王東蕾

作者單位：253000德州市，山東德州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科

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白假絲酵母菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)及耐藥情況分析

王東蕾

作者單位：253000德州市，山東德州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科

【摘要】目的探討白假絲酵母菌引起抗菌藥物相關(guān)性腹瀉（antibiotic－associated diarrhea，AAD）的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)和耐藥情況。方法選擇我院2014年4月－2015年7月住院的102例AAD患者進(jìn)行回顧性分析，對所有AAD患者的糞便標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定，其中感染白假絲酵母菌的患者（51例）作為觀察組，未感染白假絲酵母菌的患者（51例）作為對照組，并對兩組患者的相關(guān)生化指標(biāo)的變化情況和藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果觀察組患者血鉀、血鈉和空腹血糖水平均明顯高于對照組患者，而白蛋白水平明顯低于對照組患者，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，觀察組患者對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、兩性霉素B、氟胞嘧啶、青霉素G和左氧氟沙星的耐藥率低于對照組、敏感率高于對照組，而萬古霉素和呋喃妥因的耐藥率高于對照組、敏感率低于對照組。結(jié)論白假絲酵母菌引起的AAD較其他菌種引起的AAD嚴(yán)重。對AAD患者早期給予糞便標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定以明確菌種，有助于指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，提高抗菌藥物使用的安全性，對白假絲酵母菌引起的AAD的診療具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】白假絲酵母菌；抗菌藥物相關(guān)性腹瀉；血鉀；血鈉；空腹血糖；白蛋白；藥敏試驗(yàn)

白假絲酵母菌是存在于正常機(jī)體器官中的真菌，正常情況下不會引發(fā)任何疾病，但當(dāng)機(jī)體免疫功能受損、防御能力降低或者正常菌群生態(tài)平衡失調(diào)時(shí)，其將大量增殖誘發(fā)相關(guān)疾?。?］?？咕幬锵嚓P(guān)性腹瀉（antibiotic－associated diarrhea，AAD）是指應(yīng)用抗菌藥物后引發(fā)的腹瀉，而抗菌藥物的不合理使用往往會破壞腸內(nèi)厭氧菌和正常菌群［2］。有研究［3，4］表明，AAD的發(fā)生發(fā)展與白假絲酵母菌之間存在著緊密的聯(lián)系。白假絲酵母菌可附著于腸壁，大量釋放水解酶，導(dǎo)致AAD患者體內(nèi)電解質(zhì)平衡紊亂，蛋白質(zhì)及水分流失加重。而在治療過程中抗菌藥物的選擇嚴(yán)重影響臨床療效。如何選擇正確的抗菌藥物治療AAD已成為目前臨床上探討的熱點(diǎn)話題。鑒于此，本文通過對比白假絲酵母菌與非白假絲酵母菌引起的AAD患者相關(guān)生化指標(biāo)的改變，以及抗菌藥物的使用情況，探討白假絲酵母菌引起AAD的臨床檢驗(yàn)特點(diǎn)和耐藥特征。為臨床合理選擇抗菌藥物治療AAD提供依據(jù)，報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇2014年4月－2015年7月我院住院的102例AAD患者為研究對象，患者均通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，均簽署知情同意書。其中男69例，女33例，平均年齡（12.8±2.5）歲。根據(jù)藥敏試驗(yàn)和生化反應(yīng)結(jié)果將感染白假絲酵母菌的AAD患者51例作為觀察組，其中男30例，女21例，平均年齡（12.6±1.3）歲；將未感染白假絲酵母菌的AAD患者51例作為對照組，其中男39例，女12例，平均年齡（13.8±0.9）歲。兩組患者在性別、年齡等方面經(jīng)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05），具有可比性。

1.2病例選擇標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1納入標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)臨床醫(yī)師確診為AAD的患者。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn)不能耐受治療的患者；對治療藥物過敏的患者；嚴(yán)重心功能不全的患者；嚴(yán)重肝功能不全的患者；嚴(yán)重腎臟疾病的患者如尿毒癥、過敏性紫癜導(dǎo)致的腎損傷等；精神意識障礙的患者；孕婦和哺乳期女性患者；血液系統(tǒng)疾病的患者。

1.3儀器與試劑用于細(xì)菌培養(yǎng)的SS平板購自上海運(yùn)勢佳醫(yī)療器械有限公司，中國藍(lán)平板購自青島海博生物技術(shù)有限公司，沙保平板購自廣州市迪景微生物科技有限公司，血平板購自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，玉米培養(yǎng)基購自上海信然實(shí)業(yè)有限公司；V－200A高倍光學(xué)顯微鏡為深圳市博視達(dá)光學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。細(xì)菌藥敏試驗(yàn)采用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的VITEK 2 Compact全自動微生物分析儀進(jìn)行檢測。血鈉、血鉀檢測采用離子選擇電極法，采用美國Instrumentation Laboratory公司生產(chǎn)的GEM 3000血?dú)夥治鰞x及其配套試劑進(jìn)行檢測，動脈血?dú)忉槥槊绹鳥D公司產(chǎn)品；白蛋白采用免疫比濁法、空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法，檢測儀器為上海佳和生物公司生產(chǎn)的GF－2245生化分析儀及其配套試劑。

1.4方法

1.4.1標(biāo)本采集與細(xì)菌培養(yǎng)所有患者均行糞便標(biāo)本培養(yǎng)，在糞便采集中需注意糞便最好選擇晨起糞便，排便后立即用竹簽取拇指大小糞塊放入密封容器中送檢。根據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版［5］對所有患者的糞便標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，選取患者糞便中較為嚴(yán)重的黏液或膿血，在同一時(shí)間接種在SS平板、中國藍(lán)平板、沙保平板以及血平板上，置于恒溫培養(yǎng)箱，36℃條件下培養(yǎng)，48 h后觀察菌落的生長狀況，并選取可疑的細(xì)菌進(jìn)行鏡下鑒定。將疑似白假絲酵母菌的菌落挑出，在玉米瓊脂培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)，22～28℃下培養(yǎng)48 h，在高倍顯微鏡下進(jìn)行觀察，若發(fā)現(xiàn)厚膜孢子生長在假菌絲頂端，則可初步判斷為白假絲酵母菌。繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，肉眼及鏡下觀察菌落生長情況，白假絲酵母菌菌落肉眼下表現(xiàn)為酵母樣菌落，有酵母氣味；顯微鏡下表現(xiàn)為卵圓形出芽細(xì)胞，可見假菌絲。為進(jìn)一步確診，行糖發(fā)酵試驗(yàn)，當(dāng)葡萄糖（＋）、乳糖（－）、半乳糖（＋）、麥芽糖（＋）時(shí)則可確診為白假絲酵母菌。

1.4.2藥敏試驗(yàn)采用VITEK－C32全自動微生物分析儀對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、兩性霉素B、氟胞嘧啶、青霉素G、左氧氟沙星、萬古霉素和呋喃妥因行藥物敏感試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果依據(jù)CLSI 2013年版的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用WHONET 5.4軟件統(tǒng)計(jì)白假絲酵母菌對常用抗菌藥物藥敏試驗(yàn)結(jié)果的耐藥情況。采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以±s表示，兩組間計(jì)量資料的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組患者相關(guān)生化指標(biāo)的變化情況觀察組血鉀、血鈉和空腹血糖水平均明顯高于對照組，而白蛋白水平明顯低于對照組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），見表1。

2.2兩組患者對常用抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析觀察組對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、兩性霉素B、氟胞嘧啶、青霉素G和左氧氟沙星的耐藥率均低于對照組，敏感率均高于對照組；而對萬古霉素和呋喃妥因的耐藥率均高于對照組，敏感率均低于對照組，見表2。

表1　兩組患者相關(guān)生化指標(biāo)的變化情況（±s）

組別　例數(shù)　血鉀（mmol／L）血鈉（mmol／L）空腹血糖（mmol／L）白蛋白（g／L）觀察組　51　4.31±0.12 147.52±2.59 7.70±0.96 30.09±1.25對照組　51　3.84±0.28 142.37±2.43 5.79±0.82 34.57±1.08 t值?。?1.018　10.356　10.804　19.367 P值?。?.000　0.000　0.000　0.000

3　討論

AAD的發(fā)生發(fā)展與腸道菌群紊亂、抗生素干擾糖和膽汁酸代謝、抗生素的直接作用等諸多因素相關(guān)，其發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜，目前臨床上尚無確切的定論。病原體導(dǎo)致的AAD的發(fā)病機(jī)制可能為患者長期應(yīng)用抗生素或抗生素應(yīng)用不當(dāng)，導(dǎo)致腸道菌群中的敏感菌受到抑制，條件致病菌成為優(yōu)勢菌而進(jìn)行繁殖，最終導(dǎo)致菌群失調(diào)，引起腹瀉等臨床癥狀［6］。AAD具有較高的發(fā)病率，干擾人們的身體健康，甚至?xí)斐傻偷鞍踪|(zhì)血癥、敗血癥、中毒性巨結(jié)腸、胃腸功能衰竭以及腸穿孔等嚴(yán)重后果，危及生命［7］。致使AAD發(fā)生的常見菌種包括白假絲酵母菌、奇異變形桿菌等，其中以白假絲酵母菌引發(fā)的AAD較為嚴(yán)重，主要是由于白假絲酵母菌是一種雙相菌，可憑借其特有的運(yùn)動能力穿透腸黏膜組織進(jìn)入血管破壞血液中的補(bǔ)體，損害患者的免疫系統(tǒng)。白假絲酵母菌可附著于腸壁，在腸道黏膜大量增殖并釋放水解酶，致使腸道黏蛋白質(zhì)層溶解，損傷腸絨毛和腸微絨毛，導(dǎo)致腸道功能紊亂引發(fā)腹瀉加重，患者體內(nèi)電解質(zhì)平衡紊亂以及蛋白質(zhì)和水分大量流失加重，致使血鉀、血鈉和空腹血糖水平升高、白蛋白水平降低的程度較其他細(xì)菌導(dǎo)致的AAD患者嚴(yán)重［8－10］。

本文研究結(jié)果顯示，觀察組血鉀、血鈉和空腹血糖水平均明顯高于對照組，而白蛋白水平明顯低于對照組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），這與劉艷紅［11］報(bào)道的感染白假絲酵母菌的AAD患者的血鉀、血鈉和空腹血糖水平顯著高于未感染白假絲酵母菌的AAD患者的研究結(jié)果相一致?？咕幬锏牟缓侠硎褂脮茐捏w內(nèi)正常菌群，從而誘發(fā)AAD。因此，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥物是十分必要的。本文研究結(jié)果顯示，觀察組患者對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、兩性霉素B、氟胞嘧啶、青霉素G和左氧氟沙星的耐藥率均低于對照組，敏感率均高于對照組；而對萬古霉素和呋喃妥因的耐藥率均高于對照組，敏感率均低于對照組，這與董偉毅等［12］報(bào)道的白假絲酵母菌對氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的敏感性較好，而對萬古霉素和呋喃妥因的耐藥率較高的結(jié)果一致。說明雖同為AAD患者，但白假絲酵母菌引起的AAD和其他細(xì)菌引起的AAD耐藥情況不同，因此應(yīng)根據(jù)糞便培養(yǎng)辨認(rèn)AAD的誘發(fā)菌種，選擇正確合理的抗菌藥物，能夠在一定程度上提高臨床治療效果，并保證抗菌藥物使用的安全性。

表2　兩組患者對常用抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果［n（%）］

綜上所述，引起AAD的病因諸多，其中細(xì)菌感染為主要因素之一，而白假絲酵母菌引起的AAD尤為嚴(yán)重，因此對患者的糞便標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)以明確菌種，合理使用抗菌藥物，提高抗菌藥物使用的安全性，對白假絲酵母菌引起的AAD的診療具有重要的意義。

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（本文編輯：李霦）

綜述

臨床研究

The analysis of clinical test characteristics and the drug resistant situation of the antibiotic－associated diarrhea caused by Candida albicans

WANG Dong－lei.Department of Clinical Laboratory，Dezhou Hospital of Traditional Chinese Medicine，Dezhou 253000，China

【Abstract】Objective To investigate the clinical test characteristics and the drug resistant situation of the antibiotic－associated diarrhea（AAD）caused by Candida albicans.Methods 102 cases AAD patients were selected in our hospital from April 2014 to July 2015，and all patients were retrospectively analyzed.The feces specimens of all AAD patients for bacterial culture and determination.51 cases AAD patients with Candida albicans as observation group，and the other 51 cases without Candida albicans as control group.The biochemical indicators and drug resistant test results of all AAD patients were analyzed.Results The levels of serum potassium，serum sodium and fasting blood glucose in observation group were all higher than that of control group，and albumin levels in observation group was lower than that of control group.The differences all had statistical significance（Pall＜0.05）.Drug resistant test showed that drug resistant rates of fluconazole，itraconazole，voriconazole，amphotericin B，flucytosine，penicillin G and levofloxacin in observation group were all lower than that of control group，and the sensitive rates were all higher than that of control group.The drug resistant rates of vancomycin and macrodantin in observation group were all higher than that of control group，and the sensitive rates were all lower than that of control group.Conclusion AAD caused by Candida albicans is more serious than AAD casused by other bacteria.So feces specimens detection and determination early to confirming strain will contribute to guid clinical rational use of antimicrobial drugs，and improve safety of antimicrobial.It has a significance to clinical diagnosis and treatment of AAD caused by Candida albicans.

【Key words】Candida albicans；Antibiotic－associated diarrhea；Serum potassium；Serum sodium；Fasting blood glucose；Albumin；Drug sensitive test

收稿日期：（2016－01－30）

doi：10.3969／j.issn.1674－7151.2016.01.009

通訊作者：王東蕾，E－mail：duoduolele＠sina.com