.85、4.33和5.47 mg/g。重金屬元素Cd、As含量很低，分別為0.001～0.003 mg/g和0.012～0.030 mg/g。

表5　不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼礦物元素含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 5　Mineral element contents in cuttlebone of Sepia pharaonis at different growth stages (DM basis)　mg/g

3討論

3.1不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼營養(yǎng)成分含量變化

烏賊內(nèi)殼化學(xué)組成是在其生長發(fā)育過程中，從外界攝食并經(jīng)過消化、代謝和吸收后轉(zhuǎn)化積累的結(jié)果，反映了烏賊生長發(fā)育和代謝的情況。在不同生長時(shí)期會(huì)出現(xiàn)化學(xué)組成差異，主要是由內(nèi)因(如生物個(gè)體的系統(tǒng)發(fā)育階段的機(jī)體調(diào)節(jié)和代謝規(guī)律)和外因(如餌料、水域環(huán)境等)共同影響著烏賊自身的物質(zhì)和能量代謝、營養(yǎng)物質(zhì)和礦物質(zhì)的積累所致[30]。

本試驗(yàn)中，虎斑烏賊內(nèi)殼粗灰分和粗蛋白質(zhì)含量隨虎斑烏賊個(gè)體生長發(fā)育呈現(xiàn)出增加的現(xiàn)象且有顯著性變化，而其他成分如粗脂肪、多糖含量則無顯著性變化?；邽踬\不同生長時(shí)期，粗灰分均是內(nèi)殼的主要成分，含量達(dá)到89.98%～92.06%，且隨著虎斑烏賊的生長，內(nèi)殼中粗灰分含量不斷增加，在150日齡含量(92.06%)最高，顯著高于其他日齡時(shí)。粗灰分含量高主要與內(nèi)殼結(jié)構(gòu)的形成緊密相關(guān)，內(nèi)殼在其生長早期主要由有機(jī)物構(gòu)成，隨著生長發(fā)育，鈣離子的吸附也逐漸增多，后來逐步形成鈣化的片層結(jié)構(gòu)，鈣化層越來越厚，以致排列成結(jié)構(gòu)致密的礦化晶體[31]。不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中TAA含量差異不顯著，為2.79%～2.93%，高于無針烏賊(2.32%)[21]，與金烏賊(2.86%)[20]相接近；EAA含量亦差異不顯著，為0.87%～0.98%，與無針烏賊(0.966%)[21]、金烏賊(0.994%)[20]相接近?；邽踬\內(nèi)殼中AAA含量隨著生長不斷增加，以150日齡含量最高(26.62%)，顯著高于其他日齡時(shí)(P<0.05)；此外，虎斑烏賊內(nèi)殼中AAA含量占TAA含量的20.07%～26.62%，與肖述[32]研究得出的不同種類烏賊內(nèi)殼AAA含量占TAA含量的22.178%～24.107%接近，高于趙中杰等[33]研究得出的無針烏賊和金烏賊內(nèi)殼AAA含量占TAA含量的19.96%～21.29%?；邽踬\內(nèi)殼中Ser、Lys和Gly含量在各生長時(shí)期雖無顯著差異，但含量均較高，分別為0.25%～0.27%、0.23%～0.24%、0.19%～0.20%。軟體動(dòng)物貝殼中的蛋白質(zhì)富含Asp+天門冬酰氨(Asn)、Glu+谷氨酰氨(Gln)、Gly以及Ser。Keith等[34]對(duì)鸚鵡螺、鮑魚、貽貝3種貝殼的氨基酸組成進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，3種貝殼的可溶性蛋白中均含大量的Asp、Gly、Ser，在鮑殼中Asp+Asn與Gly含量明顯高出很多。Weiner等[35]對(duì)鮑魚殼和牡蠣殼的形成進(jìn)行了較為深入的研究，認(rèn)為殼的形成受有機(jī)物調(diào)控，蛋白質(zhì)和多糖、殼聚糖在鈣化過程時(shí)形成網(wǎng)狀支架對(duì)鈣化主要起支架輔助，一些可溶性蛋白被吸附，尤其是AAA具有較強(qiáng)吸附鈣離子的能力，礦化晶體才得以形成。軟體動(dòng)物內(nèi)殼中有機(jī)物含量在4%左右，正是這些有機(jī)大分子物質(zhì)對(duì)軟體動(dòng)物內(nèi)殼晶體結(jié)構(gòu)定向生長和空間形態(tài)等方面的調(diào)控，使其在納米水平上表現(xiàn)出特有的強(qiáng)度和有序性[36-37]。

3.2不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼礦物元素含量變化

內(nèi)殼對(duì)環(huán)境中的礦物元素有較強(qiáng)的結(jié)合能力，測(cè)定軟體動(dòng)物內(nèi)殼(貝殼)微量元素的種類和含量不僅可以用于水質(zhì)環(huán)境的監(jiān)測(cè)，同時(shí)也是養(yǎng)殖水環(huán)境以及養(yǎng)殖貝類本身健康與否的重要指標(biāo)。

粗灰分是烏賊內(nèi)殼的主要成分，粗灰分中包含著大量的礦物元素。通過比較分析發(fā)現(xiàn)，虎斑烏賊內(nèi)殼在不同生長時(shí)期最明顯的特征均是Ca含量最高，Mg含量次之；且Ca、Mg含量隨著生長在不斷增加，150日齡含量最高(分別為474.28、54.82 mg/g)，顯著高于其他日齡時(shí)。Ca是人體內(nèi)含量最高的元素，主要集中于骨賂、牙齒和硬組織里，其以磷酸鈣的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中使機(jī)體形成堅(jiān)硬的結(jié)構(gòu)。Ca除作為骨質(zhì)主要構(gòu)成外，還能增強(qiáng)毛細(xì)血管壁的致密度，防止組織液滲出，提供消腫、抗炎和抗組織胺作用；同時(shí)，Ca在血液、細(xì)胞外液和軟組織中對(duì)血液凝固、肌肉收縮和神經(jīng)結(jié)構(gòu)組成、傳遞過程有重要作用，還可參與多種酶生物活性的發(fā)揮。Mg是人體內(nèi)必需的常量元素，在三羧酸循環(huán)電子傳遞、催化過程及有機(jī)物轉(zhuǎn)化等重要環(huán)節(jié)起著關(guān)鍵作用，被稱為“人體健康催化劑”，如果Mg缺乏，人易疲乏、心跳加快、易激動(dòng)，Mg還可刺激抗毒素的生成，故Mg可以起到解毒的作用[38]。因此，虎斑烏賊內(nèi)殼可以作為提供補(bǔ)Ca、Mg的食源或藥源。Ca是軟體動(dòng)物貝殼中含量最高的元素(占粗灰分含量的89%～95%)[39-40]，虎斑烏賊內(nèi)殼Ca含量占粗灰分含量的89.98%～92.06%，由于烏賊內(nèi)殼鈣化結(jié)構(gòu)使其多孔度達(dá)90%以上，而且具有良好的生物相容特性，因此，研究烏賊內(nèi)殼在羥基磷灰石材料的制備、組織工程支架材料、復(fù)合蛋白人工骨成骨及再血管化等[2-4]新型醫(yī)用材料應(yīng)用方面均有報(bào)道。

不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼微量元素中均以Zn含量最高。Zn是人體內(nèi)多種酶的輔基和激活因子，與160多種酶的生物活性相關(guān)，并參與了核酸和蛋白質(zhì)的合成。缺Zn會(huì)推遲動(dòng)物的性腺成熟期，成熟動(dòng)物會(huì)發(fā)生性腺萎縮及纖維化，而且Zn大量存在于男性睪丸中，參與精子的整個(gè)生成、成熟和獲能的過程。缺Zn還會(huì)影響皮膚系統(tǒng)的生長、發(fā)育，而導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)炎癥。嬰兒和兒童通過適量補(bǔ)Zn，可以有效預(yù)防呼吸道感染和腹瀉等病癥的發(fā)生。因此，虎斑烏賊內(nèi)殼有望成為補(bǔ)Zn的良好食源或藥源。同時(shí)，不同生長時(shí)期虎斑烏賊內(nèi)殼中檢測(cè)到重金屬元素Cd、As含量分別為0.001～0.003 mg/g和0.012～0.030 mg/g，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于歐盟食品安全上限(1.0～1.5 mg/kg)[41]。

4結(jié)論

虎斑烏賊內(nèi)殼粗灰分、粗蛋白質(zhì)以及AAA含量隨生長呈現(xiàn)出增加的趨勢(shì)。

虎斑烏賊內(nèi)殼在不同生長時(shí)期最明顯的特征均是常量元素以Ca、Mg含量較高，微量元素以Zn含量最高，且Ca、Mg、Zn含量隨著生長不斷增加；重金屬元素Cd、As含量較低。

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(責(zé)任編輯菅景穎)

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.07.038

收稿日期：2016-01-18

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(41206114)；寧波市農(nóng)業(yè)科技專項(xiàng)(2014C11001)

作者簡(jiǎn)介：江茂旺(1991—)，男，江西九江人，碩士研究生，研究方向?yàn)闈O業(yè)資源開發(fā)與利用。E-mail: icandy jmw@qq.com *通信作者：蔣霞敏，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: jiangxiamin@nbu.edu.cn

中圖分類號(hào)：S963

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)07-2300-09

*Corresponding author, professor, E-mail: jiangxiamin@nbu.edu.cn

Comparative Analysis: Nutritional Component Contents in Cuttlebone ofSepiapharaonisat Different Growth Stages

JIANG MaowangJIANG Xiamin*LIANG JingjingWANG PengshuaiRUAN PengHAN Qingxi

(School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China)

Abstract:This study was conducted to study the changes of nutritional component contents in cuttlebone of Sepia pharaonis at different growth stages, in order to provide a theoretical basis for development and utilization of Sepia pharaonis. The contents of nutritional components (including moisture, ash, crude protein, crude fat, polysaccharide, amino acids, fatty acids) and minerals [including 5 kinds of major elements—natrium (Na), kalium (K), magnesium (Mg), aluminium (Al), calcium (Ca), and 8 kinds of trace elements—copper (Cu), iron (Fe), zinc (Zn), selenium (Se), manganese (Mn), chromium (Cd), arsenic (As), strontium (Sr)] in cuttlebone of Sepia pharaonis at different growth stages (growing ages were 60, 90, 120 and 150 d, respectively) were determined using national standard nutritional methods. The results showed as follows: among different growth stages, the ash was the main component in cuttlebone of Sepia pharaonis and the content of ash was 89.98% to 92.06%, which was increased with the growth and 150 days of age was significantly higher than other days of age (P<0.05); crude protein content was 2.82% to 3.11%, which was increased with the growth and 150 days of age was significantly higher than 60 days of age (P<0.05); the content of moisture was 3.93% to 6.21%, which was decreased with the growth and 60 days of age was significantly higher than other days of age (P<0.05); the contents of crude fat and polysaccharide were less compared with other components, which were 0.41% to 0.47% and 0.34% to 0.38%, respectively. A total of 17 amino acids were identified in cuttlebone of Sepia pharaonis among different growth stages, including 7 kinds of essential amino acids (EAA). The contents of total amino acid (TAA), EAA and acidic amino acids (AAA) were 2.79% to 2.93%, 0.87% to 0.98% and 0.56% to 0.78%, respectively; the content of AAA was increased with the growth, and 150 days of age was significantly higher than other days of age (P<0.05). The content of glutamate (Glu) was the highest (0.31% to 0.43%) and the content of histidine (His) was the lowest (0.03% to 0.07%) in cuttlebone of Sepia pharaonis among different growth stages. A total of 7 fatty acids were identified, including 3 saturated fatty acids (SFA), 1 monounsaturated fatty acids (MUFA) and 3 polyunsaturated fatty acids (PUFA). C22∶6n-3, C16∶0 and C18∶0 were the main components of fatty acids, among which C22∶6n-3 had the highest value (35.68% to 37.62%). The contents of major elements—Na, Mg, Al and Ca, and trace elements—Cu, Zn and Sr were significantly affected by the growth stage (P<0.05), especially the contents of Ca, Mg and Zn, which were increased with the growth; the contents of heavy metal elements—Cd and As were very low, which were 0.001 to 0.003 mg/g and 0.012 to 0.030 mg/g, respectively. It is concluded that the cuttlebone of Sepia pharaonis has a high nutritional value, Ca, Mg and Zn contents are rich and increase with the growth. Therefore, it has a good spectacle of opening up and application.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(7)：2300-2308]

Key words:Sepia pharaonis; cuttlebone; different growth stages; nutritional components; mineral elements