高偉，王楠，喬虎

趙明1△，崔曉雪2，于淼2，王伊林2，龍杰2，趙強(qiáng)1

5-HT1B受體亞型對小腦頂核介導(dǎo)的運(yùn)動行為的影響*

高偉1△，王楠2，喬虎2

(1．西安理工大學(xué)體育部，陜西西安710048;2．西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部，陜西西安710061)

目的:探討5-羥色胺(5-HT)能神經(jīng)系統(tǒng)在經(jīng)小腦頂核介導(dǎo)的運(yùn)動行為中的作用。方法:采用大鼠離體腦片膜片鉗及大鼠走步機(jī)的行為學(xué)測試方法。結(jié)果:阻斷5-HT1B受體能夠增強(qiáng)小腦頂核興奮性突觸傳遞，行為學(xué)試驗(yàn)中給予5-HT及5-HT1B受體阻斷劑SB224289，發(fā)現(xiàn)注射5-HT到小腦頂核后，大鼠在Rota-rod走步機(jī)上的持續(xù)時(shí)間顯著延長，而給予其阻斷劑SB224289后，能夠反轉(zhuǎn)此作用。結(jié)論:5-HT很可能通過5-HT1B受體抑制頂核神經(jīng)元的興奮性突觸傳遞從而調(diào)節(jié)小腦核團(tuán)神經(jīng)元環(huán)路的活動，繼而影響小腦的最終輸出，實(shí)現(xiàn)對小腦頂核介導(dǎo)的運(yùn)動平衡和協(xié)調(diào)能力的調(diào)控。

5-HT;5-HT1B受體;小腦頂核;興奮性突觸后電流;大鼠;膜片鉗

5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)屬于單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，是中樞系統(tǒng)中重要的神經(jīng)遞質(zhì)和調(diào)質(zhì)。5-HT能神經(jīng)元起源于大腦中縫核、延髓及腦橋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，直接投射于小腦核團(tuán)從而支配小腦皮層。而小腦皮層是參與運(yùn)動調(diào)節(jié)的最主要的結(jié)構(gòu)之一，在動物的平衡控制、肌張力調(diào)節(jié)、協(xié)調(diào)個(gè)體動作的精準(zhǔn)性和隨意運(yùn)動控制中發(fā)揮重要作用［1-5］。小腦傳入信息經(jīng)過一系列整合和處理后，主要由小腦內(nèi)部深層核團(tuán)接受。頂核(fastigial nucleus，F(xiàn)N)作為小腦深部的三大核團(tuán)之一，能接受來自小腦皮層，苔狀纖維和爬行纖維的相關(guān)運(yùn)動信息，以及包括5-HT能纖維傳入在內(nèi)的第三類傳入系統(tǒng)傳來的信息，從而控制軀干和肢體近端肌肉的運(yùn)動［4-6］。但目前為止，中樞5-HT能傳入纖維對經(jīng)小腦頂核介導(dǎo)的運(yùn)動行為的作用尚不明確，對其潛在的神經(jīng)機(jī)制仍不清楚。5-羥色胺受體家族龐大，依據(jù)其不同分子結(jié)構(gòu)及藥理學(xué)特性，迄今已發(fā)現(xiàn)14種不同亞型。這些受體都廣泛但不均一的分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中，介導(dǎo)著腦內(nèi)興奮性或抑制性的神經(jīng)傳遞。其中5-HT1B受體廣泛分布于浦肯野(Purkinje)細(xì)胞上、或在投射到核團(tuán)中的浦肯野細(xì)胞軸突終末或來自于苔狀纖維的谷氨酸能末梢上［7］。該受體屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族。在突觸前與突觸后均有分布，可與Gi蛋白結(jié)合，抑制腺苷酸環(huán)化酶，下調(diào)cAMP生成，介導(dǎo)著腦內(nèi)興奮性或抑制性的神經(jīng)傳遞。5-HT1B受體可以調(diào)節(jié)5-HT的釋放，已被證明參與多種生理功能，主要包括運(yùn)動積極性，運(yùn)動協(xié)調(diào)性和情感行為［8，9］。但是5-HT1B受體對小腦神經(jīng)元的活動發(fā)揮何種效應(yīng)?這種效應(yīng)對運(yùn)動行為產(chǎn)生什么樣的影響?均需要進(jìn)行探討。為此，本研究采用大鼠離體腦片膜片鉗技術(shù)研究5-HT1B受體在小腦頂核興奮性突觸傳遞中的作用并觀察其對大鼠運(yùn)動行為學(xué)的影響。

1 材料與方法

1．1材料

實(shí)驗(yàn)動物均為健康雄性SD大鼠，來自西安交通大學(xué)動物中心。單籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食進(jìn)水，同時(shí)保證恒定溫度、濕度，光暗周期為12 h。根據(jù)“Principles of Laboratory Animal Care”(NIH publication no．85-23)和西安交通大學(xué)動物保護(hù)委員會制定的條例，整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程最大程度的減輕動物所受的痛苦和減少所用動物數(shù)量。實(shí)驗(yàn)中需要的藥品用0．15%的DMSO將5-TH及拮抗劑SB224289溶解，并置于-20℃存儲。實(shí)驗(yàn)時(shí)將其稀釋至所需濃度進(jìn)行操作。

1．2小腦薄片的制備

將大鼠腹腔注射4%的水合氯醛(0．4 g/kg體重)麻醉，快速斷頭，用持針器剝離開顱骨，將腦組織取出，整個(gè)操作應(yīng)該在冰上完成，控制時(shí)間在5 min左右。期間使用95%醫(yī)用氧氣將人工腦脊液充至飽和，最后將腦組織放入0℃的人工腦脊液靜置1 min，后沿矢狀面修剪掉一側(cè)小腦半球，用502膠水將另一半和瓊脂塊一起粘于振動切片機(jī)(DTK-1 000 DosakaEM，Japan)載物臺上，沿矢狀面切取厚度為300μm的腦片，之后將其放入通有95%醫(yī)用氧氣的孵育槽中，室溫下孵育1 h。為獲得活性狀態(tài)好的神經(jīng)元，制備腦片的整個(gè)過程越快越好，并且在冰上進(jìn)行，用來剝離腦片的整套器械要提前預(yù)冷，以減少對腦組織的物理損傷。

1．3全細(xì)胞膜片鉗記錄

將孵育后的小腦薄片移入半浸式腦片灌流槽，將蠕動泵的流速調(diào)至2．2～2．6 ml/min，首先在低倍鏡(×10)下尋找記錄的位置。緩慢移動載物臺并結(jié)合大鼠腦圖譜，將視野移至大鼠小腦頂核區(qū)，之后切換到高倍鏡(水鏡×40)尋找表面光滑，輪廓清晰的神經(jīng)元，并將其移至視野正中央。找到細(xì)胞后，再次轉(zhuǎn)換回低倍鏡，安放電極。實(shí)驗(yàn)中所用記錄電極是美國Sutter公司提供的電極(外徑是1．2 mm，內(nèi)徑是0．69 mm)。用水平拉制儀(P-87，Sutter，USA)采用兩次拉制，拉制的電極阻抗一般為2～4 MΩ。我們用含Cs電極內(nèi)液(其成分:單位mmol/L: Cs2SO4，110;CaCl2，0．5;MgCl2，2;EGTA，5; HEPES，5;etraethylammonium-Cl，5;)用CsOH調(diào)節(jié)pH值至7．2～7．4，滲透壓為290～320 mOsm。打開測試方波，給予約4 ml空氣的正壓，使用微操使電極入水。當(dāng)電極碰觸到細(xì)胞表面時(shí)，移去正壓，并給予負(fù)壓，封接成功，可以看到軟件界面的測試方波慢慢變?yōu)橐粭l直線，此時(shí)將鉗制電壓設(shè)為-70 mV，并且進(jìn)行快電容補(bǔ)償(c-fast)，當(dāng)封接電阻達(dá)到GΩ以上后，進(jìn)行慢電容補(bǔ)償(c-slow)。準(zhǔn)備破膜，破膜時(shí)可以看到快變電容所引起的兩個(gè)尖波在電壓鉗模式下，膜電位被鉗制到-70 mV以維持細(xì)胞正常的生理狀況。ACSF中加入20μmol/L的Bicuculline用來阻斷GABA受體介導(dǎo)的抑制性突觸后電流。雙鎢絲電極放在小腦蚓部皮質(zhì)，用頻率為0．025 Hz，持續(xù)時(shí)間為0．3 ms，刺激強(qiáng)度范圍為0．25～0．5 mA，通過每次0．05 mA階梯式增加刺激強(qiáng)度，根據(jù)最終反應(yīng)結(jié)果確定最佳實(shí)驗(yàn)刺激強(qiáng)度(最大反應(yīng)幅值的50%)。待誘發(fā)的興奮性突觸后電流(eEPSCs)穩(wěn)定至少10 min后，用之前確定的最佳刺激強(qiáng)度誘發(fā)eEPSCs(對照組CP)，并將給藥后10 min記錄數(shù)據(jù)視為藥物組(PD)，然后洗脫10 min并將記錄數(shù)據(jù)標(biāo)記為洗脫組(WO)。所有的記錄與刺激程序都通過美國Axon Digidata 1440A放大器控制。此外，實(shí)驗(yàn)過程如果電阻Rs變化超過30%，或靜息膜電位小于-50 mV，則舍棄不用。

1．4動物手術(shù)

大鼠經(jīng)腹腔注射2．5%戊巴比妥鈉溶液(50 mg/kg)，待麻醉后，將其頭部固定于腦立體定位儀上，頭部剪毛備皮，用碘伏消毒，在大鼠腦部做一正中切口，暴露顱骨，用雙氧水進(jìn)行傷口止血。根據(jù)大鼠腦立體定位儀圖譜，確定小腦頂核坐標(biāo)，為前囟前11．4～11．6 mm，中線旁開1．2 mm，進(jìn)針深度為5．4～5．6 mm。根據(jù)此坐標(biāo)在大鼠雙側(cè)小腦頂核正上方打孔，將用于微量注射的兩根不銹鋼套管植入小腦內(nèi)，并用不銹鋼螺絲和牙科水泥將套管固定于顱骨上。手術(shù)后每只大鼠給予肌注兩萬單位青霉素抗感染，動物均單籠飼養(yǎng)，自由飲水取食。飼養(yǎng)間溫度維持在22℃～26℃，光照時(shí)間為12 h/d。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程盡可能地減少對動物的傷害及所用動物的數(shù)量。

1．5行為學(xué)測試

本實(shí)驗(yàn)中使用Rota-rod(XR1514-RZPR)走步機(jī)測試，大鼠隨機(jī)分為3組:Saline組(n=12)，5-HT組(n=10)，SB224289組(n=12)。所有大鼠均選擇上午9:00開始進(jìn)行測試，在正式實(shí)驗(yàn)前每只大鼠先進(jìn)行連續(xù)5 d至少10次以上的訓(xùn)練，用于穩(wěn)定大鼠的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。測試分為4個(gè)階段:給藥前、給藥后5 min、給藥后4 h、給藥后24 h。

行為學(xué)實(shí)驗(yàn)給藥時(shí)，先將實(shí)驗(yàn)鼠放入小動物麻醉機(jī)(RWD isoflurane R580)的玻璃罩中，30 s后大鼠麻醉，將其取出用吸入式麻醉機(jī)的透明的面罩置于大鼠口鼻端后開始給藥。將Hamilton微量注射器的不銹鋼針插入套管，使其頂端超出套管末端2 mm，以保證注射位點(diǎn)正好落在頂核的表面。藥物每側(cè)注射1μl，持續(xù)注射2 min，結(jié)束后停針2 min。以利藥物充分吸收，退針后將套芯重新插入套管中。所用藥物包括:5-HT(50μmol/L)，選擇性5-HT1B受體阻斷劑SB224289(10μmol/L)，以及生理鹽水。分別注射到不同組別大鼠的雙側(cè)頂核，以評估小腦5-HT能神經(jīng)傳入對大鼠運(yùn)動行為學(xué)的影響。根據(jù)Song YN相關(guān)研究［10］，1μl的注射量在核團(tuán)內(nèi)的作用范圍不超過2．0 mm，因此，本實(shí)驗(yàn)中注射藥物的有效范圍將局限在小腦頂核內(nèi)。給藥后恢復(fù)5 min (一般情況小動物麻醉機(jī)面罩去掉后，大鼠會迅速恢復(fù)清醒)，馬上進(jìn)行單只大鼠5 min時(shí)間點(diǎn)的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。大鼠首先在低速(4 r/min)狀態(tài)下適應(yīng)30 s，然后將橫梁的轉(zhuǎn)速在3 min內(nèi)從4 r/min勻加速到60 r/min。在大鼠麻醉恢復(fù)期間可以進(jìn)行下一只大鼠的給藥操作。將一個(gè)處理組所有給藥大鼠的實(shí)驗(yàn)完成后。開始測量4 h時(shí)間點(diǎn)的行為數(shù)據(jù)，最后測量24 h的行為學(xué)數(shù)據(jù)。其中，24 h的測試時(shí)，每只大鼠測量3次，每次間隙5 min，以減少動物緊張和疲勞。

根據(jù)HeYC等研究確定5-HT和拮抗劑的使用初始濃度梯度［11］，預(yù)實(shí)驗(yàn)中使用5-HT和拮抗劑的濃度分別為1μmol/L，10μmol/L、50μmol/L、100 μmol/L發(fā)現(xiàn)。給予50μmol/L的5-HT時(shí)，大鼠的在走步機(jī)的停留時(shí)間最長。拮抗劑使用10μmol/L濃度時(shí)，大鼠在走步機(jī)的停留時(shí)間最短。由此確定了行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的藥物濃度。

1．6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用SPSS 13．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Origin 7．0作圖。膜片鉗數(shù)據(jù)利用Clampfit 9．0采集響應(yīng)電流的幅度以CP最大幅值作為100%，PD和WO的計(jì)算公式為分別為:PD-CP/CP×100%及WO-CP/CP×100%。行為學(xué)數(shù)據(jù)用走步機(jī)計(jì)數(shù)器進(jìn)行采集。所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(珋x±s)表示，用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果

離體腦片全細(xì)胞膜片鉗記錄發(fā)現(xiàn)，給予5-HT1B受體拮抗劑SB224289(10μmol/L)時(shí)，相比于給藥前，誘發(fā)的興奮性突觸后電流(eEPSCs)波幅呈現(xiàn)顯著的增加。小腦頂核eEPSCs的幅度較給藥前分別增加(49．52±7．91)%(P＜0．05，圖1 a)，洗脫10 min后，eEPSCs的幅度恢復(fù)到給藥前的(104．99± 12．67)%(圖1b)。

2．2微量注射5-HT1B受體阻斷劑顯著對大鼠運(yùn)動能力的影響

加速Rota-rod走步機(jī)測試顯示，給藥前34只大鼠的平均成績?yōu)?95．7±2．1)s。當(dāng)注射5-HT到頂核5 min后，大鼠在Rota-rod走步機(jī)上的持續(xù)時(shí)間顯著延長(P＜0．01，圖2)，給藥后4 h和24 h后逐漸恢復(fù)到給藥前狀態(tài);而微量注射SB224289(n= 12)到小腦頂核5 min后，大鼠在走步機(jī)上停留的時(shí)間顯著縮短(P＜0．01，圖2)，同樣在給藥4 h和24 h后逐漸恢復(fù)到初始狀態(tài)。上述結(jié)果提示5-HT可以增強(qiáng)大鼠的運(yùn)動能力，在這個(gè)過程中5-HT1B受體發(fā)揮了重要作用。

Fig．1 The analysis of the changes in excitatory synaptic transmission in the cerebella fastigial nucleus a．The scope of 5-HT1 receptor antagonist SB224289(10 μmol/L，n=10);b．The cartogram of SB224289(10 min，bias)and the eEPSCs of WO(10 min，grey)*P＜0．05 vs baseline group

Fig．2 Motor performances of rats in saline group，5-HT-injected group，SB224289-injected group in accelerating rotarod test(珋x±s)＊＊P＜0．01 vs saline group

2．1選擇性地阻斷5-HT1B受體對小腦頂核興奮性突觸傳遞的影響

3 討論

小腦5-HT能神經(jīng)傳入是繼苔狀纖維和爬行纖維外最大的傳入系統(tǒng)。但5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)在經(jīng)小腦介導(dǎo)的運(yùn)動行為中所起的作用及其潛在的神經(jīng)機(jī)制有待研究。小腦中存在多種類型的5-HT受體，Yew等人發(fā)現(xiàn)小鼠小腦細(xì)胞層和分子層含有少量5-HT1A陽性細(xì)胞，5-HT2A陽性細(xì)胞數(shù)比較多，但是小鼠Purkinje細(xì)胞層中沒有5-HT1A及5-HT2 A受體［12］;大鼠小腦中有少量5-HT2A及5-HT2B mRNA表達(dá)［13］;同樣5-HT5A、5-HT4和5-HT6在小腦中的含量也非常低［14，15］。而Boschertd等研究發(fā)現(xiàn)在purkinje細(xì)胞主要分布著5-HT1B受體的mRNA，但是這些細(xì)胞受體結(jié)合位點(diǎn)很少，相反，在包含頂核在內(nèi)的小腦深部核團(tuán)，也就是purkinje細(xì)胞投射的主要區(qū)域，才存在穩(wěn)定的受體結(jié)合位點(diǎn)［16］。Sari研究發(fā)現(xiàn)，在大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)使用縮氨酸抗體識別5-HT1B受體進(jìn)行定位發(fā)現(xiàn)，最密集的5-HT1B受體免疫反應(yīng)性發(fā)生在腹側(cè)蒼白球，蒼白球、黑質(zhì)。此外，中等密度的免疫反應(yīng)性發(fā)生在小腦核團(tuán)、上丘灰質(zhì)層和尾狀核［17］。Murano等［18］研究發(fā)現(xiàn)5-HT1B受體廣泛分布于浦肯野細(xì)胞上，小腦核團(tuán)中也存在5-HT1B受體，主要分布在投射到核團(tuán)中的浦肯野細(xì)胞軸突終末或來自于苔狀纖維的谷氨酸能末梢上。Singer等人［19］發(fā)現(xiàn)5-HT作用于突觸前5-HT1B受體，通過減少囊泡釋放的幾率抑制了舌下神經(jīng)核中谷氨酸介導(dǎo)的興奮性突觸傳遞。同樣突觸前5-HT1受體的激活可以抑制丘腦頂核興奮性及抑制性突觸后電流［20］。與前期文獻(xiàn)報(bào)道相一致，我們采用離體電生理技術(shù)，給予5-HT也使小腦頂核內(nèi)興奮性突觸傳遞效能被抑制，而選擇性地阻斷5-HT1B受體，興奮性突出傳遞效能增加。有研究發(fā)現(xiàn)，5-HT能夠通過激活苔蘚纖維突觸前終末的5-HT1B受體減少誘發(fā)的興奮性突觸后電流的幅度(eEPSCs)，在灌流液中加入5-HT后所誘發(fā)的LTD的幅度也是明顯減少的，提示5-HT不僅能夠短暫的抑制苔蘚纖維誘發(fā)的eEPSCs，并且在調(diào)節(jié)長時(shí)程突觸效能方面起著重要的作用［18］。因此可以看出，5-HT可以調(diào)節(jié)谷氨酸和GABA的釋放，而且很可能通過5-HT1B受體抑制核團(tuán)神經(jīng)元的興奮性突觸傳遞，從而調(diào)節(jié)小腦核團(tuán)神經(jīng)元環(huán)路的活動，繼而影響到初級小腦環(huán)路的信息整合，以及脊髓小腦的最終輸出來實(shí)現(xiàn)對運(yùn)動行為的調(diào)控。

中樞5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)在運(yùn)動調(diào)控中起著重要的作用，目前在運(yùn)動控制中心(蒼白球，黑質(zhì)和小腦的深核)發(fā)現(xiàn)了大量的5-HT1B受體，表明其參與了運(yùn)動行為的調(diào)控［21，22］?；蚯贸?-HT受體后的小鼠在曠場實(shí)驗(yàn)中減少了整個(gè)曠場的垂直探索和曠場中央的水平探索，在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出在開放臂停留時(shí)間減少等不同程度的運(yùn)動功能異常［23］，說明中樞5-HT的確參與了運(yùn)動行為的調(diào)控。在本研究中，通過向小腦頂核微量注射的方法評估5-HT及其他5-HT能藥物對頂核介導(dǎo)的運(yùn)動行為的影響，注射5-HT后，大鼠在Rota-rod走步機(jī)運(yùn)動成績顯著提高。而注射5-HT1B的阻斷劑，以阻斷頂核內(nèi)內(nèi)源性5-HT傳入則顯著降低大鼠的運(yùn)動能力。這些結(jié)果說明，5-HT或5-HT能傳入可以通過調(diào)節(jié)小腦核團(tuán)神經(jīng)元環(huán)路的活動來增強(qiáng)大鼠的運(yùn)動能力，在這一過程中5-HT1B受體發(fā)揮了重要的作用。因此，可以推測小腦5-HT能神經(jīng)傳入可以通過對小腦頂核神經(jīng)元環(huán)路的調(diào)節(jié)，影響小腦的最終輸出，從而實(shí)現(xiàn)對小腦介導(dǎo)的運(yùn)動平衡和協(xié)調(diào)能力的調(diào)控。

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趙明1△，崔曉雪2，于淼2，王伊林2，龍杰2，趙強(qiáng)1

(1．內(nèi)蒙古民族大學(xué)第一臨床醫(yī)院，2．內(nèi)蒙古民族大學(xué)，通遼028000)

【摘要】目的:研究阿霉素?fù)p傷心肌細(xì)胞miRNA378與網(wǎng)腔鈣結(jié)合蛋白(calumenin)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)性。方法:原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞分為6組:對照組、阿霉素組、miRNA378過表達(dá)對照組、miRNA378過表達(dá)組、miRNA378沉默對照組、miRNA378沉默組，采用免疫組化法檢測細(xì)胞α-SMA蛋白;慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染心室肌細(xì)胞，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測各組心肌細(xì)胞miRNA378、calumenin及葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)mRNA表達(dá)。結(jié)果:與阿霉素組相比較，miRNA378過表達(dá)組心肌細(xì)胞calumenin mRNA表達(dá)增加(P＜0．01)，而GRP78 mRNA表達(dá)減少(P＜0．01);與阿霉素組相比較，miRNA378沉默組calumenin及GRP78 mRNA表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:阿霉素?fù)p傷乳鼠心肌細(xì)胞是通過減少calumenin蛋白表達(dá)進(jìn)而引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，該作用通過上調(diào)miRNA378得到緩解。

【關(guān)鍵詞】阿霉素;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激;miRNA378;網(wǎng)腔鈣結(jié)合蛋白;乳鼠

The effects of 5-HT1Breceptor subtypes on motor behaviors mediated by cerebellar fastigial nucleus

GAO Wei1△，WANG Nan2，QIAO Hu2
(1．Department of Physical Education，Xi＇an University of Technology，Xi＇an 710048; 2．Department of Physiology and Pathophysiology，Xi＇an Jiaotong University School of Medicine，Xi＇an 710061，China)

Objective:To investigate the effects of the serotonergic nervous system on motor behaviors mediated by cerebellar fastigial nucleus(FN)．Methods:In this experiment，the main methods are whole-cell patch clamp recording and Rota-rod test．Results:We found that the excitatory synaptic transmission was enhanced in the cerebella FN after blocking 5-hydroxytryptamine，(5-HT) receptor．Microinjection of5-HT into FNs remarkably promoted motor performances on Rota-rod，which could be reversed by microinjection of 5-HT receptor antagonist SB224289．Conclusion:These results suggest that the 5-HT can suppress cerebellar FN excitatory synaptic transmission via 5-HT1Breceptors，thereby modulate the activity of cerebellar nuclear neurons circuitry，and subsequently influence the cerebellum-mediated ongoing motor balance and coordination．

5-HT;5-HT1Breceptor;fastigial nucleus(FN);excitatory post-synaptic currents;rat;patch clamp

Q429【

】A【文章編號】1000-6834(2016)06-550-05

10．13459/j．cnki．cjap．2016．06．014

R331．3;R332【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

1000-6834(2016)06-555-04

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30900544)

2016-01-04

2016-05-26

△【通訊作者】Tel:029-82312959;E-mail:59073939@qq．com

【DOI】10．13459/j．cnki．cjap．2016．06．015