唐 琨，李洪鑫，蘇立健

(泰達(dá)水業(yè)有限公司 天津300457)

固相萃取-超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定生活飲用水中磺胺甲噻二唑含量

唐 琨，李洪鑫，蘇立健

(泰達(dá)水業(yè)有限公司 天津300457)

建立了固相萃取-超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定生活飲用水中磺胺甲噻二唑含量的方法。水樣經(jīng)固相萃取富集純化，以 0.1%,甲酸水溶液和乙腈為流動(dòng)相，以液質(zhì)聯(lián)用法對(duì)生活飲用水中磺胺甲噻二唑的含量進(jìn)行分析。該法的檢出限為0.002,μg/L，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%,～2.9%,，加標(biāo)回收率為70.0%,～101.4%,。

磺胺甲噻二唑 固相萃取 液質(zhì)聯(lián)用

長(zhǎng)期以來(lái)，抗生素廣泛應(yīng)用于人類(lèi)及動(dòng)物疾病的防治，是世界上用量最大、使用范圍最廣的藥物之一，全球抗生素的年均使用總量為 100,000～200,000,t。[1]我國(guó)亦是抗生素的使用大國(guó)，據(jù)藥學(xué)會(huì)抽樣顯示：2005—2009年間，抗感染藥物的用藥金額占醫(yī)院用藥總金額的 23%～25%,，其中，抗生素又占抗感染藥物的90%,。

同時(shí)，抗生素作為促生長(zhǎng)劑和飼料添加劑添加于動(dòng)物飼料中，在畜牧業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。[2-3]在淡水養(yǎng)殖業(yè)，抗生素作為飼料添加劑被直接投加到水中，在一定范圍內(nèi)起到了抑菌殺菌的作用，但長(zhǎng)期的投加導(dǎo)致大量抗生素殘留于水體及其沉積物中，引發(fā)諸多危害，如對(duì)水生物的毒害，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)品消費(fèi)者的健康構(gòu)成一定威脅等。[4]

目前已有超過(guò)16類(lèi)抗生素藥物在水體及其沉積物等環(huán)境中有高含量的檢出。[5-6]被廣泛應(yīng)用的抗生素，按其化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為β-內(nèi)酰胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、磺胺類(lèi)等。其中，磺胺類(lèi)藥物是對(duì)氨基苯磺酞胺結(jié)構(gòu)藥物的總稱(chēng)，是一類(lèi)用于預(yù)防和治療細(xì)菌感染性疾病的抗菌藥，其抗菌譜廣、價(jià)廉易得，因此一直在養(yǎng)殖業(yè)中得到廣泛應(yīng)用?；前奉?lèi)藥物毒性較強(qiáng)，且在食品中殘留的半衰期長(zhǎng)，對(duì)人類(lèi)健康和環(huán)境危害顯著。[7]部分磺胺類(lèi)藥物已經(jīng)被列為禁用漁藥，對(duì)于可以使用的磺胺類(lèi)藥物，在水產(chǎn)品中也有嚴(yán)格的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。[8]有關(guān)磺胺類(lèi)藥物分析的國(guó)內(nèi)外報(bào)導(dǎo)較為多見(jiàn)，主要有酶聯(lián)免疫法、氣相色譜法、高效液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用法等。近年來(lái)，固相萃取技術(shù)被廣泛應(yīng)用于測(cè)定水體中抗生素的水樣預(yù)處理過(guò)程。[9]本研究應(yīng)用固相萃取-超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定生活飲用水中的磺胺甲噻二唑，以明確生活飲用水中磺胺甲噻二唑的含量，為水處理工藝過(guò)程中對(duì)磺胺甲噻二唑的處理方法提供可靠參考。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 儀器和試劑

超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，ACQUITY UPLC-Xevo-TQD，MassLynx V4.1軟件，美國(guó)Waters公司；半自動(dòng)固相萃取儀，美國(guó) Agilent公司，TPS2000；固相萃取柱，Waters Oasis HLB小柱(3,cc，60,mg)；氮吹儀，美國(guó)Caliper公司，TuroVap LV；磺胺甲噻二唑標(biāo)準(zhǔn)溶液，德國(guó) Dr．E公司，純度99.9%,；超純水，產(chǎn)自 Milli-Q系統(tǒng)；甲酸，色譜級(jí)，F(xiàn)isher公司；乙腈，色譜級(jí)，Merck公司。

1.2 儀器工作參數(shù)

1.2.1 色譜條件

色譜柱，ACQUITY UPLC?BEH C18 1.7,μm 2.1×100,mm；柱溫，40,℃；流速，0.3,mL/min；流動(dòng)相，A泵為0.1%,的甲酸，B泵為乙腈。梯度洗脫程序見(jiàn)表1。

表1 梯度洗脫程序Tab.1 Gradient elution program

1.2.2 質(zhì)譜條件

采用正離子電噴霧離子源(ESI＋)，毛細(xì)管電壓0.5,kV，錐孔電壓35,V，離子源溫150,℃，脫溶劑溫度500,℃，脫溶劑氣800,L/Hr，錐孔氣50,L/Hr。采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式。其他相關(guān)質(zhì)譜條件見(jiàn)表2。

表2 質(zhì)譜條件Tab.2 Mass spectrum conditions

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 水樣采集和保存

樣品充滿采樣瓶，水樣取回后應(yīng)盡快測(cè)定，若不能及時(shí)檢測(cè)，加入 Na2,EDTA 1.0,g/L，置于 4,℃冰箱保存。

1.3.2 水樣預(yù)處理

取水樣 200,mL，加入 0.2,g硫代硫酸鈉脫氯，經(jīng)0.45,μm 玻璃纖維膜過(guò)濾，充分混勻。固相萃取小柱依次用5,mL甲醇、5,mL高純水進(jìn)行活化，與大體積水樣采集器連接進(jìn)行富集，控制流速為 4～5,mL/min，使水樣完全通過(guò)固相萃取柱。樣品抽濾完成后，撤下大體積采樣管，并用10,mL純凈水沖洗柱體。將固相萃取小柱抽空 30,min，充分干燥柱體。洗脫濃縮，用 5,mL甲醇分兩次進(jìn)行洗脫，第 1次3,mL，第2次2,mL，收集洗脫液。洗脫液收集完畢后氮?dú)獯抵两?，?0.2%,的甲酸乙腈溶液定容至1,mL。

1.3.3 上機(jī)檢測(cè)

以直接方式進(jìn)樣，進(jìn)樣量為5,μL。

色譜峰的考查中，標(biāo)準(zhǔn)色譜圖如圖1所示：

圖1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖Fig.1 Standard chromatogram map

定性分析的保留時(shí)間為 4.63,min。定量分析中，利用機(jī)器測(cè)得色譜峰面積，根據(jù)峰面積定量。

1.4 線性范圍和檢出限

在空白水樣中添加標(biāo)準(zhǔn)品做檢出限試驗(yàn)。以3倍信噪比計(jì)算，磺胺甲噻二唑的檢出限為 0.002,μg/L，線性范圍 0.25～10.0,μg/L，線性方程為 y＝2,363.53,x＋732.739，R2均值達(dá) 99%,以上，滿足國(guó)內(nèi)外的法規(guī)限量要求。

1.5 方法的回收率和精密度

表3 水中磺胺甲噻二唑的加標(biāo)回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏(n＝7)Tab.3 Recovery rates and relative standard deviation (n＝7)of Sulfamethizole in water

采用外標(biāo)法對(duì)生活飲用水進(jìn)行加標(biāo)，加標(biāo)濃度分別為 1.0,μg/L和 9.0,μg/L，各自平行測(cè)定 7次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、加標(biāo)回收率見(jiàn)表3。

2 結(jié) 語(yǔ)

本實(shí)驗(yàn)用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定生活飲用水中磺胺甲噻二唑的含量，分析速度快、操作簡(jiǎn)單、精密度、準(zhǔn)確度良好、檢出限低，能夠滿足抗生素測(cè)定的基本要求，適合用于生活飲用水中磺胺甲噻二唑含量的測(cè)定?！?/p>

［1］ 王敏，唐景春. 土壤中的抗生素污染及其生態(tài)毒性研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2010，29(增)：261-266.

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Determination of Sulfamethizole in Drinking Water Samples by Solid Phase Extraction-Ultra Performance Liquid Chromatography Mass Spectrometry

TANG Kun，LI Hongxin，SU Lijian
(TEDA WATER Company，Water Quality Monitoring Centre，Tianjin 300457，China)

A rapid analytical method for simultaneous determination of sulfamethizole in drinking water sample was developed．Water samples were concentrated and purified by solid phase extraction(SPE)．Then，using 0.1%, formic acid and acetonitrile as the mobile phase，sulfamethizole contents were analyzed by ultra performance liquid chromatography electro spray tandem mass spectrometry(UPLC–MS/MS)．The limit of determination for analytes were 0.002,μg/L and the relative standard deviation were 1.1%～2.9%,．The recoveries were in the range of 70.0%～101.4%,.

sulfamethizole；SPE；UPLC–MS/MS

TV213

A

1006-8945(2016)07-0022-02

2016-06-06