丘佳明,葉　凱

(江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院病理科，江蘇常熟　215500)

?

·臨床研究·

前列腺干細(xì)胞抗原在前列腺癌中的表達(dá)及其與雄激素受體、雌激素受體聯(lián)合檢測的意義

丘佳明,葉凱

(江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院病理科，江蘇常熟215500)

摘要：目的探討前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)在前列腺癌(PCa)和良性前列腺增生(BPH)中的表達(dá)，及其與雄激素受體(AR)、雌激素受體(ER)聯(lián)合檢測的臨床意義。方法應(yīng)用免疫組化方法檢測PSCA、AR和ER在50例PCa和30例BPH標(biāo)本中的表達(dá)。結(jié)果PSCA在PCa中高表達(dá)，在BPH中少量表達(dá)或不表達(dá)，PSCA表達(dá)的變化與PCa的Gleason評分具有明顯相關(guān)性。AR在PCa中的表達(dá)與其分化程度無明顯相關(guān)性，與PSCA無明顯相關(guān)性。ER在BPH中表達(dá)陽性率為100%，且普遍強(qiáng)陽性，在PCa中表達(dá)的陽性率為12%，均與PSCA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論P(yáng)SCA在前列腺細(xì)胞增殖、腫瘤形成的演進(jìn)過程中發(fā)揮重要作用，聯(lián)合檢測PSCA和ER有助于PCa和BPH的診斷和治療。

關(guān)鍵詞:前列腺干細(xì)胞抗原；雄激素受體；雌激素受體；前列腺癌

前列腺癌作為男性生殖系統(tǒng)的常見惡性腫瘤，發(fā)病率逐年增加，居男性惡性腫瘤發(fā)病率第二位[1]。目前臨床醫(yī)生對前列腺癌(prostate cancer，PCa)主要依靠前列腺特異抗原、Gleason評分和腫瘤分期進(jìn)行綜合判斷，但臨床實(shí)際工作中，該綜合測評的準(zhǔn)確率僅為70%[2]。人們對于前列腺癌的早期診斷、預(yù)后判斷和理想治療靶點(diǎn)的探尋從未停止。還沒有一個完全理想的標(biāo)記物可以應(yīng)用于此[3]，而目前人們正在探索和研究新的標(biāo)記物，以及多個標(biāo)記物的聯(lián)合檢測。1998年，REITER等[4]發(fā)現(xiàn)前列腺干細(xì)胞抗原(prostate stem cell antigen，PSCA)，具有較高的前列腺組織特異性，其在前列腺癌診斷、靶向治療和預(yù)后判斷方面作用的研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)，有望成為PCa新的常規(guī)檢查。

雄激素受體(androgen receptor，AR)、雌激素受體(estrogen receptor，ER)在前列腺正常生理功能、前列腺增生及腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，而在激素依賴和非激素依賴的PCa病例中，以PSCA為靶點(diǎn)的治療效果不同[5]。因此，本文應(yīng)用免疫組化方法分別檢測前列腺組織中PSCA、ER、AR的表達(dá)，探討PSCA在PCa中的作用和三者相互之間的關(guān)系。

1材料與方法

1.1研究對象50例PCa和30例良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)病例均來自江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院2013～2014年的泌尿外科住院患者，59～88歲，平均年齡72.6歲，均未進(jìn)行激素、手術(shù)或放化治療，所選樣本為穿刺或經(jīng)尿道電切組織，經(jīng)常規(guī)組織病理學(xué)制片。根據(jù)國際泌尿病理學(xué)會(the International Society of Urological Pathology，ISUP)2005 Gleason分級修訂系統(tǒng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：Gleason評分4分2例、5分3例、6分6例、7分14例、8分13例、9分8例、10分4例。

1.2試劑一抗選用兔抗人PSCA多克隆抗體、鼠抗人ER單克隆抗體和兔抗人AR單克隆抗體，各一抗試劑及SP系列染色試劑盒、DAB顯色試劑盒等均購自北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3方法所有標(biāo)本均為4%甲醛固定，石蠟包埋，3 μm厚連續(xù)切片，免疫組化操作步驟按照試劑盒說明書，根據(jù)每一種抗體要求對組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)，并設(shè)置陽性對照和陰性對照。

1.4結(jié)果判斷PSCA表達(dá)于胞質(zhì)或胞膜，ER和AR表達(dá)于細(xì)胞核，均為棕黃色或棕褐色顆粒樣著色。陽性結(jié)果判定采用免疫組化(immunohistochemistry score，HIS)評分標(biāo)準(zhǔn)[7]：①陽性細(xì)胞染色程度強(qiáng)弱：可疑陽性或陰性判定為0分，弱陽性為1分，中度陽性為2分，強(qiáng)陽性為3分；②陽性細(xì)胞分布范圍百分比：1%～10%判定為1分，11%～50%為2分，51%～80%為3分，81%～100%為4分；③以上兩項乘積為IHS評分：0分為-，1～4分為+，5～8分為++，9～12分為+++。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理使用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)資料用χ2表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1PSCA在PCa和BPH中的表達(dá)PSCA在PCa中高度表達(dá)(圖1)，表達(dá)定位于前列腺癌細(xì)胞，細(xì)胞間質(zhì)無表達(dá)，陽性率為92%(46/50)；IHS評分：41例+++、2例++、3例+，普遍高表達(dá)。且與Gleason評分關(guān)系密切：Gleason評分為4分的病例PSCA表達(dá)均為-；Gleason評分5分的病例2例表達(dá)+，1例-；Gleason評分6分的病例表達(dá)4例+++， 2例++；Gleason評分7分和8分的病例表達(dá)均為+++；Gleason評分9分病例表達(dá)7例+++，1例+；10分的病例表達(dá)3例+++，1例-?？梢婋SGleason評分增加PSCA表達(dá)增強(qiáng)。PSCA在BPH組織中少量表達(dá)(圖1A、1B)，表達(dá)定位于前列腺基底細(xì)胞層，陽性率為43.3%(13/30)，均為+或++。故PSCA在二者間的表達(dá)差異有顯著性(χ2=51.218，P<0.001)。

2.2AR、ER在PCa和BPH中的表達(dá)AR在PCa和BPH中表達(dá)的陽性率分別為78%(37/50)及53.3%(16/30)(圖1C、1D)，兩者間無明顯差異(χ2=3.582，P=0.087)，且AR在PCa中的表達(dá)與其分化程度無明顯相關(guān)性。ER在PCa和BPH中表達(dá)的陽性率分別為12%(6/50)及100%(30/30)(圖1F、1G)，兩者間差異明顯(χ2=58.667，P<0.001)，且在BPH中普遍為+++。

圖1PSCA、AR、ER在PCa和BPH組織的表達(dá)(SP,×200)

A：PSCA、 PCa組織；B：PSCA、BPH組織；C: AR、PCa組織；D:AR、BPH組織； E:ER、PCa組織； F: ER、BPH組織。

3討論

PSCA最早由REITER等[4]在前列腺癌動物模型LAPC-4鼠中發(fā)現(xiàn)，為前列腺特異性表達(dá)的糖化磷脂酰肌醇錨定的細(xì)胞膜表面抗原，其基因30%與干細(xì)胞抗原2(stem cell antigen-2, SCA-2)相同，且來源于前列腺，故命名為前列腺干細(xì)胞抗原。PSCA屬于Thy-1/Ly-6家族成員之一，包含123個氨基酸，基因定位于8號染色體的q24.2帶。目前對PSCA在PCa的各方面研究有很多，結(jié)合本實(shí)驗，我們從以下幾方面進(jìn)行探討。

在前列腺癌診斷方面，BARBISAN等[8]認(rèn)為從前列腺正常上皮到增生直至發(fā)展成癌，PSCA的表達(dá)不斷增加，這與本文結(jié)論一致，且本文中PSCA的表達(dá)與Gleason評分相關(guān)性明顯，中低分化癌普遍高表達(dá)，提示PSCA在細(xì)胞增殖、腫瘤形成的演進(jìn)過程中發(fā)揮作用。本文低分化癌中的3例病例為陰性，考慮為低分化癌的癌細(xì)胞合成分泌功能降低，進(jìn)而影響PSCA的表達(dá)，在實(shí)際工作中需注意低分化癌的鑒別診斷。

在治療方面，PSCA的高度組織特異性及其與腫瘤分級的密切關(guān)系，使得基于PSCA為靶點(diǎn)的免疫治療研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)[9]， ANTONARAKIS等[10]選取13例PCa患者，將人抗PSCA單克隆抗體AGS-1C4D4通過靜脈注射方式注入體內(nèi)，劑量不同，3周1次，中位時間24周，觀察結(jié)果顯示，15%(2/13)的患者PSA降低幅度大于25%，46%(6/13)的患者病情穩(wěn)定持續(xù)時間超過12周，并且患者對不良反應(yīng)基本耐受。

在預(yù)后判斷方面，ZHAO等[11]認(rèn)為PSCA具有促進(jìn)腫瘤生長和侵襲轉(zhuǎn)移的作用，而MOORE等[12]認(rèn)為PSCA可能不會影響到PCa的發(fā)生，但是具有抑制PCa轉(zhuǎn)移的作用。本文中PSCA 的表達(dá)與患者年齡、PSA水平、腫瘤分期及有無轉(zhuǎn)移情況等臨床預(yù)后情況均無明確聯(lián)系，是否與本實(shí)驗研究樣本量偏少，或者是臨床隨訪缺失有關(guān)，待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量研究證實(shí)。

在與AR聯(lián)合檢測方面，本文中AR在PCa和BPH中表達(dá)無明顯差異性，與Gleason評分無明顯相關(guān)，與PSCA的表達(dá)無明顯相關(guān)，提示AR與PSCA之間可能無明顯的內(nèi)在聯(lián)系，考慮PCa的發(fā)生發(fā)展過程并不是完全依賴AR，AR在PCa癌細(xì)胞內(nèi)可能會發(fā)生激素非依賴轉(zhuǎn)化[13]，這些都限制了AR在PCa診斷治療中的價值。在與ER聯(lián)合檢測方面，從本實(shí)驗可發(fā)現(xiàn)隨著PCa 病理分級的增高，PSCA表達(dá)增強(qiáng)的同時伴有ER表達(dá)降低的趨勢，二者之間存在明顯負(fù)相關(guān)。在BPH中，ER陽性率達(dá)到100%，且普遍高表達(dá)，而PSCA陽性率為43.3%，基本為弱陽性。提示ER的缺失對PCa的發(fā)生和進(jìn)展有一定的作用，ER和PSCA在分子水平上可能存在某種互相聯(lián)系，聯(lián)合檢測PSCA和ER可以指導(dǎo)PCa和BPH的診斷和治療。

總之，PSCA在前列腺細(xì)胞增殖、腫瘤形成的演進(jìn)過程中發(fā)揮重要作用，聯(lián)合檢測PSCA和ER有助于指導(dǎo)PCa和BPH的診斷和治療。

參考文獻(xiàn)：

[1] 那彥群,葉章群,孫穎浩,等.中國泌尿外科疾病診斷治療指南[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:61.

[2] 葉林,姚旭東,葉定偉.重視預(yù)測前列腺癌進(jìn)展高風(fēng)險組織標(biāo)志物的研究[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2014,94(14):1041-1044.

[3] 高巍,滕梁紅.前列腺癌相關(guān)生物標(biāo)志物研究新進(jìn)展[J].中華病理學(xué)雜志,2013,42(7):487-490.

[4] REITER RE, GU Z, WATA BE, et al. Prostate stem cell antigen: a cell surface marker overexpressed in prostate cancer[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1998,95(4): 1735-1740.

[5] PETRIGLIANO FA, VIRK MS, LIU N, et al. Targeting of prostate cancer cells by a cytotoxic lentiviral vector containing a prostate stem cell antigen(psca) promoter[J]. Prostate,2009,69(13):1422-1434.

[6] EPSTEIN JI，ALLSBROOK WC，AMIN MB，et al．The 2005 International Society of Urological Pathology(ISUP) consensus conference on gleason grading of prostatic carcinoma[J ]. Am J Surg Pathol,2005,29(9): 1228-1242．

[7] BRINKER DA,POTTER SR,EPSTEIN JI. Ductal adencarcinoma of the prostate diagnosed on needle biopy: correlation with clinical and radical prostatectomy findings and progression[J]. Am J Surg Pathol, 1999,23:1471-1479.

[8] BARBISAN F, MAZZUCCHELLI R, SANTINELLI A, et al. Expression of prostate stem cell antigen in high-grade prostatic intraepithelial neoplasia and prostate cancer[J]. Histopathology, 2010,57(4):572-579.

[9] 鄭克文,李漢忠.基于前列腺干細(xì)胞抗原為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療[J].協(xié)和醫(yī)學(xué)雜志,2014, 5(2):202-205.

[10] ANTONARAKIS ES, CARDUCCI MA, EISENBERGER MA, et al. Phase I rapid dose-escalation study of AGS-1C4D4, a human anti-PSCA (prostate stem cell antigen) monoclonal antibody, in patients with castration-resistant prostate cancer: a PCCTC trial[J]. Cancer Chemother Pharmacol, 2012,69(3):763-771.

[11] ZHAO Z, MA W,ZENG G, et al. Small interference RNA-mediated silencing of prostate stem cell antigen attenuates growth, reduces migration and invasion of human prostate cancer PC-3M cells[J]. Urol Onco,2011,2(4):1-9.

[12] MOORE ML, TEITELL MA, Kim Y, et al. Deletion of PSCA increases metastasis of TRAMP-induced prostate tumor without altering primary tumor formation[J]. Prostate, 2008,68(2):139-151.

[13] 王海峰,劉武江,金杰,等.雄激素受體在前列腺癌細(xì)胞激素非依賴轉(zhuǎn)化中的表達(dá)及調(diào)控[J].北京大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2011,43(4):490-495.

(編輯王瑋)

收稿日期：2015-05-30修回日期：2015-07-10

作者簡介:丘佳明(1977-)，男(漢族)，學(xué)士學(xué)位，副主任醫(yī)師，研究方向：腫瘤病理診斷.E-mail:qiujiaming@sina.com

中圖分類號:R737

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

DOI：10.3969/j.issn.1009-8291.2016.01.011

Expression of PSCA in prostate cancer and significance of combined detection of PSCA, AR and ER

QIU Jia-ming,YE Kai

(Department of Pathology, the 2nd People’s Hospital of Changshu, Changshu 215500, China)

ABSTRACT:ObjectiveTo investigate the expression of prostate stem cell antigen (PSCA) in prostate cancer (PCa) and benign prostatic hyperplasia (BPH), and the clinical significance of combined detection of PSCA, androgen receptor (AR) and estrogen receptor (ER).MethodsThe expressions of PSCA, AR and ER were determined with immunohistochemical method in 50 cases of PCa and 30 cases of BPH. ResultsPSCA expression was higher in PCa, lower or loss of expression in BPH. Different PSCA expression levels were significantly correlated with Gleason score in PCa. The expression of AR in PCa was not correlated with Gleason score and PSCA. The positive rate of ER in BPH was 100%, and generally strong positive. The positive rate of ER in PCa was 12%. There was negative correlation between the expression of PSCA and ER in BPH and PCa. ConclusionsPSCA may play an important role in cell proliferation and formation of PCa. The combined detection of PSCA and ER is helpful for the diagnosis and treatment of PCa.

KEY WORDS:prostate stem cell antigen; androgen receptor; estrogen receptor; prostate cancer