楊 晨， 任鳳英， 王 煒， 黃 嘯， 茍小軍， 陳 林， 李江紅， 石克金

(成都大學(xué) 四川抗菌素工業(yè)研究所 抗生素研究與再評(píng)價(jià)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 四川 成都 610052)

頂空氣相色譜法測定琥珀酸索非利新原料藥中殘留溶劑含量

楊 晨， 任鳳英， 王 煒， 黃 嘯， 茍小軍， 陳 林， 李江紅， 石克金

(成都大學(xué) 四川抗菌素工業(yè)研究所 抗生素研究與再評(píng)價(jià)四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 四川 成都 610052)

采用Agilent DB-624毛細(xì)管柱色譜柱，F(xiàn)ID檢測器，DMF為溶劑，建立了頂空氣相色譜法同時(shí)測定琥珀酸索非利新原料藥中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、異丙醚、二氯甲烷、甲苯6種殘留溶劑的分析方法.結(jié)果顯示，6種殘留溶劑在各自的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系(分別為r=0.9997～0.9999，n=6)，最低檢出限范圍為0.147～0.871 μg；平均添加回收率為98.64%～101.79%(RSD為0.26%～1.58%,n=3).方法簡單、靈敏、可靠，適用于琥珀酸索非利新原料藥中殘留溶劑的分析檢測.

氣相色譜法；頂空采樣；殘留溶劑；琥珀酸索非利新

0 引 言

琥珀酸索非利新(solifenacinsuccinate)，化學(xué)名為((3R)-1-氮雜二環(huán)[2.2.2]辛烷-3-基(1S)-1-苯基-3,4-二氫異喹啉-2-(1H)-羧酸酯琥珀酸鹽)，商品名為衛(wèi)喜康，是一種選擇性毒蕈堿(M)受體拮抗劑，適應(yīng)癥為治療尿頻與尿失禁等[1-2].由于琥珀酸索非利新原料藥在制備過程中使用了有機(jī)溶劑，如乙醇、丙酮、乙酸乙酯、異丙醚、二氯甲烷、甲苯等，而根據(jù)《中國藥典》2010年版二部附錄VIII P殘留溶劑測定法的指導(dǎo)原則和人用藥品注冊(cè)技術(shù)規(guī)范國際協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)提出的殘留溶劑指導(dǎo)原則，這些溶劑均被列為藥品必須限制的第二、三類有機(jī)溶劑[3].因此，為保證藥品質(zhì)量和用藥安全，對(duì)琥珀酸索非利新原料藥進(jìn)行有機(jī)溶劑的殘留量檢測十分重要[4-5].本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜頂空進(jìn)樣系統(tǒng)對(duì)琥珀酸索非利新殘留溶劑進(jìn)行分析和測定，所建方法簡單靈敏，重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度高，對(duì)控制藥品質(zhì)量可起到關(guān)鍵作用.

1 儀器、材料和方法

1.1 儀 器

實(shí)驗(yàn)所用儀器包括：配備火焰離子化檢測儀(FID)檢測器的Agilent 7890A型氣相色譜儀(含Agilent G1888頂空進(jìn)樣器，美國安捷倫公司)；Sartorius BP211D型分析天平(德國賽多利斯)；KQ-100B型超聲波清洗儀(昆山超聲儀器有限公司).

1.2 材 料

實(shí)驗(yàn)所用材料包括：琥珀酸索非利新(批號(hào)，140901、140902、140903)，由成都大學(xué)四川抗菌素工業(yè)研究所抗感染藥物實(shí)驗(yàn)室合成，純度≥99.0%；其余所用試劑均為分析純，由成都市科龍化工試劑廠生產(chǎn).

1.3 方 法

1.3.1 色譜條件.

實(shí)驗(yàn)的色譜條件為：色譜柱為Agilent DB-624毛細(xì)管柱色譜柱(30 m×0.53 mm×3.0 μm)；氫火焰離子化檢測器(FID)，溫度為250 ℃；程序升溫，50 ℃保持5 min，然后以10 ℃·min-1的速率升溫至220 ℃；分流進(jìn)樣，分流比為5∶1，進(jìn)樣口溫度為200 ℃；載氣為氮?dú)?，流速?.0 mL·min-1；頂空進(jìn)樣，頂空平衡溫度為80 ℃，頂空平衡時(shí)間為20 min，定量環(huán)溫度為90 ℃，轉(zhuǎn)移管溫度為100 ℃；進(jìn)樣體積為1.0 mL.

1.3.2 對(duì)照品溶液配制.

分別取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、異丙醚、二氯甲烷和甲苯各適量，精密稱定，加DMF配制成貯備液.分別取各貯備液適當(dāng)體積混合后，用DMF稀釋成每1 mL中含乙醇0.25 mg、 丙酮0.25 mg、 乙酸乙酯0.25 mg、 異丙醚0.10 mg、 二氯甲烷0.03 mg、 甲苯0.0445 mg的溶液，制得對(duì)照品溶液.實(shí)驗(yàn)時(shí)，精密量取對(duì)照品溶液2 mL，置于10 mL頂空瓶中，密封.

1.3.3 供試品溶液配制.

分別取3批樣品約0.1 g，精密稱定，置10 mL頂空瓶中，精密加入DMF 2.0 mL使之溶解，密封，制得供試品溶液.

2 結(jié)果與討論

2.1 分離條件選擇

實(shí)驗(yàn)中，采用了3種不同極性色譜柱(HP-5，PEG-20M, Agilent DB-624)對(duì)6種殘留溶劑進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，琥珀酸索非利新原料藥中殘留溶劑及對(duì)照溶液采用DB-624色譜柱后分離效果好，對(duì)照溶液與樣品中殘留溶劑都能達(dá)到基線分離，結(jié)果如圖1所示.

1.乙醇；2.丙酮；3.二氯甲烷；4.異丙醚；5.乙酸乙酯；6.甲苯

圖1 對(duì)照溶液(A)與樣品(B)色譜圖

2.2 線性關(guān)系、檢出限及定量限

分別取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、異丙醚、二氯甲烷和甲苯各適量，精密稱定，加DMF配制成貯備液.分別取各貯備液適當(dāng)體積混合后，用DMF稀釋成每1 mL中含乙醇1.00 mg、丙酮1.00 mg、乙酸乙酯1.00 mg、異丙醚0.40 mg、二氯甲烷0.12 mg和甲苯0.178 mg的溶液，制得標(biāo)準(zhǔn)溶液I.精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液I，用DMF依次稀釋2倍、4倍、10倍、20倍和40倍，得標(biāo)準(zhǔn)溶液II、III、IV、V和VI.精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液I、II、III、IV、V、VI各2 mL，分別置于10 mL頂空瓶中，密封，按“1.3.1”項(xiàng)下色譜條件測定.以對(duì)應(yīng)溶劑的濃度和峰面積計(jì)算線性關(guān)系.將對(duì)照品溶液(標(biāo)III)多次稀釋，并在以上色譜條件下進(jìn)行測定，以信噪比為3時(shí)，計(jì)算最低檢出限(LOD),以信噪比為10時(shí)，計(jì)算定量限(LOQ)，結(jié)果見表1.

表1 6種溶劑的線性關(guān)系、檢出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)

殘留溶劑線性方程r線性范圍/μg·mL-1LOD/μgLOQ/μg乙 醇丙 酮乙酸乙酯異丙醚二氯甲烷甲 苯y(tǒng)=1687x+6.8732y=4464.9x-16.883y=3232.4x-8.2413y=17206x-20.573y=1407.4x-0.611y=3746.7x-1.11970.99980.99970.99990.99980.99980.999925.06～1002.225.18～1007.424.97～998.710.05～402.13.01～120.44.46～178.50.1550.2830.3930.1470.8710.5630.4750.8051.2140.5132.6251.886

2.3 精密度實(shí)驗(yàn)

分別精密量取對(duì)照品溶液(標(biāo)III)2 mL，置于10 mL頂空瓶中，密封，按“1.3.1”項(xiàng)色譜條件頂空進(jìn)樣6次.結(jié)果測得：乙醇RSD為1.03%，丙酮RSD為0.73%，乙酸乙酯RSD為0.87%，異丙醚RSD為0.98%，二氯甲烷RSD為1.63%，甲苯RSD為0.73%.結(jié)果表明，該色譜條件下儀器精密度良好.

2.4 回收率實(shí)驗(yàn)

稱取批號(hào)140901樣品0.1 g，精密稱定，置于10 mL頂空瓶中，精密加入對(duì)照品溶液2 mL，密封，超聲10 min使溶解，計(jì)算回收率，結(jié)果見表2.

表2 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(續(xù)前表)

殘留溶劑原有量/μg加入量/μg測得量/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%異丙醚01616.33102.07 01616.21101.34101.420.61 01616.13100.84 02019.5197.57 02019.7698.7998.641.01 02019.9199.55 02423.5298.02 02423.6898.6698.931.09 02424.03100.12二氯甲烷04.84.7999.69 04.84.7498.7798.870.79 04.84.7198.15 065.9098.27 065.9198.5298.850.80 065.9999.75 07.27.1999.79 07.27.1098.5699.731.14 07.27.26100.82甲 苯07.127.14100.25 07.127.13100.1899.860.62 07.127.0699.14 08.98.8999.94 08.98.8599.4799.760.26 08.98.8999.88 010.6810.68100.03 010.6810.75100.62100.080.52 010.6810.6499.59

2.5 樣品測定

精密稱取3批樣品(批號(hào)，140901、140902、140903)0.1 g置10 mL頂空瓶中，精密加入DMF 2.0 mL，混勻，密封，按“1.3.1”項(xiàng)色譜條件頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖和峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算3批樣品中的殘留溶劑含量，結(jié)果見表3.

表3 琥珀酸索非利新原料藥殘留溶劑的分析結(jié)果

注：“..."表示未檢出.

表3數(shù)據(jù)顯示，3批樣品中的殘留溶劑含量均在限度以下.

3 結(jié) 論

本研究建立了采用頂空氣相色譜法測定琥珀酸索非利新原料藥中6種殘留溶劑的方法.方法簡便快速、靈敏準(zhǔn)確，可完全滿足對(duì)琥珀酸索非利新原料藥進(jìn)行質(zhì)量控制的需要.

[1]陳瀟雨.琥珀酸索利那新治療前列腺電切術(shù)后膀胱過度活動(dòng)癥的臨床觀察[J].現(xiàn)代泌尿外科雜志,2014,19(10):670-672.

[2]咼林杰,李成龍,汪濤,等.琥珀酸索利那新片治療和預(yù)防雙J管患者下尿路癥狀[J].長江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版),2013,10(21):12-13.

[3]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015.

[4]肖林霞,李宏偉,于紅光,等.氣相色譜法測定寵物飼料中丙三醇、丙二醇、二甘醇研究[J].成都大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2013,32(2):128-130.

[5]魯剛,宗萬里.基于毛細(xì)管氣相色譜法的花色蛤中撲草凈殘留量測定[J].成都大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2015,34(4):336-338.

Determination of Residual Solvents in Raw Material Drug of Solifenacin Succinate by Head-space Gas Chromatography

YANGChen,RENFengying,WANGWei,HUANGXiao,GOUXiaojun,CHENLin,LIJianghong,SHIKejin

(Antibiotics Research and Reevaluation Key Laboratory of Sichuan Province,Sichuan Industrial Institute of Antibiotics, Chengdu University, Chengdu 610052， China)

The paper is going to establish the head-space gas chromatography for the determination of residual solvents of ethanol,acetone,ethyl acetate,isopropyl ether,dichloromethane,toluene in raw material drug of solifenacin succinate.Agilent DB-624 capillary column is used,with FID as detectorand DMF as the solvent.The results show that linear responses are obtained for the 6 residual solvents in their respective concentration ranges (r=0.9997～0.9999,n=6),and the limits of detection are 0.147～0.871 μg.The average recoveries are 98.64%～101.79%(RSD=0.26%～1.58%,n=3).The conclusion drawn from the paper is that the method is simple,sensitive,and accurate for the analysis and determination of residual solvents in raw material drug of solifenacin succinate.

Gas Chromatography(GC);head-space sampling;residual solvents;solifenacin succinate

1004-5422(2016)04-0321-03

2016-10-18.

成都大學(xué)?？萍及l(fā)展基金(2015XJZ08)資助項(xiàng)目.

楊 晨(1983 — )， 男， 碩士， 助理研究員， 從事藥物質(zhì)量控制技術(shù)研究.

O657.7+1；TQ460.72

A