韋志鵑

(中國(guó)人民解放軍第一八四醫(yī)院，江西鷹潭 335000)

·臨床研究·

兩種不同方法對(duì)乙型肝炎病毒感染血清指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的比較

韋志鵑

(中國(guó)人民解放軍第一八四醫(yī)院，江西鷹潭 335000)

摘要:目的探究時(shí)間分辨熒光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物靈敏度和準(zhǔn)確度的比較。方法將該院門診及住院部2015年10～12月收治的300例乙型肝炎患者作為研究對(duì)象，分別使用時(shí)間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，確定時(shí)間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)的效率。結(jié)果時(shí)間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)于乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)的準(zhǔn)確度及敏感度差異顯著，時(shí)間分辨熒光免疫法具有更高的檢測(cè)準(zhǔn)確度及敏感度。時(shí)間分辨熒光免疫法診斷符合率為98.00%，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷符合率為78.33%，時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)于乙型肝炎病毒的診斷有效率顯著高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。結(jié)論時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)于乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物的檢測(cè)效率高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，時(shí)間分辨熒光免疫法具有更高的推廣價(jià)值。

關(guān)鍵詞:時(shí)間分辨熒光免疫法；乙肝病毒血清標(biāo)志物；酶聯(lián)免疫法

乙型肝炎(以下簡(jiǎn)稱乙肝)病毒又稱為丹氏顆粒，其為嗜肝DNA病毒科的一種微生物，可以引發(fā)多種急、慢性肝炎病，我國(guó)有1億左右的乙肝病毒攜帶者，其中有3 000萬(wàn)的乙肝患者，尋找一種經(jīng)濟(jì)、快速、簡(jiǎn)便的乙肝病毒篩查方法十分必要，其在乙肝病毒篩查過(guò)程中具有重要的意義[1]。時(shí)間分辨熒光分析法、微粒子酶免疫試驗(yàn)以及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)都是檢測(cè)乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物的重要方法，筆者研究了時(shí)間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)于乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物的實(shí)際檢測(cè)效果，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1資料和方法

1.1一般資料選取本院門診及住院部2015年10～12月收治的300例乙肝患者，所有患者診斷標(biāo)準(zhǔn)均嚴(yán)格按照我國(guó)相關(guān)檢測(cè)要求，排除了其他肝炎類型患者。300例乙肝患者包括男172例，女128例，年齡19～46歲，平均(38.5±5.7)歲。入院后的患者次日清晨空腹靜脈取血5 mL，及時(shí)分離血清后備用。

1.2檢測(cè)方法使用廣州豐華Auto TRFIA-4 全自動(dòng)熒光免疫分析儀和試劑，對(duì)比檢測(cè)使用濰坊三維生物的酶聯(lián)免疫試劑，科華生物的ST-96W洗板機(jī)以及ST360酶標(biāo)儀。時(shí)間分辨熒光分析法：將試劑復(fù)溫，添加樣本后再加入標(biāo)記物工作液，恒溫振蕩反應(yīng)后洗滌反應(yīng)板，再使用增強(qiáng)液后檢測(cè)結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：準(zhǔn)備好洗滌液和去離子水，試劑溫度恢復(fù)至室溫，使用加樣器加取樣品，加入酶標(biāo)液后震蕩混勻恒溫孵育，最后加A、B顯色液，待加完終止液后上機(jī)檢測(cè)。

1.3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間分辨熒光免疫法:使用計(jì)算機(jī)對(duì)血液樣本進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)被測(cè)定物含量進(jìn)行陰陽(yáng)性鑒別。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：樣本核心抗體以及乙肝病毒e抗體檢測(cè)光密度低于臨界值為陽(yáng)性；樣本表面抗體、乙肝病毒表面抗原以及e抗原的檢測(cè)密度高于或者等于臨界值為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)束后將數(shù)據(jù)結(jié)果錄入數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)使用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2結(jié)果

2.1乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果比較時(shí)間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)于乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物陽(yáng)性率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)時(shí)間分辨熒光免疫法在乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物陽(yáng)性檢出率上均高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　　乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物陽(yáng)性檢出率比較[n(%)]

2.22種方法診斷準(zhǔn)確率比較時(shí)間分辨熒光免疫試驗(yàn)診斷符合率為98.00%，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷符合率為78.33%。時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)于乙肝病毒的診斷有效率顯著高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，見(jiàn)表2。

表2　　2種方法診斷結(jié)果準(zhǔn)確率比較[n(%)]

3結(jié)論

作為全球范圍內(nèi)最為廣泛的肝臟病癥，乙肝患者會(huì)出現(xiàn)明顯的肝臟炎性病變。如果沒(méi)有得到及時(shí)、有效的治療，乙肝患者很大概率上轉(zhuǎn)變?yōu)楦斡不?，?yán)重時(shí)甚至轉(zhuǎn)變?yōu)楦伟?，因此?huì)對(duì)患者造成嚴(yán)重的后果[2]。特異性血清病原學(xué)檢查是現(xiàn)如今診斷乙肝的主流方法，該方法通過(guò)對(duì)患者血清樣品中乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量進(jìn)行檢測(cè)來(lái)確定患者的患病情況[3]。

我國(guó)具有龐大的乙肝病毒攜帶人群以及乙肝患者，乙肝病毒攜帶者篩查以及診斷是非常繁重的工作，尋找經(jīng)濟(jì)合適的診斷、篩查方法對(duì)于提高乙肝診斷敏感度以及有效率非常重要，因而需要經(jīng)過(guò)多重試驗(yàn)，反復(fù)證明來(lái)確定合適的乙肝病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)方法[4]。

乙肝血清表面標(biāo)志物是用于檢測(cè)受檢人員是否攜帶有乙肝病毒最為可靠的方式，本研究比較了時(shí)間分辨熒光分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)于乙肝血清標(biāo)志物的檢測(cè)效果。其中的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是一種傳統(tǒng)的檢測(cè)乙肝病毒血清標(biāo)志物的方法，早在20世紀(jì)60年代已經(jīng)用于臨床檢測(cè)乙肝病毒血清標(biāo)志物，該種方法通過(guò)將制作的抗體與某些固定載體相結(jié)合從而有效保證其結(jié)合活性，再將其與酶連接成酶標(biāo)的抗體，將含有底物的樣品與其混合后通過(guò)酶的催化反應(yīng)使底物發(fā)生顏色變化而得到檢驗(yàn)結(jié)果[5]。該種方法操作簡(jiǎn)單，花費(fèi)低，易于廣泛推廣，其已經(jīng)成為我國(guó)基層醫(yī)院廣泛使用的一種乙肝病毒檢測(cè)方法?？稍摲N方法有比較明顯的缺點(diǎn)，需操作者嚴(yán)格按照要求進(jìn)行操作，不然很容易受到外界的污染，且存在前滯現(xiàn)象，故存在比較高的假陽(yáng)性率，患者出現(xiàn)誤診以及漏診的概率也比較高[6]。此外，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)只能對(duì)乙肝進(jìn)行定性的分析，無(wú)法對(duì)患者體內(nèi)的標(biāo)志物濃度進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)，無(wú)法有效檢測(cè)乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量較低的患者，具有比較低的準(zhǔn)確度以及敏感度。時(shí)間分辨熒光分析法作為一種非同位素免疫分析技術(shù)，其結(jié)合了同位素標(biāo)記以及酶標(biāo)記，該種方法具有比較高的靈敏度，其對(duì)于乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體的檢測(cè)效率是酶聯(lián)免疫吸附法的數(shù)倍，該種方法可靠、有效，具有較高的靈敏度，且具有比較寬的線性范圍，試劑的使用周期也比較長(zhǎng)，可以制作出比較穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可以對(duì)檢測(cè)底物進(jìn)行定量的分析，可以逐步取代酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)成為檢測(cè)乙肝病毒的首選方法。此外，時(shí)間分辨熒光分析法同樣適用于大批量樣本的檢測(cè)，可以在較短的時(shí)間內(nèi)獲得檢測(cè)的結(jié)果，也方便臨床根據(jù)檢測(cè)出的乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量制定相應(yīng)的治療方法[7-8]。

本研究結(jié)果顯示，時(shí)間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)于乙肝病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)的準(zhǔn)確度以及敏感度差異顯著，時(shí)間分辨熒光免疫法具有更高的檢測(cè)準(zhǔn)確度以及敏感度。時(shí)間分辨熒光免疫法診斷準(zhǔn)確率為98.00%，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷準(zhǔn)確率為78.33%，時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)于乙肝病毒的診斷有效率顯著高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?？梢哉J(rèn)為，作為一種檢測(cè)乙肝血清學(xué)標(biāo)志物新型的非放射免疫定量檢測(cè)方法，時(shí)間分辨熒光免疫法具有更高的檢測(cè)靈敏度，可以有效減少乙肝檢測(cè)的誤診率以及漏診率，亦可以通過(guò)對(duì)患者體內(nèi)的乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量進(jìn)行定量分析，總結(jié)出患者的病情程度，便于準(zhǔn)確評(píng)估患者的病情發(fā)展情況以及其傳染性，確定相應(yīng)的治療方案，為臨床診斷以及治療提供可靠地依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.059

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)10-1429-03

(收稿日期：2016-01-07)