○孟思妤　孟長明　陳昌福（河南省新鄉(xiāng)康大消毒劑有限公司；華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，武漢430070）

免疫增強(qiáng)劑的特點(diǎn)及其在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用方法

○孟思妤1）孟長明1）陳昌福2）
（1）河南省新鄉(xiāng)康大消毒劑有限公司；2）華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，武漢430070）

免疫刺激劑（immunologic stimulant）是指能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物免疫系統(tǒng)并激活免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)細(xì)菌和病毒等傳染性病原體抵抗力的一類物質(zhì)。將免疫刺激劑用于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物傳染性疾病預(yù)防的研究，其主要目的是為了預(yù)防使用化學(xué)藥物難以奏效的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的病毒和細(xì)菌性疾病。

（一）免疫刺激劑的種類、特點(diǎn)與應(yīng)用

1.革蘭陽性菌與菌體肽聚糖部分革蘭陽性菌的滅活菌體具有激活動(dòng)物免疫功能的作用，其作用的主要成分是菌體細(xì)胞壁中的肽聚糖。并非所有的革蘭陽性菌都具有這種功能，而只有特定的菌種和特定的菌株具有這種免疫激活功能。

將屬于革蘭陽性菌的嗜熱雙歧桿菌細(xì)胞壁中提取的肽聚糖投與魚類后，在提高魚體的巨噬細(xì)胞和嗜中性白細(xì)胞的吞噬能力與過氧化物酶活性的同時(shí)，還能增強(qiáng)溶菌酶的活性。對(duì)養(yǎng)殖蝦類投與這類物質(zhì)可以提高其粒細(xì)胞的吞噬活性并增加細(xì)胞中超氧化歧化酶的生成量，同時(shí)提高酚氧化酶的活性。由于這類免疫刺激劑激活了水產(chǎn)動(dòng)物的免疫功能，已經(jīng)證明可以提高虹鱒對(duì)弧菌病、五條鰤對(duì)鏈球菌病和日本囊對(duì)蝦對(duì)弧菌病與病毒性血癥的抵抗力。

2.革蘭陰性菌與菌體LPS將部分革蘭陰性菌及其細(xì)胞壁中LPS投與魚類后，可以增加魚類血液中白細(xì)胞的數(shù)量和提高其吞噬活性。增強(qiáng)日本鰻鱺對(duì)愛德華菌病的抵抗力。用殺對(duì)蝦弧菌的滅活菌體注射、浸泡和投喂日本囊對(duì)蝦，可以促進(jìn)對(duì)蝦體內(nèi)產(chǎn)生血細(xì)胞趨化因子和提高血細(xì)胞的吞噬活性，增強(qiáng)日本囊對(duì)蝦對(duì)弧菌病的抵抗力。

3.從放線菌中提取的短肽從屬于放線菌的橄欖灰鏈霉菌的培養(yǎng)液中提取的短肽類物質(zhì)投與魚類后，可以提高供試魚的巨噬細(xì)胞的吞噬活性和殺菌能力，能增強(qiáng)虹鱒對(duì)腎臟病等傳染性疾病的抗病力。

4.酵母菌與菌體多糖酵母菌的細(xì)胞壁中存在大量的β-1，3-葡聚糖、β-1，6-葡聚糖和甘露聚糖等多糖類物質(zhì)，尤其是含有較多的β-1，3-葡聚糖。將從酵母菌中提取的β-1，3-葡聚糖投與魚體，可以提高魚體內(nèi)巨噬細(xì)胞及其他白細(xì)胞的吞噬和殺菌活性，同時(shí)還可以提高IL-2和補(bǔ)體的活性。將啤酒酵母菌細(xì)胞壁成分投與對(duì)蝦，也可以提高血細(xì)胞的吞噬活性、酚氧化酶和超氧化歧化酶的產(chǎn)生能力。通過激活免疫功能，可以使斑鮰對(duì)遲緩愛德華菌病、鮭科魚類對(duì)腎臟病和弧菌病的抗病力。湖北安琪酵母股份有限公司生產(chǎn)的免疫多糖（酵母細(xì)胞壁），其中主要含有β-葡聚糖≥20％，α-甘露聚糖肽≥20％，肽類及蛋白質(zhì)≥30％，幾丁質(zhì)≥2.0％等，經(jīng)過對(duì)凡納濱對(duì)蝦、日本鰻鱺和中華鱉的大量試驗(yàn)研究證明，該產(chǎn)品對(duì)多種水產(chǎn)動(dòng)物的免疫系統(tǒng)有良好的刺激作用，是一種優(yōu)質(zhì)免疫刺激劑。

5.真菌與真菌多糖將從蘑菇中提取的β-1，3-葡聚糖投與魚類后，可以增強(qiáng)供試魚白細(xì)胞吞噬活性，提高補(bǔ)體和溶菌酶的活性，促進(jìn)特異性抗體的生成。將這種β-1，3-葡聚糖投與對(duì)蝦后，也可以增強(qiáng)血細(xì)胞的吞噬活性和提高酚氧化酶的活性。由于免疫刺激劑激活了免疫功能，可以有效地預(yù)防鯉的氣單胞菌病、五條鰤的鏈球菌病和日本囊對(duì)蝦的弧菌病與病毒性血癥。

6.海藻與海藻多糖將從海帶中提取的β-1，3-葡聚糖添加在培養(yǎng)液中，可以刺激鮭的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生超氧化歧化酶。此外，髓藻屬的多種海藻、蘇薩海帶、帕納普海帶和裙帶菜屬的一些種類中的熱提取物，投與魚類后，利用在實(shí)驗(yàn)室條件下的攻毒試驗(yàn)，證明日本鰻鱺對(duì)E.tarda，五條鰤對(duì)鏈球菌的抵抗力明顯上升。

7.甲殼質(zhì)與殼多糖從甲殼類和昆蟲的外殼中提取的甲殼質(zhì)與殼多糖，投與魚類后，可以增強(qiáng)供試魚的白細(xì)胞吞噬活性和殺菌能力，提高體內(nèi)溶菌酶活性和對(duì)各種傳染病的抵抗力。

8.其他免疫刺激劑如左旋咪唑等化學(xué)合成物質(zhì)，本來是作為殺蟲劑使用的，現(xiàn)在已經(jīng)研究結(jié)果證明這種物質(zhì)還具有增強(qiáng)魚類白細(xì)胞的吞噬活性和殺菌活性，使溶菌酶的活性上升，提高虹鱒對(duì)弧菌病的抵抗力。從中草藥中提取的許多成分，如干草素、莨菪堿等也已經(jīng)被初步證明是很有開發(fā)前景的水產(chǎn)用免疫刺激劑。

（二）免疫刺激劑的應(yīng)用途徑與程序

每一種免疫刺激劑的有效劑量都存在使用上限和下限，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物采用間隔一定時(shí)間定期投與免疫刺激劑較長期連續(xù)投與的效果好，而且只有在投與量和方法正確的前提下，免疫刺激劑才能正常地發(fā)揮作用。從嗜熱雙歧桿菌中提取的肽聚糖，每日按每千克體重0.2mg的劑量投與，對(duì)魚、蝦是適宜的劑量，如果每日按該劑量的10倍投與，供試魚、蝦的免疫系統(tǒng)的功能就會(huì)趨于與未使用免疫刺激劑的對(duì)照組相同。此外，用該物質(zhì)作為魚、蝦的免疫刺激劑時(shí)，采用連續(xù)投喂4 d停用3 d或者連續(xù)投喂7 d停用7 d的投與方式，其效果較連續(xù)投喂好。

關(guān)于免疫刺激劑投與的時(shí)間，最好能在水產(chǎn)動(dòng)物傳染性疾病的發(fā)生季節(jié)前連續(xù)投喂一段時(shí)間，將水產(chǎn)動(dòng)物自身非特異性免疫力提高。這是因?yàn)樵谑褂妹庖叽碳┢陂g，即使有細(xì)菌或病毒性病原進(jìn)入了水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體，由于機(jī)體的免疫功能在免疫刺激劑的作用下，表現(xiàn)出較高的免疫活性，抑制了病原體增殖而并未將其消滅或排除體外的緣故。采用免疫多糖（酵母免疫多糖）作為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的免疫刺激劑時(shí)，在各種傳染性疾病的流行高峰時(shí)期，可以采用連續(xù)投與的方式，而在養(yǎng)殖時(shí)期則可以采用連續(xù)投與3～4周，在必要的情形下，間隔一段時(shí)間后（也可以更具需要而確定）再進(jìn)行第二個(gè)投喂周期的方式進(jìn)行。

需要特別注意的是免疫刺激劑是通過激活水產(chǎn)動(dòng)物的免疫系統(tǒng)而發(fā)揮抗傳染病的功能的，如果因?yàn)轲B(yǎng)殖環(huán)境特別惡劣，水產(chǎn)動(dòng)物的免疫系統(tǒng)衰弱至不能激活的狀態(tài)，免疫刺激劑也就難以發(fā)揮其作用了。所以，從改善水產(chǎn)動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境、加強(qiáng)營養(yǎng)和飼養(yǎng)管理入手，盡量減少抑制水產(chǎn)動(dòng)物免疫系統(tǒng)的環(huán)境因素，是提高免疫刺激劑使用效果的重要途徑。