崔松松，白莉敏，周可金，孫樂(lè)妮，曹媛媛，唐欣昀

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) a 生命科學(xué)學(xué)院，b 農(nóng)學(xué)院，安徽 合肥 230036)

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油菜親和性根際菌株的篩選及其促生效果

崔松松a，白莉敏b，周可金b，孫樂(lè)妮a，曹媛媛a，唐欣昀a

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) a 生命科學(xué)學(xué)院，b 農(nóng)學(xué)院，安徽 合肥 230036)

[摘要]【目的】 從油菜根際土壤中篩選油菜親和性根際菌株，以期獲得油菜專用優(yōu)良特異性根際促生菌?！痉椒ā?采用常規(guī)稀釋平板法從油菜根際篩選油菜根際細(xì)菌，提取油菜凝集素進(jìn)行復(fù)篩，獲得油菜親和性根際細(xì)菌，測(cè)定復(fù)篩菌株的產(chǎn)鐵載體、吲哚乙酸(IAA)能力，以及1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC)脫氨酶和溶磷活性，采用盆栽試驗(yàn)評(píng)價(jià)菌株對(duì)油菜的促生效果?！窘Y(jié)果】 經(jīng)過(guò)復(fù)篩獲得油菜親和性根際細(xì)菌32株，其中30株菌株具有產(chǎn)鐵載體能力，16株菌株的產(chǎn)鐵載體能力達(dá)到5+水平；29株菌株具有溶磷活性，7株菌株產(chǎn)量達(dá)到100.00 μg/mL；16株菌株能產(chǎn)IAA，菌株P(guān)17的產(chǎn)量最高，達(dá)到30.48 mg/L；7株菌株具有ACC脫氨酶活性。盆栽試驗(yàn)表明，有25株菌株具有不同程度的促生作用，N10和K6促生作用顯著，22株菌株的促生作用達(dá)到施全肥水平?！窘Y(jié)論】 采用凝集素作為篩選工具可以快速獲得大量與油菜具有特異親和性的PGPR菌株，菌株N10和K6作為油菜特異性PGPR具有很大的應(yīng)用潛力。

[關(guān)鍵詞]油菜；植物根際促生菌；親和性菌株；促生效果

在植物根際存在著一些微生物，這些微生物生活在土壤中，具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)，分解土壤中難溶性礦質(zhì)元素，增加作物產(chǎn)量的作用，這類微生物被統(tǒng)稱為植物根際促生菌(plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR)[1]。微生物肥料是指一類由一種或多種有益微生物活細(xì)胞制備而成，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，能夠獲得特定的肥料效應(yīng)的微生物制劑[2]。微生物肥料能夠提供或活化氮、磷、鉀等多種植物營(yíng)養(yǎng)元素，增加土壤肥力,刺激并調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)，同時(shí)也能夠抑制土壤環(huán)境中的病原菌[3-4]。植物凝集素是植物與微生物之間相互識(shí)別的介質(zhì)，能夠與微生物合成的一些多糖特異性結(jié)合，因此可作為篩選高效植物根際細(xì)菌的工具[5]。采用凝集素作為工具，篩選與作物具有特異親和關(guān)系的高效PGPR菌株的研究已有報(bào)道[6]。但由于生產(chǎn)上使用的菌株與目標(biāo)作物之間的特異親和關(guān)系缺少試驗(yàn)和理論依據(jù)，微生物肥料的應(yīng)用效果存在波動(dòng)情況。

油菜是我國(guó)的主要油料作物。Lifshitz[7]分離獲得了促進(jìn)油菜生長(zhǎng)的低溫細(xì)菌。江木蘭等[8]研究了油菜內(nèi)生菌的生防作用。但目前有關(guān)油菜特異性根際PGPR菌株及其應(yīng)用的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究從油菜根際土壤中篩選分離根際微生物，采用凝集素的特異性結(jié)合復(fù)篩對(duì)油菜具有特異親和性的PGPR菌株[9]，比較這些促生菌的促生生理特性，并采用盆栽試驗(yàn)評(píng)價(jià)其促生效果，以期獲得油菜專用優(yōu)良特異性PGPR菌株。

1材料與方法

1.1材料

油菜(BrassiacampestrisL)“農(nóng)大8號(hào)”種子由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院提供。

土壤為黃褐土：總氮1.11 g/kg，有機(jī)質(zhì)21.33 g/kg，有效磷(P2O5) 31.5 mg/kg,速效鉀(K2O) 154 mg/kg。

培養(yǎng)基：固氮細(xì)菌培養(yǎng)基、溶磷細(xì)菌培養(yǎng)基、解鉀細(xì)菌培養(yǎng)基、高氏一號(hào)培養(yǎng)基等[10]。

主要儀器：SB-JC-IA型超凈工作臺(tái)、202-3型TU-1800SPC分光光度計(jì)、HC-2518R高速冷凍離心機(jī)、DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱等。

1.2方法

1.2.1菌株的篩選參考文獻(xiàn)[11]的方法，采用常規(guī)稀釋平板法將各菌株稀釋液涂布于溶磷、解鉀、固氮和高氏一號(hào)培養(yǎng)基上，分別篩選具有溶磷、解鉀、固氮活性的菌株和鏈霉菌菌株。

1.2.2油菜凝集素的提取與菌株復(fù)篩取20 g油菜種子，用液氮研磨，去殼留種胚，繼續(xù)液氮下研磨至粉碎，用100 mL石油醚過(guò)夜脫脂。棄去石油醚，加100 mL的Tris提取液[12](pH 7.2，0.01 mol/L Tris-HCl，0.14 mol/L NaCl)過(guò)夜浸提，8 000 r/min離心20 min，保留上清液，參考文獻(xiàn)[9]的方法，采用提取的油菜凝集素對(duì)分離得到的菌株進(jìn)行復(fù)篩。

1.2.3菌株生理活性的測(cè)定采用文獻(xiàn)[13]的方法測(cè)定各菌株ACC脫氨酶活性；參考 Salkowski’s 比色法[14]測(cè)定菌株產(chǎn)吲哚乙酸(IAA)的能力；采用鉬藍(lán)比色法[15]測(cè)定菌株的溶磷能力；采用CAS檢測(cè)法[16]測(cè)定各菌株的產(chǎn)鐵載體能力(A/Ar)，根據(jù)A/Ar的比值大小判定菌株產(chǎn)鐵載體的能力大小，比值越小說(shuō)明菌株產(chǎn)鐵載體能力越強(qiáng)。

1.2.4盆栽試驗(yàn)將黃褐土于自然環(huán)境下風(fēng)干粉碎，裝盆，每盆3 kg，各營(yíng)養(yǎng)成分的添加量分別為：尿素80 mg/kg，磷酸氫二銨44.7 mg/kg，氯化鉀66.7 mg/kg，加入適量水溶解后拌入土壤，使土壤含水量達(dá)到20%。盆栽試驗(yàn)設(shè)置4組處理，A組測(cè)定鏈霉菌菌株促生效果，施全量營(yíng)養(yǎng)成分；B組測(cè)定固氮類菌株促生效果，磷、鉀施全量，氮減半；C組測(cè)定溶磷類菌株促生效果，氮、鉀施全量，磷減半；D組測(cè)定解鉀類菌株促生效果，氮、磷施全量，鉀減半。種植時(shí)每盆3穴，每穴放入適量種子，分別取1 mL菌懸液(108CFU/mL)接種到種子上；種子萌發(fā)長(zhǎng)出真葉后每穴定苗2株。定期澆水，使土壤保持濕潤(rùn)。各處理組中以不施菌液為對(duì)照，分別命名為CK1、CK2、CK3和CK4。待油菜長(zhǎng)至50 d時(shí)收獲油菜地上部分，烘干至恒質(zhì)量，測(cè)其干質(zhì)量[17]。

1.3數(shù)據(jù)處理

2結(jié)果與分析

2.1油菜根際細(xì)菌篩選與復(fù)篩

采用常規(guī)稀釋平板法從油菜根際中篩選到51株油菜根際細(xì)菌，其中13株菌株具有固氮活性，14株菌株具有溶磷活性，11株菌株具有解鉀活性，13株鏈霉菌菌株。

提取油菜種子得到的上清液即為粗提液，采用Bradford法測(cè)得其蛋白質(zhì)含量為6.575 mg/g。采用提取的油菜凝集素對(duì)51株菌株進(jìn)行復(fù)篩，能夠與油菜凝集素發(fā)生凝集反應(yīng)的菌株即為陽(yáng)性菌株，表明其對(duì)油菜具有特異親和性，其中菌株P(guān)13與凝集素的凝集反應(yīng)見(jiàn)圖1。復(fù)篩后獲得油菜親和性菌株32株，其中8株具有固氮活性，9株具有溶磷活性，4株具有解鉀活性，11株鏈霉菌菌株。

圖 1菌株P(guān)13與油菜凝集素的凝集反應(yīng)(×1 250)

A.菌株P(guān)13與Tris提取液;B.菌株P(guān)13與油菜凝集素

Fig.1Agglutination reaction of strain P13 with rape lectin(×1 250)

A.Strain P13 and the extraction agent of Tris;B.Agglutination reaction of strain P13 with rape lectin

2.2油菜親和性菌株的促生特性

32株油菜根際細(xì)菌生理活性如表1所示。由表1可以看出，32株菌株中有30株菌株具有產(chǎn)鐵載體能力，其中16株菌株的產(chǎn)鐵載體能力達(dá)到5+水平，占50%；16株菌株產(chǎn)IAA，產(chǎn)量在0.78～30.48 mg/L，菌株P(guān)17產(chǎn)量最高，達(dá)到30.48 mg/L；29株菌株具有溶磷能力，溶磷量在0.45～133.95 μg/mL，有7株達(dá)到100.00 μg/mL以上，其中菌株P(guān)2溶磷能力最強(qiáng)，達(dá)到133.95 μg/mL。7株菌株可以產(chǎn)生ACC脫氨酶；菌株P(guān)16的ACC脫氨酶活性最高，達(dá)到 2.149 0 U/mg。

2.3油菜親和性菌株的盆栽促生效果

采用盆栽試驗(yàn)觀察32株親和性菌株對(duì)油菜地上部分生物量的影響，結(jié)果見(jiàn)表2。表2結(jié)果顯示，有25株菌株對(duì)油菜有促生效果，其中13株菌株地上部分干質(zhì)量較對(duì)照組增加均超過(guò)10%，22株菌株對(duì)油菜的促生效果達(dá)到全施肥水平。

A組試驗(yàn)觀察11株鏈霉菌菌株對(duì)油菜促生效果的影響，發(fā)現(xiàn)5株菌株對(duì)油菜的促生效果達(dá)10%以上，雖然未達(dá)到顯著水平，但說(shuō)明采用凝集素篩選獲得的菌株對(duì)油菜具有一定的促生效果。

B組處理測(cè)定具有固氮活性菌株的促生效果，結(jié)果(表2)表明，菌株N10處理的油菜生物量比對(duì)照CK2增加20.06%，差異顯著。整個(gè)B組處理(50% N素)油菜地上部分干質(zhì)量都比施全量營(yíng)養(yǎng)成分處理的CK1干質(zhì)量下降，說(shuō)明土壤施氮量不夠，減量50%導(dǎo)致土壤氮素缺乏。

C組測(cè)定具有溶磷活性菌株的促生效果，結(jié)果(表2)表明，P8和P17處理油菜地上部分干質(zhì)量增加10%以上(P>0.05)，有一定的促生效果。C組全部處理的油菜地上部分干質(zhì)量都比施全肥的油菜地上部分干質(zhì)量不同程度增加，說(shuō)明土壤中有效磷水平較高(31.5 mg/kg)，不用補(bǔ)充磷素；也說(shuō)明這些供試菌株促進(jìn)了油菜生長(zhǎng)。

D組測(cè)定具有解鉀活性菌株的促生效果，結(jié)果(表2)表明，4株供試菌株都有一定的促生長(zhǎng)效應(yīng)，其中K6處理的油菜地上部分生物量比對(duì)照CK4增加27.12%, 差異顯著。4株解鉀細(xì)菌處理油菜地上部分的干質(zhì)量比CK1(施全量營(yíng)養(yǎng)成分)都有一定增加，說(shuō)明具有解鉀活性的菌株促生效果較好。

對(duì)福建省某一級(jí)達(dá)標(biāo)校高二年級(jí)四個(gè)教學(xué)平行班學(xué)生施以“高中學(xué)生‘基因’概念表征水平的問(wèn)卷調(diào)查”、“高中學(xué)生‘有氧呼吸’概念表征水平的問(wèn)卷調(diào)查”兩份概念水平問(wèn)卷，調(diào)查學(xué)生對(duì)創(chuàng)設(shè)型概念的表征水平。

表 1　油菜親和性菌株的生理活性

注：*判斷鐵載體產(chǎn)量標(biāo)準(zhǔn) (A/Ar值)：0～0.2，5+；0.2～0.4,4+；0.4～0.6,3+；0.6～0.8,2+；0.8～1.0,+?！?”表示不具有相應(yīng)促生活性。

Note:“*” The evaluation criteria of siderophore production(A/Ar)：0-0.2，5+；0.2-0.4，4+；0.4-0.6，3+；0.6-0.8，2+；0.8-1.0，+.“-” means no growth promotion activity.

表 2　油菜親和性菌株盆栽試驗(yàn)的地上部分干質(zhì)量

續(xù)表 2　Continued table 2

注：*代表在0.05水平上差異顯著。

Note:“*” indicates significant difference at 0.05 level.

3討論

凝集素是一類與特定單糖可逆結(jié)合的蛋白質(zhì)，不同植物凝集素的糖結(jié)合專一性不同，油菜凝集素可與半乳糖專一結(jié)合[18]，分布于植物根莖葉，但主要存在于油菜種子中。本研究中油菜凝集素粗提液中蛋白質(zhì)含量為6.575 mg/g，而唐超等[19]用不同提取劑提取黑豆凝集素，最低提取量為59 mg/g，袁燕等[20]提取蒜頭果凝集素的提取量為12.32 mg/g。這可能是由于油菜種子蛋白質(zhì)含量偏低，含油量較大，干擾蛋白質(zhì)的提取，導(dǎo)致本試驗(yàn)提取的蛋白質(zhì)含量偏低。

近年來(lái)已有研究人員將植物凝集素應(yīng)用到目標(biāo)作物PGPR的篩選中，并獲得了高效的植物特異性親和促生菌。常惠萍等[21]用麥胚凝集素成功復(fù)篩出與麥胚凝集素具有特異性親和作用的菌株。祝凌云等[6]用水稻凝集素篩選出與水稻凝集素具有特異性親和作用的菌株。本研究從油菜根際中篩選獲得油菜根際微生物51株，以油菜凝集素為復(fù)篩工具，從油菜根際菌株中篩選獲得32株能與油菜凝集素特異性結(jié)合的菌株，初步結(jié)果說(shuō)明油菜根際微生物約有63%與油菜凝集素具有親和性。在32株油菜特異親和性根際細(xì)菌中，93.75%的菌株能產(chǎn)鐵載體，90.63%的菌株具有溶磷活性，部分菌株能產(chǎn)IAA和具有ACC脫氨酶活性。促生試驗(yàn)結(jié)果表明，有78.13%菌株具有不同程度的促生作用，能夠促進(jìn)油菜生物量的增加，N10和K6菌株顯著促進(jìn)油菜生長(zhǎng)，部分菌株的促生長(zhǎng)作用超過(guò)了全施肥水平。本研究結(jié)果表明，采用凝集素作為篩選工具可以快速獲得大量與目標(biāo)作物具有特異親和性的PGPR菌株[22]，據(jù)此可以高效獲得對(duì)目標(biāo)作物具有專一性的特性優(yōu)良的PGPR菌株，避免篩選的盲目性，提高試驗(yàn)效率。

[參考文獻(xiàn)]

[1]劉靜洋,崔松松,唐欣昀,等.棉花根際細(xì)菌的生理活性和促生效果 [J].中國(guó)土壤與肥料,2013(6):88-92.

Liu J Y,Cui S S,Tang X Y,et al.The physiological acyivities and growth-promoting effects of cotton PGPR [J].Soil and Fertilizer Sciences in China,2013(6):88-92.(in Chinese)

[2]李俊,姜昕,李力,等.微生物肥料的發(fā)展與土壤生物肥力的維持 [J].中國(guó)土壤與肥料,2006(4):1-5.

Li J,Jiang X,Li L,et al.Developing of microbial fertilizer and maintaining of soil biological fertility [J].Soil and Fertilizer Sciences in China,2006(4):1-5.(in Chinese)

[3]陳廷偉,葛誠(chéng).我國(guó)微生物肥料發(fā)展趨向 [J].土壤肥料,1995(6):16-20.

Chen T W,Ge C.The development trends of microbial fertilizer in China [J].Soils and Fertilizers,1995(6):16-20.(in Chinese)

[4]Haselwandter K,Winkelmann G.Siderophores of symbiotic fu-ngi [J].Microbial Siderophores,2007,12:91-103.

[5]Afonso-Cardoso S R,Silva C V,Ferreira M S,et al.Effect of theSynadeniumcarinatumletex (ScLL) on Leishmania (Leishmania) amazonensis infection in murine macrophages [J].Experimental Parasitology,2011,128(1):61-67.

[6]祝凌云,馬忠友,唐欣昀,等.水稻根際高效解磷菌菌株的篩選 [J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2008,14(15):43-44.

Zhu L Y,Ma Z Y,Tang X Y,et al.Selection of effect strains of phosphorus-solubilizing bacteria from rice rhizosphere [J].Anhui Agricultural Science Bulletin,2008,14(15):43-44.(in Chinese)

[7]Lifshitz R.Growth promotion of canola (rapeseed) seedings by a strain ofPseudomonasputidaunder gnotobiotic conditions [J].Can J Microbiol,1987,33:390-395.

[8]江木蘭,趙瑞,胡小加,等.油菜內(nèi)生生防菌BY-2在油菜體內(nèi)的定殖與對(duì)油菜菌核病的防治作用 [J].植物病理學(xué)報(bào),2007,37(2):192-196.

Jiang M L,Zhao R,Hu X J,et al.Colonization of antifungal endobacterium BY-2 in oil crop rape and its control effect on disease caused bySclerotiniasclerotiorum[J].Acta Phytopathologica Sinica,2007,37(2):192-196.(in Chinese)

[9]劉祥亮,周曉雷,唐欣昀,等.溫莪術(shù)根際親和性高效促生菌的篩選和初步鑒定 [J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào),2012,14(4):121-127.

Liu X L,Zhou X L,Tang X Y,et al.Screening and preliminary identification of effective and affinity strains of growth-promoting rhizobacteria fromCurcumawenyujinroot [J].Journal of Agricultural Science and Technology,2012,14(4):121-127.(in Chinese)

[10]夏覓真,馬忠友,唐欣昀,等.棉花根際固氮菌、解磷菌及解鉀菌的相互作用 [J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2010,22(2):102-105.

Xia M Z,Ma Z Y,Tang X Y,et al.Interactions between aN-fixationbacteriun,aPhosphobacteriumand a K-releasing bacterium of cotton rhizosphere [J].Chinese Journal of Microecology,2010,22(2):102-105.(in Chinese)

[11]蔣寶貴,趙斌.解磷解鉀自生固氮菌的分離篩選及鑒定 [J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,24(1):43-48.

Jiang B G,Zhao B.Screening and identification of the bacterium which have high efficiency on resolvingPhosphorusandPotassiumand in nitrogen fixation [J].Journal of Huazhong Agricultural University,2005,24(1):43-48.(in Chinese)

[12]李鋒,田立娟,杜林方,等.三種菜豆凝集素的分離純化及其與黑皮扁豆凝集素抗血清的免疫交叉反應(yīng) [J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā),2006,18(5):799-802.

Li F,Tian L J,Du L F,et al.Purification of three species ofPhaseolusL.and their immune cross reaction with antiserum raised against dolichos purpureus lectin [J].Natural Product Research and Development,2006,18(5):799-802.(in Chinese)

[13]Penrose D M,Glick B R.Methods for isolating and characterizing ACC deaminase-containing plant growth-promoting rhizobacteria [J].Physiologia Plantarum,2003,118(1):10-15.

[14]Glickmann E,Dessaux Y.A critical examination of the specificity of the salkowski reagent for indolic compounds produced by phytopathogenic bacteria [J].Applied and Environmental Microbiology,1995,61(2):793-796.

[15]Zhang J,Liu J Y,Meng L Y,et al.Isolation and characterization of plant growth-promoting rhizobacteria from wheat roots by wheat germ agglutinin labeled with fluorescein isothiocyanate [J].The Journal of Microbiology,2012,50(2):191-198.

[16]王平,董飈.小麥根圈細(xì)菌鐵載體的檢測(cè) [J].微生物學(xué)通報(bào),1994,21(6):323-326.

Wang P,Dong B.Detection and determination of the siderophores produced by wheat rhizobacteria [J].Microbiology,1994,21(6):323-326.(in Chinese)

[17]劉曉東,王補(bǔ)全,李偉.玉米根際促生菌的篩選及其對(duì)玉米生長(zhǎng)發(fā)育的影響 [J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(10):5043-5045.

Liu X D,Wang B Q,Li W.Selection oh the rhizosphere growth-promoting bacterium of maize and its impact on maize growth and development [J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2010,38(10):5043-5045.(in Chinese)

[18]熊維全,萬(wàn)群.植物凝集素及其在生物固氮中的作用 [J].熱帶農(nóng)業(yè)科技,2005,28(2):21-26.

Xiong W Q,Wan Q.The lectins of plant and its role in biological nitrogen fixation [J].Tropical Agricultural Science & Technology,2005,28(2):21-26.(in Chinese)

[19]唐超,王清吉.黑豆凝集素的提取及血凝效果研究 [J]. 西南師范大學(xué)學(xué)報(bào),2012,37(2):82-87.

Tang C,Wang Q J.On extraction of lectin from black soya been and its effect of cruor [J].Journal of Southwest China Normal University,2012,37(2):82-87.(in Chinese)

[20]袁燕,袁再美,岑曉江,等.蒜頭果凝集素的提取及血凝效果研究 [J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2011,27(21):144-146.

Yuan Y,Yuan Z M,Cen X J,et al.Study on extracting and cruor effect ofMalaniaoleiferalectin [J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2011,27(21):144-146.(in Chinese)

[21]?；燮?馬忠友,唐欣昀,等.麥胚凝集素的純化及其對(duì)小麥根際促生細(xì)菌的親和作用 [J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2009,24(11):26-29.

Chang H P,Ma Z Y,Tang X Y,et al.Purification of wheat germ agglutinin and its affinity with growth-promoting bacteria from wheat rhizosphere [J].Journal of the Chinese Cereals and Oils Association,2009,24(11):26-29.(in Chinese)

[22]姚麗娟,唐欣昀,?；燮?等.棉花根際促生細(xì)菌的研究進(jìn)展 [J].中國(guó)土壤與肥料,2009(6)：8-12.

Yao L J,Tang X Y,Chang H P,et al.Research advances in cotton growth-promoting rhizobacteria [J].Soil and Fertilizer Sciences in China,2009(6)：8-12.(in Chinese)

Screening of affinity rhizosphere bacteria and its growth promotion effect on rape

CUI Song-songa,BAI Li-minb,ZHOU Ke-jinb,SUN Le-nia,CAO Yuan-yuana,TANG Xin-yuna

(aSchoolofLifeScience,bSchoolofAgronomy,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei,Anhui230036,China)

Abstract:【Objective】 Affinity bacteria strains were isolated from rape rhizosphere for obtaining specific rhizobacteria to promote plant growth.【Method】 Rhizosphere bacteria were isolated from the rhizosphere of rape using serial dilution method.Rape lectin was prepared and used to rescreen specific affinity strains,which reacted positively with rape lectin.Then their abilities of producing siderophore and indole acetic acid (IAA) as well as activities of amino cyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) deaminase and phosphate dissolution were determined.At last,rape seedlings were cultivated in pots with obtained strains to evaluate their growth promoting effects.【Result】 A total of 32 strains with specific affinity to rape were obtained,among which 30 had siderophores production ability and 16 reached 5+ level.29 strains had phosphate solubilizing activity and 7 had yields over 100.00 μg/mL.16 strains produced IAA and P17 had the highest yield of 30.48 mg/L.7 strains had ACC deaminase activity.Pot experiment showed that 25 strains had different growth promoting effects,among which strains N10 and K6 possessed significant promotion effects and growth promotion by 22 strains reached the same level as applying full nutrition fertilizers.【Conclusion】 Specific affinity plant growth-promoting rhizobacteria strains could be easily screened using lectin as tool.Strain N10 and strain K6 showed excellent application potential.

Key words:rape;plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR);affinity strain;growth promoting effect

[文章編號(hào)]1671-9387(2016)01-0091-06

[中圖分類號(hào)]S565.4

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[通信作者]周可金(1965-)，男，安徽無(wú)為人，教授，博士，主要從事油菜栽培生理學(xué)研究。 E-mail:zhoukejin@163.com

[作者簡(jiǎn)介]崔松松(1990-)，女，安徽淮北人，碩士，主要從事油菜根際促生菌的篩選及其促生作用研究。

[基金項(xiàng)目]國(guó)際植物營(yíng)養(yǎng)研究所項(xiàng)目(IPNI-Anhui-19)；2013年安徽省自主創(chuàng)新科技專項(xiàng)“高油酸油菜新品種選育與生產(chǎn)加工關(guān)鍵技術(shù)研究及產(chǎn)業(yè)化”；安徽省油菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(AHCYTX-04)；安徽省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(1208085QC62)；安徽省高校青年基金重點(diǎn)項(xiàng)目(2013SQRL015ZD)

[收稿日期]2014-02-24

DOI：網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間:2015-12-0214:2510.13207/j.cnki.jnwafu.2016.01.014

網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20151202.1425.028.html

E-mail:15905695243@163.com

唐欣昀(1951-)，男，安徽巢湖人，教授，學(xué)士，博士生導(dǎo)師，主要從事微生物生態(tài)學(xué)研究。 E-mail:txyah@126.com