張華勇

針對沙門氏菌引起的食品安全問題，良潤生物為業(yè)界帶來了前沿的技術(shù)支持，和優(yōu)良的解決方案，為此，《食品安全導(dǎo)刊》記者采訪了良潤生物科技有限公司市場總監(jiān)陶文靖女士。

記者：沙門氏菌的特點和危害有什么？主要存在于什么食品和環(huán)境中？

陶文靖：據(jù)美國農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)經(jīng)濟研究部門的最新數(shù)據(jù)統(tǒng)計，沙門氏菌每年在美國導(dǎo)致的醫(yī)療花費達到37億美元，這個數(shù)據(jù)將沙門氏菌排在了美國食源性疾病花費最高的15大致病菌之首。另外，一系列沙門氏菌引起的食物中毒事件也表明，沙門氏菌早已成為全球最常見的食源性致病菌之一。

沙門氏菌作為一種致病菌，是伴隨人類一生的敵人，其病原體屬腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌，已發(fā)現(xiàn)的有近1000種（或菌株）。按其抗原成分，可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。其中與人體疾病有關(guān)的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引起人類的疾病外，大多數(shù)僅能引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病，但有時也可通過污染人類的食物而引起食物中毒。沙門氏菌主要污染肉及肉制品、蛋制品、奶制品等，雞是沙門氏菌的天然宿主，污染了沙門氏菌的雞肉制品是引起人沙門氏菌感染的主要途徑。市場上的零售雞肉，沙門氏菌陽性檢出率高達50% 。交叉污染是沙門氏菌污染食品的主要途徑，屠宰加工過程中肉雞胴體的交叉污染是導(dǎo)致污染擴大的原因，廚房內(nèi)的交叉污染也是導(dǎo)致沙門氏菌食物中毒的主因之一。

記者：沙門氏菌快速檢測方法有哪些？怎樣評價一個檢測系統(tǒng)？

陶文靖：傳統(tǒng)沙門氏菌檢測需要前增菌、增菌、平板分離、生化鑒定、血清型鑒定5大步驟，需要3～7天的時間，檢測時間較長、效率低，市場對快速檢測技術(shù)的需求不斷加大。目前沙門氏菌快速檢測技術(shù)主要分為3大塊：培養(yǎng)改良法、免疫學(xué)方法、分子學(xué)方法。免疫學(xué)方法優(yōu)勢是特異性高，操作時間短、檢測結(jié)果可靠，適合批量檢測和自動化檢測（VIDAS），略勢為高質(zhì)量抗體獲得困難、產(chǎn)品開發(fā)周期長、檢測靈敏度受靶標(biāo)蛋白的影響大。分子學(xué)方法優(yōu)勢是靶標(biāo)明確，操作時間短、檢測結(jié)果可靠，核酸提取效率和系統(tǒng)穩(wěn)定性是一大挑戰(zhàn)。從沙門氏菌的檢測過程看，一個好的檢測系統(tǒng)應(yīng)該包括一個好的增菌培養(yǎng)方法和一個好的檢測方法，二者要綜合起來一起評價。一個好的增菌培養(yǎng)方法要滿足以下條件：沙門氏菌的復(fù)蘇能力要強，生長速度要快，選擇性要好，產(chǎn)量要高；而一個好的檢測方法需要具備速度快、準(zhǔn)確度高等特點?！?/p>

記者：哪些技術(shù)手段可以提高沙門氏菌增菌效果？

陶文靖：增菌是檢測的前提，增菌效果如何，關(guān)系到靈敏度，對檢測至關(guān)重要。國標(biāo)方法，沙門氏菌增菌需要2天的時間，增菌時間長，主要是菌體的復(fù)蘇、生長和選擇性的問題。目前主要的增菌富集技術(shù)有：

（1）改良培養(yǎng)基成分和增菌方式，通過改良培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)溫度，讓菌體可以快速復(fù)式、生長，提高選擇性，可以在24小時之內(nèi)完成兩步增菌。

（2）免疫磁珠富集，磁珠上的抗體與相應(yīng)的目標(biāo)致病菌的抗原物質(zhì)結(jié)合后，則形成抗原-抗體-磁珠免疫復(fù)合物，使復(fù)合物與其他物質(zhì)分離，而達到分離、濃縮、純化目標(biāo)致病菌的目的，3小時左右即可完成目標(biāo)致病菌的富集和抓取。

（3）噬菌體技術(shù)，利用噬菌體的專一性，通過噬菌體裂解殺死干擾菌，從而是目標(biāo)菌株實現(xiàn)快速的增殖。例如，在沙門氏菌的增菌過程中，通過噬菌體特異性的裂解干擾的大腸桿菌，從而實現(xiàn)沙門氏菌的快速、高濃度增殖。

（4）膜過濾和層析技術(shù)，過濾法富集微生物是將適當(dāng)孔徑的濾膜放入濾器，過濾樣品。由于濾膜的作用而將微生物滯留在膜表面，使微生物與樣品溶液分開，達到微生物富集目的。

記者：良潤生物為沙門氏菌檢測提供了什么樣的解決方案？MicroFast沙門氏菌快速檢測系統(tǒng)的原理和特點是什么？相比傳統(tǒng)方法有哪些優(yōu)勢？

陶文靖：Micro Fast?沙門氏菌快速檢測系統(tǒng)由沙門氏菌快速增菌培養(yǎng)基和金標(biāo)檢測卡組成，可實現(xiàn)樣品中沙門氏菌最短24小時檢測。在沙門氏菌增菌的過程中運用的技術(shù)主要是抑制競爭菌的生長，從而達到沙門氏菌的快速增殖，在低菌及高菌環(huán)境都能快速有效的實現(xiàn)沙門氏菌快速增菌。快速檢測卡應(yīng)用“雙抗體夾心法”的原理，沙門氏菌和金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合及預(yù)包被于NC 膜T 線位置的特異性多克隆抗體結(jié)合，金顆粒的聚集而顯示明顯的紅線。通過肉眼直接觀察是否出現(xiàn)T 線，判斷樣品中是否含有沙門氏菌。與傳統(tǒng)方法相比，這套系統(tǒng)的主要優(yōu)勢在于改良了沙門氏菌增菌方法，讓沙門氏菌可以在24小時內(nèi)完成兩步增菌，比傳統(tǒng)方法快一倍。搭配了金標(biāo)快速檢測卡，可以在5～8分鐘內(nèi)完成沙門氏菌的定性判斷，大大節(jié)約了檢測時間，提高了檢測效率。

記者：良潤生物未來的定位是什么？技術(shù)平臺今后有何規(guī)劃？

陶文靖：良潤生物定位于專注從事微生物快速檢測技術(shù)開發(fā)，這個是持久不變的。我們專注于一個領(lǐng)域、專注于一個方向，讓我們可以更加專業(yè)的為客戶解決問題。技術(shù)平臺方面，目前我們有即用培養(yǎng)技術(shù)平臺、致病菌快速增菌技術(shù)平臺、免疫技術(shù)平臺，產(chǎn)品涵蓋了菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌酵母等常規(guī)菌，以及沙門氏菌、大腸O157、金黃色葡萄球菌、李斯特菌、阪崎腸桿菌常見致病菌。分子檢測平臺的搭建和致病菌增菌富集技術(shù)的開發(fā)是我們今年的重點工作，分子檢測平臺也是未來致病菌快速檢測的大趨勢，致病菌的增菌富集是決定檢測環(huán)節(jié)的重要環(huán)節(jié)，不管是免疫檢測還是核酸檢測，增菌富集都是至關(guān)重要的。我們致力于在培養(yǎng)平臺、免疫平臺、分子平臺上以及致病菌前處理方面給客戶提供最專業(yè)的解決方案。

記者：據(jù)說良潤生物將于4月7日發(fā)布新產(chǎn)品，可否透露一下新產(chǎn)品的一些情況？

陶文靖：新產(chǎn)品是由我們良潤生物和熱景生物共同研制開發(fā)的，新技術(shù)融入了新的富集技術(shù)和培養(yǎng)技術(shù)，打破了增菌和檢測的技術(shù)（前增菌——選擇性增菌——檢測），新技術(shù)先進行選擇性富集抓取，在進行培養(yǎng)，可定量和定性檢測。新產(chǎn)品將在4月7日的中國國際食品安全技術(shù)大會開幕式上進行發(fā)布，我們對新技術(shù)的市場很有信心。在此，還要感謝中國食源性微生物檢測技術(shù)戰(zhàn)略聯(lián)盟給我們提供了一個學(xué)習(xí)和搭建合作的平臺，讓我們可以和熱景生物在技術(shù)和市場上進行合作，共同為食源性致病菌的快速檢測技術(shù)的發(fā)展不斷努力，還要感謝《食品安全導(dǎo)刊》媒體平臺，把食品安全前沿技術(shù)推薦給業(yè)界、食監(jiān)部門、QA/QC及我們的客戶群體。