王育純　梁士兵　魏超峰　蔡貞浩　王春巧　徐凌川

1.山東中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，山東　濟南　250000；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東　濟南　250000

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實驗研究

肉靈芝、靈芝、槐耳菌及蟬花菌對S180肉瘤小鼠的抗腫瘤活性研究

王育純1梁士兵1魏超峰1蔡貞浩1王春巧1徐凌川2

1.山東中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，山東濟南250000；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東濟南250000

【摘要】目的：研究肉靈芝、靈芝、槐耳菌和蟬花菌的體內(nèi)抗腫瘤活性。方法：將健康雄性昆明種小鼠接種S180肉瘤后隨機分為對照組、環(huán)磷酰胺組、肉靈芝浸出液組、肉靈芝水煎液組、靈芝水煎液組、槐耳菌水煎液組和蟬花菌水煎液組，給藥后觀察對各組小鼠生存質(zhì)量、抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)。結(jié)果：肉靈芝浸出液、肉靈芝水煎液、靈芝水煎液、槐耳菌水煎液、蟬花菌水煎液對小鼠的抑瘤率分別為18.3%、13.1%、46.6%、34.2%、22.5%，靈芝組抑瘤作用顯著(P<0.05)；各組胸腺、脾臟指數(shù)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：上述藥物對小鼠體內(nèi)腫瘤有一定抑制作用。

【關(guān)鍵詞】肉靈芝；靈芝；槐耳菌；蟬花菌；S180；抗腫瘤

研究肉靈芝、靈芝、槐耳菌和蟬花菌對小鼠體內(nèi)S180肉瘤的抗腫瘤活性，為挖掘抗腫瘤新藥及進(jìn)一步研究上述藥物抗腫瘤作用提供實驗依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物SPF級健康雄性昆明種小鼠，體重(20±2)g，購于魯康動物飼料經(jīng)銷中心(合格證號：SCXK魯20130001)；S180肉瘤株由山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院惠贈。

1.1.2藥品與試劑肉靈芝、靈芝、槐耳菌和蟬花菌由山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院生藥系徐凌川教授提供；環(huán)磷酰胺(批號：04121002，山西普德藥業(yè)股份有限公司)；0.9%生理鹽水(批號：1501272162，辰欣藥業(yè)股份有限公司)。

1.1.3儀器PH100-DB500U光學(xué)顯微鏡(鳳凰光學(xué)集團(tuán)有限公司);JA5003N電子分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)。

1.2實驗方法

1.2.1瘤株移植方法[1]S180腹水瘤細(xì)胞株經(jīng)昆明種小鼠腹腔移植傳代，一周后無菌操作從小鼠腹腔抽取腹水瘤細(xì)胞液，用生理鹽水調(diào)至1×107/ml。然后分別在實驗組的每只小鼠右前腋下接種0.2ml。

1.2.2分組及給藥取健康雄性昆明種小白鼠64只(體重18~22g)，隨機分為8組，每組8只，接種次日開始給藥。對照組用20ml/kg的生理鹽水灌胃；環(huán)磷酰胺組腹腔注射25mg/kg環(huán)磷酰胺，連續(xù)給藥5d；肉靈芝、靈芝、槐耳菌和蟬花菌水煎液組均配制成12.5g/100ml的濃度，20ml/kg灌胃，連續(xù)給藥10d。肉靈芝浸出液組直接取無菌肉靈芝浸出液，20ml/kg灌胃，連續(xù)給藥10d。

1.2.3觀察指標(biāo)觀察小鼠體重變化，以及肉瘤生長速度和小鼠飲食、活動、皮毛狀況等生存質(zhì)量；末次用藥次日稱重,頸椎脫臼處死并完整剝離腫瘤、胸腺和脾臟，使用電子分析天平稱重并記錄，抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)計算方法如下。

2結(jié)果

2.1對小鼠生存質(zhì)量的影響對照組小鼠腋下腫瘤生長明顯；環(huán)磷酰胺組腋下腫瘤生長緩慢，但皮毛色澤欠佳，體重低于其他組，活動減少，生存質(zhì)量受到影響；肉靈芝浸出液組、肉靈芝水煎液組、靈芝水煎液組、槐耳菌水煎液組和蟬花菌水煎液組小鼠腋下腫瘤較對照組小，皮毛色澤正常，飲食和活動尚可。

2.2對小鼠實體瘤抑瘤率、胸腺、脾臟指數(shù)的影響由表1可知，靈芝組、環(huán)磷酰胺組對小鼠S180肉瘤具有明顯抑制作用，環(huán)磷酰胺組給藥后體重與其他組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)。由表2可知，環(huán)磷酰胺組小鼠胸腺質(zhì)量明顯下降，而脾臟由于充血壞死質(zhì)量略微升高，提示對S180肉瘤小鼠有免疫抑制作用，其余各組的胸腺、脾臟指數(shù)與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

±s，n=8)

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

表2肉靈芝、靈芝、槐耳菌和蟬花菌

組別劑量/g/kg胸腺指數(shù)/mg/g脾臟指數(shù)/mg/g對照組1.59±0.743.38±1.01環(huán)磷酰胺組0.0250.59±0.32*4.83±1.37肉靈芝浸出液組1.2501.63±0.834.33±1.54肉靈芝水煎液組1.2501.93±0.934.41±1.46靈芝水煎液組1.2501.65±0.554.14±2.42槐耳菌水煎液組1.2501.84±0.465.27±1.00蟬花菌水煎液組1.2502.10±0.663.45±1.27

注：與對照組相比，*P<0.05。

3討論

肉靈芝又稱太歲，研究發(fā)現(xiàn)肉靈芝含有核酸、微量元素和蛋白質(zhì)等物質(zhì)，對人體的抗衰老有益[2]。靈芝為多孔菌科真菌靈芝的子實體，《神農(nóng)本草經(jīng)》根據(jù)顏色將其分為赤芝、黑芝、青芝、白芝、黃芝和紫芝六種，有“輕身不老，延年神仙”之說。蟬花菌俗稱大蟲草，具有增強免疫、抗腫瘤等活性[3]?；倍鸀槎嗫拙普婢彼ň淖訉嶓w，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)的作用[4]。環(huán)磷酰胺的抗腫瘤作用雖明顯，但具有免疫抑制等不良作用，影響S180肉瘤小鼠的生存質(zhì)量。

探索真菌類藥物的抗腫瘤活性是尋找抗腫瘤新藥的有效途徑。本研究發(fā)現(xiàn)，肉靈芝浸出液、肉靈芝水煎液、靈芝水煎液、槐耳菌水煎液、蟬花菌水煎液對小鼠的抑瘤率分別為18.3%、13.1%、46.6%、34.2%、22.5%。環(huán)磷酰胺嚴(yán)重影響小鼠免疫功能，可見小鼠脾臟顏色變深發(fā)黑，小鼠精神萎靡，活動度下降；而靈芝等組小鼠生長良好，精神狀態(tài)佳。

綜上所述，肉靈芝、靈芝、槐耳菌、蟬花菌對S180肉瘤小鼠腫瘤具有一定的抑制作用，靈芝水煎液組抑瘤率為46.56%，抑瘤作用明顯，但其抗腫瘤作用機制還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]董蘭鳳，劉京生，苗智慧，等. 附子多糖對p2和S180荷瘤小鼠的抗腫瘤作用研究[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2003，09:14-17.

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[3]許洪義，朱燕，程東慶，等.中藥蟬花的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2008，25(5):27-29.

[4]張書琳.槐耳及其復(fù)方制劑槐杞黃顆粒的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2015，21(1):114-116.

Antineoplastic effect ofMeat-likeGanodermalucidum,Ganodermalucidum,Trametes

robiniophilaandCordycepscicadae on mice transplanted with S180 cells

WANG Yuchun1LIANG Shibing1WEI Chaofeng1CAI Zhenhao1WANG Chunqiao1XU Lingchuan2

1.School of Basic Medical Sciences,Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250000, China;

2.School of Pharmaceutical Sciences, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250000,China

Abstract:ObjectiveTo study the Antineoplastic effect in vivo ofMeat-likeGanodermalucidumsolution(MGLS),Meat-likeGanodermalucidumdecoction(MGLD),Ganodermalucidumdecoction (GLD),Trametesrobiniophiladecoction (TRD) and Cordyceps cicadae decoction (CCD).Methods The 56 Kunming mice which transplanted with S180 cells were divided into 7 group,and then the mice were given the listed drugs respectively.Results The quality of life,the inhibiting rate of tumor growth,thymus index，spleen index were evaluated.Results show that the inhibiting rate of tumor growth was 18.3%(MGLS),13.1%(MGLD), 46.6%(GLD),34.2%(TRD),22.5%(CCD).On the antineoplastic effects the difference between GLD group and the control group were significant(P<0.05).There was no statistical significance between the 5 group and the control group in thymus index and spleen index.Conclusion The study concluded that these drugs have inhibition effect on tumor in mice.

Key words:Meat-likeGanodermalucidum;Ganodermalucidum;Trametesrobiniophila;Cordycepscicadae; S180; antineoplastic

(收稿日期：2015.10.13)

【中圖分類號】R285.5

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)01-0014-02

通信作者：徐凌川(1962-)，男，教授，碩士研究生導(dǎo)師，主要從事中藥資源開發(fā)、藥用真菌學(xué)的研究。E-mail：xulingchuan518@sina.com

基金項目：山東中醫(yī)藥大學(xué)2014年度大學(xué)生研究訓(xùn)練計劃(SRT)項目(2014302)。