任瑞，李增良，趙向東，李曉輝，劉青

（河北省林果桑花質(zhì)量監(jiān)督檢驗管理中心，河北石家莊 050081）

農(nóng)產(chǎn)品中植物生長調(diào)節(jié)劑檢測前處理常用方法分析

任瑞，李增良，趙向東，李曉輝，劉青

（河北省林果桑花質(zhì)量監(jiān)督檢驗管理中心，河北石家莊 050081）

概述了近年來農(nóng)產(chǎn)品中常用植物生長調(diào)節(jié)劑檢測前處理方法的研究進(jìn)展，分析提取液的選擇、提取方法、提取液的凈化技術(shù)，并對其發(fā)展趨勢進(jìn)行展望。

農(nóng)產(chǎn)品；植物生長調(diào)節(jié)劑；生長調(diào)節(jié)劑提取

植物生長調(diào)節(jié)劑是對植物生長、發(fā)育具有重要調(diào)節(jié)作用的人工合成制劑的統(tǒng)稱。根據(jù)對植物的作用機理，通?？煞譃樯L促進(jìn)劑、生長抑制劑和生長延緩劑3類。近年來，植物生長調(diào)節(jié)劑在果蔬生產(chǎn)過程中應(yīng)用日益廣泛，但誤用、濫用、亂用情況也比較突出，乒乓球葡萄、特大草莓等異形異態(tài)農(nóng)產(chǎn)品市場上屢見不鮮，已經(jīng)較為普遍的走上了人民群眾的餐桌。由此引發(fā)的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量問題逐漸增多，植物生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑檢驗檢測技術(shù)成了科研工作者重要的研究課題。其中，前處理方法是檢驗檢測的重要環(huán)節(jié)之一，主要包括提取和凈化2個過程。

1　提取

農(nóng)產(chǎn)品的組成成分復(fù)雜。提取就是在復(fù)雜的混合物體系中，將痕量的植物生長調(diào)節(jié)劑最有效、最大限度的分離出來的過程。

1.1 提取劑的選擇

提取劑的選擇非常關(guān)鍵。根據(jù)“相似相溶”原理，選擇與待測生長調(diào)節(jié)劑極性相近的溶劑，并且提取劑不能與樣品的組分發(fā)生反應(yīng)。同時，從環(huán)保的角度，應(yīng)盡量選用無毒、低毒的物質(zhì)作為提取劑。對于非極性的生長調(diào)節(jié)劑，一般選用非極性溶劑或混合溶劑來提取。對于含水率較高的農(nóng)產(chǎn)品樣品，一般選用與水互溶的溶劑作為提取劑。

其中，甲醇是最常用的提取劑之一，而不同濃度的甲醇溶液對不同種類生長調(diào)節(jié)劑的提取效率差異較大。王佳祥等[1]用甲醇和80%甲醇作為提取溶劑采用超聲波法比較了對水果和蔬菜中的赤霉素提取效果。阮麗萍等[2]比較了酸化甲醇（含2%甲酸）、堿化甲醇（含2%氨水）、甲醇和50%甲醇等提取劑對花生中馬來酰肼和丁酰肼的提取回收效率，確定了以堿化甲醇為提取劑。

乙腈因極性大、穿透力強、提取效率高等特性，也是果蔬中植物生長調(diào)節(jié)劑殘留檢測常用的提取溶劑。徐宜宏等[3]選用乙腈為提取溶劑對蘋果、番茄等7種植物中生長調(diào)節(jié)劑進(jìn)行提取，牟艷莉等[4]采用乙腈對瓜果中多效唑、氯吡脲、異戊烯腺嘌呤和6-芐氨基嘌呤等4種植物生長調(diào)節(jié)劑殘留量進(jìn)行提取，均得到了較好的提取效率。

丙酮作為提取溶劑在植物生長調(diào)節(jié)劑分析中也得到了成功地應(yīng)用[5-6]。

1.2 提取方法

目前，植物生長調(diào)節(jié)劑檢測前處理常用的提取方法有超聲波法、振蕩提取、浸漬提取等提取方法。王偉華等[7]采用甲醇—超聲波提取法，建立了紅棗中氯吡脲與赤霉酸的HPLC-MS/MS檢測方法。張敏等[8]用80%甲醇水超聲提取果蔬中赤霉素、多效唑、烯效唑，結(jié)果表明3種植物生長調(diào)節(jié)劑平均回收率為78%～91%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%～5.4%，均達(dá)到了檢測要求。吳鳳琪等[9]采用乙腈—漩渦振蕩提取法，建立了蘋果中赤霉素、氯吡脲、乙烯利等8種植物生長調(diào)節(jié)劑的檢測方法。張慧等[10]采用甲醇——低溫振蕩提取法，建立了甲萘威、脫落酸、多效唑等5種植物生長調(diào)節(jié)劑的殘留檢測方法，均取得了滿意效果。浸漬提取有一般浸漬提取、低溫研磨浸漬提取等方式。盧巧梅等[11]80%甲醇浸漬提取過夜的方式，有效提取了水仙葉片和幼苗中吲哚乙酸、脫落酸和赤霉素等植物生長調(diào)節(jié)劑。侯升杰等[12]樣品在液氮中研磨成粉末，然后用甲醇（4+1）浸漬提取，提取了冬青芽中的脫落酸。馬宏棋等[13]建立了2種樣品加液氮研磨后浸漬提取脫落酸的方法。同時，各種提取方法配合使用也較為常見。趙英博等[14]實現(xiàn)了用甲醇+水（8+2）作為提取劑，在10000r/min條件下均質(zhì)，抽濾——旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后凈化，檢測水果、蔬菜中的赤霉素。王駿等[15]采用均質(zhì)+超聲波提取的方式，有效提取出了獼猴桃中的赤霉素和脫落酸。

2　凈化富集

凈化的目的是要盡可能去除提取液中的干擾物質(zhì)。目前常用的凈化富集方法主要有液液萃取法（LLE）、固相萃?。⊿PE）法和分散固相萃取法（DSPE）等。

2.1 液液萃取法

液液萃取法操作簡單，在早期植物生長調(diào)節(jié)劑檢測前處理過程中應(yīng)用較多。其中，乙酸乙酯是優(yōu)良的萃取溶劑，尤其是對于含糖量較高的樣品，其萃取雜質(zhì)少的特點更為突出。唐莉娟等[16]在建立白蘿卜中植物生長調(diào)節(jié)劑檢測方法時，采用了乙酸乙酯3次液液萃取凈化的方式，平均回收率在77.56%～105.08%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.48%～15.88%之間。Anna Sannino[17]用丙酮建立檸檬汁中包括多效唑的24種農(nóng)藥殘留時，采用了乙酸乙酯－環(huán)己烷液液萃取凈化，多效唑的回收率為87.0%～89.0%。Sharma等[18]和李瑞娟[19]將蔬果樣品采用乙腈提取，正己烷和二氯甲烷液液萃取凈化，高壓液相色譜分別測定了葡萄和獼猴桃中的氯吡脲殘留，結(jié)果滿足痕量分析要求。但是液液萃取試劑消耗大、提取凈化效果差，且在萃取過程中易產(chǎn)生乳化現(xiàn)象，因此近年來逐漸被固相萃取法和固相分散萃取法所替代。

2.2 固相萃取法

固相萃取法（SPE）與液液萃取相比，固相萃取柱商品化程度高，產(chǎn)品種類繁多。商品固相萃取柱填充均勻，溶劑用量少，降低了污染，并提高了方法的穩(wěn)定性，具有快速、簡單、高效、重現(xiàn)性好的特點，尤其適合提取微量樣品，基本能滿足實際檢驗的需要，是目前植物生長調(diào)節(jié)劑檢測前處理中最常用的凈化方法。Maki Kobayashi等[20]使用HLB柱和PSA固相萃取柱，對水果中氯吡脲的丙酮提取液、GeLiya等[21]利用Oasis MAX固相萃取柱對椰子水中赤霉素GA1和GA3、Sharma D等[22]用弗羅里硅柱對芒果中的多效唑甲醇提取液進(jìn)行了凈化，獲得了較好的凈化效果。Xu等[23]用乙腈對蘋果樣品中包括多效唑在內(nèi)205種農(nóng)藥進(jìn)行提取，PSA和C18固相萃取柱凈化，在0.01、0.02和0.04mg/kg 3個不同添加水平下，多效唑的回收率分別為92.9%、96.5%和96.4%。

2.3 分散固相萃取法

近年來固相萃取法向著更快速和更微型的方向發(fā)展，分散固相萃取法（DSPE）是繼固相萃取法之后應(yīng)用較成熟的前處理技術(shù)。與SPE技術(shù)相比，分散固相萃取技術(shù)所需的樣品和有機溶劑用量少，萃取方便快速，靈敏度高。Banerjee等[24-25]采用乙酸乙酯萃取的PSA分散固相萃取——液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用，測定了葡萄、芒果中的氯吡脲等農(nóng)藥殘留。

2.4 QuEChERS固相萃取法

QuEChERS固相萃取技術(shù)最早是由Anastassiadas等人[26]提出，在分散固相萃取法的基礎(chǔ)上開發(fā)的快速前處理技術(shù)，具有快速（Quick）、簡單（Easy）、便宜（Cheap）、高效（Effective）、可靠（Rugged）和安全（Safe）的特點而得名，近來在植物生長調(diào)節(jié)劑等分析中得到廣泛應(yīng)用[27-29]。Lee等[30]比較了液液萃?。↙LE）、加壓液體萃?。≒LE）和QuEChERS 3種萃取方法，其中運用QuEChERS方法的回收率和精密度均高于其它兩種方法。

2.5 其它方法

除了以上常見的方法外，還有一些其它方法的應(yīng)用，如超臨界流體萃取法（SFE）、分子印記法（MIT）等。SFE是一種較為清潔的提取方法，可以避免有毒溶劑的使用，減少環(huán)境污染。分子印跡技術(shù)是制備具有高度識別和選擇性材料的一門技術(shù)。銀珍紅[31]以2，4-二氯苯氧乙酸分子為模板，采用原位聚合法，制備了作為高效液相色譜固定相的分子印跡整體柱。

3　分析與展望

植物生長調(diào)節(jié)劑檢測前處理中，提取液的選擇應(yīng)遵循“相似相溶”原理，并盡量選用無毒、低毒物質(zhì)，同時結(jié)合樣品特性、植物生長調(diào)節(jié)劑種類和提取液種類，采用超聲波、振蕩、低溫研磨等方法，提高提取的效率和效果。從提取液凈化的方式分析，固相萃取法已基本上取代了液液萃取法。同時，分散固相萃取、QuEChERS固相萃取等改性固相萃取技術(shù)，以及超臨界流體萃取、分子印記等新方法因操作簡便、重復(fù)性高、環(huán)保性好等特點，日益被廣泛應(yīng)用。

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Progress in sample pre-processing for Plant Growth Regulators of primary products

Ren Rui,Li zeng-liang,Zhao Xiang-dong,Li Xiao-hui,Liu Qing
（Hebei Provincial Center for Quality Supervision and Test of Forestry Fruit，Mulberry and Flower，Shijiazhuang Hebei 050081）

An overview of the pre-processing methods for plant growth regulators detection of primary products in recent years,analysis extract selection,extraction method,extract purification technology,and prospects of its development trend.

Agricultural products；Plant growth regulators；Extraction method

TQ452

A

1002-3356（2016）01-0063-03

2016-01-07

河北省科技廳科技計劃項目（14225503D）