張昌明 梁少姍 成水芹 王 霞 曾彩虹 鄭春霞 劉志紅

·論 著·

尿液microRNA-196a與腎臟疾病患者遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系

張昌明*梁少姍*成水芹 王 霞 曾彩虹 鄭春霞 劉志紅

目的：探討尿液microRNA-196a(miR-196a)能否作為預(yù)測(cè)局灶節(jié)段性腎小球硬化(FSGS)遠(yuǎn)期預(yù)后的生物標(biāo)志物。 方法：收集FSGS患者和正常對(duì)照的尿液和血漿標(biāo)本，分析尿液和血漿miR-196a水平與FSGS活動(dòng)性的關(guān)系。入選231例經(jīng)腎活檢確診的FSGS，qRT-PCR方法檢測(cè)尿液miR-196a水平，評(píng)估尿液miR-196a對(duì)FSGS預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。 結(jié)果：尿液miR-196a水平在活動(dòng)性FSGS患者組顯著高于腎臟疾病完全緩解組和正常對(duì)照組(P<0.001)，血漿miR-196a水平在三組之間無明顯差異，表明尿液miR-196a是一種主要來源于腎臟的生物標(biāo)志物。231例隨訪患者中，43例進(jìn)展為終末期腎病(ESRD)。發(fā)生ESRD的患者尿液miR-196a水平顯著高于未發(fā)生ESRD的患者(P=0.025)。尿液miR-196a水平與蛋白尿和估算的腎小球?yàn)V過率(eGFR)相關(guān)，與腎間質(zhì)纖維化評(píng)分存在相關(guān)性。隨著尿液miR-196a水平增加，患者發(fā)生ESRD的風(fēng)險(xiǎn)增加。校正年齡、性別、蛋白尿、eGFR后尿液miR-196a升高仍是患者進(jìn)展至ESRD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 結(jié)論：尿液miR-196a是FSGS患者發(fā)生ESRD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可能成為預(yù)測(cè)FSGS遠(yuǎn)期預(yù)后的新型生物標(biāo)志物。

局灶節(jié)段性腎小球硬化 尿液microRNA-196a 遠(yuǎn)期預(yù)后

慢性腎臟病(CKD)已成為全球性的公共衛(wèi)生問題，發(fā)病率逐年增加[1-3]，其終末期腎病(ESRD)、心血管疾病(CVD)和死亡風(fēng)險(xiǎn)增加[4]。腎間質(zhì)纖維化是CKD發(fā)展至ERSD的共同通路，與CKD進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)[5-8]。腎間質(zhì)纖維化的評(píng)估需要腎穿刺活檢才能完成，動(dòng)態(tài)觀察腎間質(zhì)纖維化變化則需要重復(fù)腎活檢。但腎活檢有一定的創(chuàng)傷性，重復(fù)活檢患者難以接受，因此需要積極尋找無創(chuàng)的生物標(biāo)志物來評(píng)估腎間質(zhì)纖維化，幫助判斷CKD預(yù)后。

microRNA(miR)是一組由19～24個(gè)堿基組成的小分子非編碼RNA，通過與靶基因3’-非翻譯區(qū)結(jié)合從而抑制靶基因翻譯或使靶基因降解，參與多種病理生理過程[9]。miR-196a在腎臟表達(dá)非常豐富[10-11]，占小鼠各組織器官miR-196a表達(dá)總量的74.4%[11]。單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)小鼠模型中miR-196a表達(dá)顯著下降，外源性補(bǔ)充miR-196a可通過抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β/Smad(TGF-β-Smad)信號(hào)通路而阻止腎間質(zhì)纖維化，表明miR-196a在腎間質(zhì)纖維化發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[11]。我們既往研究也發(fā)現(xiàn)尿液miR-196a在活動(dòng)性局灶節(jié)段性腎小球硬化(FSGS)患者較正常對(duì)照顯著升高，可用于判斷FSGS疾病活動(dòng)性[12]。基于以上研究背景，我們推測(cè)尿液miR-196a水平與FSGS患者腎間質(zhì)纖維化及遠(yuǎn)期預(yù)后相關(guān)。因此本文旨在探討尿液miR-196a能否作為預(yù)測(cè)FSGS預(yù)后的生物標(biāo)志物。

對(duì)象和方法

病例選擇 入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡16～65歲，性別不限，經(jīng)腎活檢明確診斷為特發(fā)性FSGS?；顒?dòng)性FSGS定義為尿蛋白定量>3.5 g/24h，且血清白蛋白(Alb)<30 g/L；腎臟病完全緩解定義為尿蛋白定量<0.4 g/24h，Alb≥35 g/L，血清肌酐(SCr)≤109.6 μmol/L。排除有明確繼發(fā)因素(感染、藥物、代謝、腫瘤等)、有明確腎臟病家族史的患者。同時(shí)選取年齡、性別匹配的正常志愿者作為正常對(duì)照。

臨床及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) 收集所有入組患者年齡、性別、血壓、24h尿蛋白定量、Alb、SCr、總膽固醇、估算的腎小球?yàn)V過率(eGFR)采用CKD-EPI公式計(jì)算[13]。

腎臟組織病理改變?cè)u(píng)分 所有腎活檢標(biāo)本均進(jìn)行光鏡(包括HE、PAS、PASM-Masson及Masson三色)、免疫熒光、電鏡檢查。評(píng)估腎間質(zhì)纖維化時(shí)采用Masson三色染色切片，借助數(shù)字化圖像掃描系統(tǒng)(Aperio ScanScope system)掃描全片，采用Aperio Imagescope軟件分析腎間質(zhì)纖維化的百分比。腎間質(zhì)纖維化百分比=皮質(zhì)區(qū)Masson綠染面積/皮質(zhì)區(qū)總面積(去除腎小球面積)×100%。所有標(biāo)本均由不知曉臨床結(jié)果的病理醫(yī)生進(jìn)行評(píng)分。

觀察終點(diǎn) ESRD復(fù)合終點(diǎn)包括eGFR<15 ml/(min·1.73m2)或開始腎臟替代治療或腎移植或3年eGFR下降≥40%[14]。

RNA提取及miR-196a檢測(cè) 所有尿液上清、血漿標(biāo)本均來自國家腎臟疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心生物標(biāo)本庫。每例取300 μl尿液上清、100 μl血漿，采用Trizol LS根據(jù)廠商提供的標(biāo)準(zhǔn)操作流程提取總RNA。miR-196a水平采用qRT-PCR方法檢測(cè)[12,15]。10 μl逆轉(zhuǎn)錄體系包括：5×逆轉(zhuǎn)錄緩沖液(Takara)2 μl，AMV逆轉(zhuǎn)錄酶(Takara)0.5 μl，dNTPs(Takara，10 mmol/L)1 μl，莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物(Applied Biosystems)1 μl，RNA 2 μl，DEPC水3.5 μl。反應(yīng)條件為：16℃，30 min，42℃，30 min，85℃，5 min。所得到的cDNA于-20℃保存?zhèn)溆谩?0 μl定量PCR體系包括：10×PCR緩沖液(Takara)2 μl，dNTPs(Takara，10 mmol/L)0.4 μl，MgCl2(Takara，25 mmol/L)1.2 μl，Taq酶(Takara)0.3 μl，TaqMan探針(Applied Biosystems)0.33 μl，水14.77 μl，cDNA 1 μl。反應(yīng)條件為：95℃，5 min，然后95℃，15s，60℃，1 min進(jìn)行40個(gè)循環(huán)。所有的PCR反應(yīng)均行3復(fù)孔。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 利用SPSS 18.0或R軟件包對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)或One-way Anova檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用百分率表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。受試者工作特征(ROC)曲線分析尿液和血漿miR-196a區(qū)分FSGS疾病活動(dòng)性的能力。Pearson或Spearman相關(guān)分析尿液miR-196a與臨床及病理指標(biāo)間的相關(guān)性。Kaplan-Meier曲線分析尿液miR-196a水平與腎臟結(jié)局之間的關(guān)系。單因素和多因素COX回歸分析影響腎臟預(yù)后的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素。赤池信息量準(zhǔn)則(AIC)及一致性指數(shù)(C-index)評(píng)估各模型的預(yù)測(cè)精度。miR-196a水平先進(jìn)行l(wèi)og10轉(zhuǎn)化后再行上述統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

尿液和血漿miR-196a與FSGS疾病活動(dòng)性的關(guān)系 首先選取正常對(duì)照、活動(dòng)性FSGS和腎臟疾病完全緩解患者各20例(初測(cè)階段)，檢測(cè)尿液miR-196a水平。結(jié)果顯示活動(dòng)性FSGS患者尿液miR-196a水平顯著高于正常對(duì)照和腎臟疾病完全緩解患者(圖1A)。然后選取正常對(duì)照、活動(dòng)性FSGS和腎臟疾病完全緩解患者各80例對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證(驗(yàn)證階段)，仍然發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照和腎臟疾病完全緩解患者相比，活動(dòng)性FSGS患者尿液miR-196a水平顯著升高(圖1B)。ROC曲線分析顯示尿液miR-196a可以很好的區(qū)分活動(dòng)性FSGS患者和正常對(duì)照(圖1C)及腎臟疾病完全緩解患者(圖1D)。與此同時(shí)檢測(cè)血漿miR-196a水平，結(jié)果顯示不論是初測(cè)階段，還是驗(yàn)證階段血漿miR-196a水平在三組間均無明顯變化(圖1E、F)。血漿miR-196a不能區(qū)分活動(dòng)性FSGS患者和正常對(duì)照(圖1G)及腎臟疾病完全緩解患者(圖1H)。

圖1 尿液與血漿miR-196a與疾病活動(dòng)性的關(guān)系miR-196a:microRNA-196a;FSGS：局灶節(jié)段性腎小球硬化；NC：正常對(duì)照；FSGS-A：活動(dòng)性FSGS患者； FSGS-CR：腎臟疾病完全緩解患者;A～D：尿液miR-196a與疾病活動(dòng)性的關(guān)系；A：初測(cè)階段FSGS-A患者尿液miR-196a水平顯著高于NC和FSGS-CR患者；B：驗(yàn)證階段FSGS-A患者尿液miR-196a水平顯著高于NC和FSGS-CR患者；C：尿液miR-196a能較好的區(qū)分FSGS-A患者和NC；D： 尿液miR-196a能較好的區(qū)分FSGS-A患者和FSGS-CR患者；E～H：血漿miR-196a與疾病活動(dòng)性的關(guān)系；E：初測(cè)階段FSGS-A患者血漿miR-196a水平與NC和FSGS-CR患者相當(dāng)；F：驗(yàn)證階段FSGS-A患者血漿miR-196a水平與NC和FSGS-CR患者相當(dāng)；G：血漿miR-196a不能區(qū)分FSGS-A患者和NC；H：血漿miR-196a不能區(qū)分FSGS-A患者和FSGS-CR患者

尿液miR-196a與臨床指標(biāo)的相關(guān)性 231例有長(zhǎng)期隨訪數(shù)據(jù)的FSGS患者，平均年齡為(30.72±13.11)歲，男性比例為68.4%，平均eGFR為(93.54±38.36) ml/(min·1.73m2)，平均隨訪時(shí)間為(56.3±23.5)月，有43例患者進(jìn)展至ESRD。與未進(jìn)展至ESRD的患者相比，進(jìn)展至ESRD的患者基線eGFR水平較低(P=0.007)、尿蛋白水平升高(P=0.016)、SCr水平升高(P=0.010)、尿液miR-196a水平升高(P=0.025)(表1)。年齡、性別、高血壓、Alb、總膽固醇水平在兩組間無明顯差異。相關(guān)分析結(jié)果顯示，尿液miR-196a水平與eGFR、24h尿蛋白定量、Alb、總膽固醇顯著相關(guān)，與年齡、性別、高血壓無相關(guān)性(表2)。

尿液miR-196a與腎間質(zhì)纖維化的關(guān)系 為了探討尿液miR-196a水平與腎間質(zhì)纖維化的相關(guān)性，我們使用數(shù)字化圖像掃描系統(tǒng)計(jì)算了每例患者的腎間質(zhì)纖維化百分比。Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，尿液miR-196a水平與腎間質(zhì)纖維化百分比顯著正相關(guān)(圖2)，與腎小球節(jié)段硬化、腎小球球性硬化無相關(guān)性(r=-0.099和0.069，P=0.135和0.299)。

表1 231例隨訪研究患者的基線臨床和病理資料

eGFR：估算的腎小球?yàn)V過率;ESRD:終末期腎??；miRNA-196a:microRNA-196a

表2 尿液miRNA-196a與臨床指標(biāo)相關(guān)性

eGFR：估算的腎小球?yàn)V過率；miRNA-196a:microRNA-196a

圖2 尿液microRNA-196a水平與腎間質(zhì)纖維化正相關(guān)

尿液miR-196a對(duì)FSGS患者腎臟遠(yuǎn)期預(yù)后的預(yù)測(cè) 以正常對(duì)照組尿液miR-196a水平的95%分位數(shù)上限(2.67)為參考值，將FSGS患者分為兩組：尿液miR-196a水平升高組(尿液miR-196a>2.67)和尿液miR-196a水平正常組(尿液miR-196a<2.67)。尿液miR-196a水平升高組，5年和10年累積腎存活率分別為77.5%和73.0%。尿液miR-196a水平正常組，5年和10年累積腎存活率分別為90.0%和89.2%。Kaplan-Meier生存曲線顯示，尿液miR-196a水平升高組患者ESRD累積發(fā)生率增加(圖3)。

圖3 Kaplan-Meier曲線分析不同尿液microRNA-196a水平的腎存活率

單因素COX回歸分析顯示，尿液miR-196a水平升高組較尿液miR-196a水平正常組ESRD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加，HR=2.43(95%CI 1.27～4.66；P=0.008)。校正年齡、性別、尿蛋白、eGFR等影響因素后，尿液miR-196a水平升高仍然是ESRD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(表3)。

表3 尿液miR-196a預(yù)測(cè)ESRD的單因素及多因素COX回歸分析

HR95%CIP值單因素COX模型尿液miR-196a(log10轉(zhuǎn)化)1.611.01～2.570.045尿液miR-196a分組2.431.27～4.660.008多因素COX模型*尿液miR-196a(log10轉(zhuǎn)化)1.590.96～2.640.074尿液miR-196a分組2.111.09～4.070.027

miR-196a：microRNA-196a; ESRD:終末期腎?。籩GFR：估算的腎小球?yàn)V過率；*：對(duì)年齡、性別、eGFR和蛋白尿進(jìn)行校正

以eGFR和蛋白尿?yàn)轭A(yù)測(cè)因子(校正年齡、性別)，構(gòu)建FSGS預(yù)后的基礎(chǔ)預(yù)測(cè)模型(模型1，M1)，再以eGFR、蛋白尿和尿液miR-196a分組為預(yù)測(cè)因子(校正年齡、性別)，構(gòu)建FSGS預(yù)后的新模型(模型2，M2)。計(jì)算兩個(gè)模型的AIC和C-index值，結(jié)果顯示：與M1相比，加入尿液miR-196a分組的模型M2的AIC從433降至429，C-index從0.65提高到0.68(P=0.021)，表明加入尿液miR-196a分組后的新模型對(duì)FSGS預(yù)后的預(yù)測(cè)精度優(yōu)于基礎(chǔ)預(yù)測(cè)模型。

討 論

本研究發(fā)現(xiàn)，尿液miR-196a是一種腎臟來源的生物標(biāo)志物，其表達(dá)水平與腎間質(zhì)纖維化程度相關(guān)，可以幫助預(yù)測(cè)FSGS遠(yuǎn)期預(yù)后，拓寬了體液miRNAs檢測(cè)在腎臟疾病領(lǐng)域的潛在應(yīng)用價(jià)值。

本研究通過分析尿液miR-196a水平與FSGS患者遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)FSGS患者尿液miR-196a水平與腎間質(zhì)纖維化、基線eGFR和蛋白尿相關(guān)，尿液miR-196a水平升高的患者ESRD累積發(fā)生率增加，校正年齡、性別、eGFR和蛋白尿等影響因素后尿液miR-196a升高仍是ESRD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，為臨床醫(yī)師判斷患者的遠(yuǎn)期預(yù)后提供了一種新的、無創(chuàng)的生物標(biāo)志物。這組患者經(jīng)腎活檢明確診斷、隨訪時(shí)間長(zhǎng)(未進(jìn)展至ESRD的患者至少隨訪3年)、臨床資料完整，能較好的保證研究結(jié)果的可靠性。

尿液miR-196a可能源于血液中miR-196a的超負(fù)荷或者損傷的腎臟組織。為了探尋這一問題，我們同時(shí)檢測(cè)了FSGS患者與正常對(duì)照尿液和血漿miR-196a水平，發(fā)現(xiàn)活動(dòng)性FSGS患者尿液miR-196a較完全緩解患者和正常對(duì)照顯著升高，與疾病活動(dòng)性相關(guān)。但是，無論是活動(dòng)性FSGS患者，還是腎臟病完全緩解患者，血漿miR-196a水平較正常對(duì)照均無升高，血漿miR-196a水平與FSGS疾病活動(dòng)性沒有相關(guān)性。這一結(jié)果表明尿液miR-196a水平的升高并非由于血液中miR-196a的超負(fù)荷，而很可能源自于損傷的腎臟。

miR-196a在細(xì)胞生物合成、代謝調(diào)控過程中發(fā)揮重要作用。如研究發(fā)現(xiàn)miR-196a可通過調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)成分I型膠原的表達(dá)參與硬皮病的發(fā)生[16-17]，Kashiyama 等[18]發(fā)現(xiàn)miR-196a可同時(shí)調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)成分Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原的表達(dá)參與瘢痕疙瘩的形成。細(xì)胞外基質(zhì)也是腎組織的重要組成成分，miR-196a也可通過對(duì)腎臟基質(zhì)的調(diào)節(jié)而參與腎臟疾病如腎臟纖維化的發(fā)生發(fā)展，如Meng等[11]發(fā)現(xiàn)正常腎臟中miR-196a表達(dá)豐富，占各臟器miR-196a總量的74.4%。UUO誘導(dǎo)的纖維化小鼠模型中miR-196a表達(dá)下調(diào)，通過上調(diào)靶基因TGF-β受體2(TGF-βR2)表達(dá)，激活TGF-β-Smad信號(hào)通路，促進(jìn)Ⅰ型膠原分泌，從而參與腎臟纖維化的發(fā)生發(fā)展。本研究發(fā)現(xiàn)，尿液miR-196a和腎間質(zhì)纖維化顯著正相關(guān)，表明尿液miR-196a可能反映了腎小管間質(zhì)的病理生理變化，為其預(yù)測(cè)FSGS預(yù)后提供了分子基礎(chǔ)。有研究認(rèn)為腎小球硬化是影響FSGS預(yù)后的危險(xiǎn)因素之一[19]，但本文發(fā)現(xiàn)尿液miR-196a與腎小球硬化并無相關(guān)性。盡管腎小球中miR-196a表達(dá)也很豐富[11]，但是腎小球損傷情況下miR-196a變化情況及miR-196a在腎小球損傷中的作用尚無相關(guān)研究，F(xiàn)SGS患者尿液miR-196a的變化與腎小球特別是足細(xì)胞中miR-196a水平的變化是否有關(guān)還需進(jìn)一步研究。FSGS患者腎小球和腎小管間質(zhì)中miR-196a表達(dá)水平、其與腎臟纖維化和FSGS遠(yuǎn)期預(yù)后的相關(guān)性等問題亦有待進(jìn)一步研究。

大量研究均證實(shí)腎間質(zhì)纖維化與CKD患者預(yù)后不良相關(guān)[6-8]，提示尿液miR-196a可能可以預(yù)測(cè)多種CKD患者的遠(yuǎn)期預(yù)后。我們既往的研究也發(fā)現(xiàn)除了FSGS，在膜性腎病(MN)和糖尿病腎病(DN)患者尿液中亦可檢測(cè)到miR-196a的升高[12]，表明miR-196a并不是一種疾病特異的標(biāo)志物，而是一種損傷相關(guān)的標(biāo)志物，尿液miR-196a能否預(yù)測(cè)MN和DN的遠(yuǎn)期預(yù)后是我們即將開展的工作。此外研究表明 TGF-β和盤狀結(jié)構(gòu)域受體2(DDR2)可以抑制成纖維細(xì)胞中miR-196a的表達(dá)[16,17]，寒冷刺激或β腎上腺素可誘導(dǎo)白色脂肪組織前體細(xì)胞中miR-196a的表達(dá)[20]，但是腎組織及尿液miR-196a表達(dá)調(diào)控的機(jī)制尚無相關(guān)研究，進(jìn)一步闡明調(diào)控miR-196a表達(dá)的機(jī)制可以為腎臟疾病的治療提供新靶點(diǎn)，從而改善患者遠(yuǎn)期預(yù)后。

綜上所述，尿液miR-196a和FSGS患者腎間質(zhì)纖維化顯著相關(guān)，且是ESRD發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可能成為預(yù)測(cè)FSGS遠(yuǎn)期預(yù)后的新型生物標(biāo)志物。

(致謝：本研究使用的血漿和尿液標(biāo)本來自于國家腎臟疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心生物樣本庫)

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(本文編輯 莫 非)

Urinary microRNA-196a as a predictor of long-term outcome in patients with kidney disease

ZHANG Changming*,LIANG Shaoshan*,CHENG Shuiqin,WANG Xia,ZENG Caihong,ZHENG Chunxia,LIU Zhihong

National Clinical Research Center of Kidney Diseases,Jinling Hospital,Nanjing University School of Medicine,Nanjing 210016,China

*ZHANG Changming and LIANG Shaoshan are considered to be first authors

LIU Zhihong(E-mail:liuzhihong@nju.edu.cn)

Objective： To investigate the association between urinary microRNA-196a (miR-196a) and long-term outcome in patients with focal segmental glomerulosclerosis(FSGS). Methodology：Urinary and plasma miR-196a were tested in patients with active FSGS(FSGS-A), FSGS in complete remission(FSGS-CR) and normal controls(NC). 231 FSGS patients were then enrolled at the time of renal biopsy and urinary miR-196a levels were measured by qRT-PCR. The relationship between urinary miR-196a and long-term outcome of FSGS was analyzed. Results：Urinary miR-196a levels were significantly increased in FSGS-A patients as compared with FSGS-CR patients and NCs(P<0.001). However, plasma miR-196a levels showed no difference among the three groups, suggesting that the change of urinary miR-196a was mainly kidney derived. Of the 231 patients, 43 patients developed end-stage renal disease(ESRD) during the follow-up period. Urinary miR-196a levels were significantly higher in patients who progressed to ESRD than those not progressed to ESRD(P=0.025). Urinary miR-196a was associated with proteinuria, eGFR, and interstitial fibrosis. Patients with higher urinary miR-196a levels had a higher cumulative incidence of ESRD. Risk persisted after adjusting for age, sex, proteinuria, and eGFR. Conclusion：Urinary miR-196a is an independent risk factor of ESRD, facilitating early identification of those who will subsequently develop ESRD.

focal segmental glomerulosclerosis urinary miR-196a long-term renal survival

10.3969/cndt.j.issn.1006-298X.2016.06.001

國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFC0904100)，國家科技支撐計(jì)劃課題(2015BAI12B05)，第一批國家臨床重點(diǎn)專科項(xiàng)目(2014ZDZK001)，江蘇省創(chuàng)新能力建設(shè)專項(xiàng)(BM2015004)，國家自然科學(xué)基金(81570644),南京軍區(qū)南京總醫(yī)院院管課題(2014003)

南京軍區(qū)南京總醫(yī)院腎臟科 國家腎臟疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心 全軍腎臟病研究所(南京，210016),*張昌明和梁少姍為共同第一作者

劉志紅(E-mail:liuzhihong@nju.edu.cn)

2016-10-27

? 2016年版權(quán)歸《腎臟病與透析腎移植雜志》編輯部所有