趙玉華 陳子雷 王玉濤 張樹秋

摘要：采用改進(jìn)的QuEChERS結(jié)合GC-MS/MS法建立了蔬菜中丁蟲腈的分析方法。結(jié)果表明，丁蟲腈在0.01～0.50 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，方法的定量限（LOQ）為0.01 mg/kg。在0.01、0.05、0.20 mg/kg 3個(gè)濃度加標(biāo)水平下，回收率為81.3%～93.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）不大于8.20%。該方法前處理簡(jiǎn)單，儀器背景干擾少，靈敏度高，適合于各類蔬菜樣品中丁蟲腈的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；QuEChERS；蔬菜

中圖分類號(hào)：S481+.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2016）07-0129-04

丁蟲腈（flufiprole），又名丁烯氟蟲腈，化學(xué)名稱為3-氰基-5-甲代烯丙基氨基-1-（2，6-二氯-4-三氟甲基苯基） -4-三氟甲基亞磺酰基吡唑，是在氟蟲腈的基礎(chǔ)上開發(fā)出的活性高、殺蟲譜廣且對(duì)人畜及水生生物安全的新型殺蟲劑[1～4]。

目前關(guān)于丁蟲腈的檢測(cè)方法尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)頒布。近幾年，有學(xué)者利用GC-ECD和GC-MS技術(shù)對(duì)蔬菜、稻谷等基質(zhì)中的丁蟲腈進(jìn)行了檢測(cè)，其中在2009年，曹維強(qiáng)等利用GC-MS檢測(cè)菠菜中的丁蟲腈，定量限為0.05 mg/kg[5]；2014年，田宏哲等利用GC-ECD檢測(cè)玉米中的丁蟲腈，定量限為0.01 mg/kg[6]。但以上兩種方法有其局限性，GC-MS法的靈敏度比較低，無(wú)法滿足美國(guó)、日本、歐盟等國(guó)家對(duì)相應(yīng)食品安全檢測(cè)的0.01 mg/kg殘留限量，即“一律標(biāo)準(zhǔn)”的技術(shù)要求；GC-ECD法的靈敏度雖然較高，但GC法抗干擾能力差，易出現(xiàn)假陽(yáng)性的缺點(diǎn)。另外，利用以上兩種方法前處理都比較繁瑣，不能夠完成對(duì)于大批量樣品的快速檢測(cè)工作，因此，一種簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、重復(fù)性好、定性定量準(zhǔn)確的方法亟待開發(fā)出來(lái)。

QuEChERS方法是Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged和Safe的首字母縮寫，是2003年由Anastassiades與Lehotay首次提出并予以報(bào)道，其技術(shù)核心是在樣品提取液中加入除水劑和凈化劑以除去多余的水分和雜質(zhì)，凈化液經(jīng)離心后直接進(jìn)行分析。該方法因其快速、簡(jiǎn)單、廉價(jià)、有效、可靠、安全，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于蔬菜和水果中的農(nóng)藥殘留分析[7～9]。

1材料與方法

1.1儀器、試劑與材料

Trace 1310型氣相色譜-TSQ 8000型三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國(guó)Thermo公司）；Sartorius 電子天平（千分之一，北京賽多利斯天平有限公司）；IKA T18 Basic均質(zhì)器（德國(guó) IKA 公司）；MS3基本型渦旋混合器（IKA，Germany）。

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自天津農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（質(zhì)量濃度均為100 μg/mL）。丙酮、甲苯（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），乙酸乙酯（分析純，天津市廣成化學(xué)試劑有限公司），乙酸鈉、氯化鈉（分析純，天津博迪化工股份有限公司）。

單標(biāo)儲(chǔ)備液的配制： 各取1 mL標(biāo)準(zhǔn)品置于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配成質(zhì)量濃度為10 mg/L的單標(biāo)儲(chǔ)備液，于-20℃冰箱中貯存?zhèn)溆谩?/p>

基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液： 用空白樣品基質(zhì)溶液配成不同濃度的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于制作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，不同種類蔬菜制得不同種類的基質(zhì)校正工作溶液?；|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。供試蔬菜： 黃瓜、芹菜和番茄，購(gòu)自濟(jì)南本地超市。

1.2樣品前處理

準(zhǔn)確稱取5.0 g氯化鈉和1.0 g乙酸鈉于100 mL離心管中，再稱取20.00 g（精確至0.01 g）均質(zhì)試樣，加入40 mL提取液（含1%甲苯的丙酮、乙酸乙酯同體積比混合溶液），勻漿機(jī)高速勻漿提取1 min，4 500 r/min離心5 min，取上清液約10 mL于d-SPE凈化管中，充分振蕩1 min后靜止30 min，靜置完成后，取適量上清液過(guò)濾膜于進(jìn)樣瓶中進(jìn)樣。

1.3GC-MS/MS分析

1.3.1GC條件色譜柱為TR-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm，美國(guó)Thermo公司）；柱溫采用程序升溫：初始溫度60℃（保持2 min），以15℃/min 升至150℃，再以6℃/min 升至280℃（保持10 min），共運(yùn)行39.67 min。載氣為高純氦氣（≥99.999%），恒流模式，流速1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度250℃；進(jìn)樣體積為1 μL；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；溶劑延遲：6.0 min。

1.3.2質(zhì)譜條件電離模式：EI模式，能量 70 eV；離子源溫度230℃；掃描方式：二級(jí)離子監(jiān)測(cè) （SRM） 模式；定量離子對(duì)為：403～238.77，碰撞電壓25 eV；定性離子對(duì)為：421～314.98，碰撞電壓20 eV。

2結(jié)果與分析

2.1QuEChERS方法的改進(jìn)

傳統(tǒng)的QuEChERS方法對(duì)于現(xiàn)在的農(nóng)殘快速檢測(cè)有兩點(diǎn)不足之處：（1）僅使用乙腈作為提取溶液，提取液必須經(jīng)過(guò)溶劑轉(zhuǎn)換而不能直接進(jìn)行氣相色譜或氣相色譜-質(zhì)譜分析，因此，使用乙腈作為提取液使前處理效率降低，不利于高通量快速檢測(cè)；（2）使用GCB吸附色素的同時(shí)也吸附了部分具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥，因此，包括丁蟲腈在內(nèi)的具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥回收率普遍偏低[7]。

針對(duì)以上兩個(gè)問(wèn)題，發(fā)明者對(duì)傳統(tǒng)的QuEChERS方法進(jìn)行了改進(jìn)，具體方法是：使用丙酮與乙酸乙酯同體積比混合溶液代替乙腈進(jìn)行提取，丙酮和乙酸乙酯都是氣相色譜或氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀可以接受的溶劑，因此，用該提取液可以不需溶劑轉(zhuǎn)換而直接進(jìn)行分析；另外，在提取液中加入1%的甲苯，甲苯作為一個(gè)洗脫劑可以防止GCB吸附具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥而不影響GCB對(duì)色素的吸附，既提高了農(nóng)殘回收率又不影響凈化效果。

2.2GC-MS/MS方法的建立

將單標(biāo)溶液進(jìn)行質(zhì)譜全掃描，確定丁蟲腈的保留時(shí)間為（20.52±0.05） min。然后從丁蟲腈的一級(jí)質(zhì)譜圖中選擇有代表性的母離子，在不同碰撞能量下對(duì)母離子進(jìn)行碰撞解離，選擇強(qiáng)度較大、靈敏度高的離子為子離子，其中一對(duì)離子對(duì)用于定量，一對(duì)離子對(duì)用于定性。

2.3定性分析

測(cè)得樣品溶液中未知組分的保留時(shí)間，分別與標(biāo)準(zhǔn)溶液在同一色譜柱上的保留時(shí)間相比較，如果樣品溶液中某組分的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液保留時(shí)間相差在±0.05 min內(nèi)，并且該峰同時(shí)具有定量離子對(duì)和定性離子對(duì)的，可認(rèn)定為該農(nóng)藥。

2.4定量結(jié)果計(jì)算

試樣中被測(cè)農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，單位mg/kg，按公式（1）計(jì)算。

ω=V×AAs×m×ρ（1）

式中，ρ為標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，mg/L；A為樣品溶液中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積；As為農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積；V為提取溶劑總體積，mL；m為試樣的質(zhì)量，g。

2.5線性關(guān)系與定量限

將“ 1.1”方法配制的 0.01、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/L 五種濃度基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液按照“1.3”所述GC-MS/MS 條件進(jìn)樣，圖1為丁蟲腈芹菜基質(zhì)GC-MS/MS二級(jí)掃描色譜圖，保留時(shí)間為20.52 min。以待測(cè)物定量離子的峰面積（y）對(duì)質(zhì)量濃度（x，mg/L）做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到丁蟲腈在三種蔬菜中含量的線性方程及相關(guān)系數(shù)。結(jié)果顯示，丁蟲腈在0.01～0.50 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其相關(guān)系數(shù)（r ）均大于0.95。

取濃度為0.01、0.05、0.20 mg/L的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照試驗(yàn)方法進(jìn)行提取、凈化、上機(jī)檢測(cè)。丁蟲腈的定量限（LOQ）為0.01 mg/kg，方法的靈敏度可滿足國(guó)際農(nóng)藥殘留的監(jiān)控要求。

2.6準(zhǔn)確度與精密度

選擇丁蟲腈陰性的黃瓜、芹菜和番茄樣品在低（0.01 mg/kg）、中（0.05 mg/kg）、高（0.20 mg/kg）3個(gè)加標(biāo)水平下進(jìn)行回收試驗(yàn)，每個(gè)濃度做6次平行，計(jì)算目標(biāo)農(nóng)藥的平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），以考察不同基質(zhì)中方法的準(zhǔn)確度及精密度。從表1數(shù)據(jù)可知，在3個(gè)加標(biāo)水平下丁蟲腈的平均回收率為81.3%～93.9%，RSD均不大于8.20%，說(shuō)明該方法得到的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，回收率與精密度均符合農(nóng)藥殘留的分析要求。

3小結(jié)

本研究將改進(jìn)的QuEChERS方法與 GC-MS/MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，建立了蔬菜中丁蟲腈的測(cè)定方法。該檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、重復(fù)性好、定性定量準(zhǔn)確，具有良好的準(zhǔn)確度和精密度，適合于快速測(cè)定蔬菜中的丁蟲腈。

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