張錄民 姚健 陳玲玲 楊瑞光

FS、MUC1基因在非小細(xì)胞肺癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義

張錄民 姚健 陳玲玲 楊瑞光

目的 研究非小細(xì)胞肺癌患者血清中卵泡抑素（FS）和粘蛋白（MUC1）表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)移的關(guān)系及其臨床意義。方法采集60例肺部腫瘤入院患者的血清樣本，其中非小細(xì)胞肺癌40例，肺部良性腫瘤20例，分別采用ELISA法和CanAgMUC1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)其血清中FS和MUC1含量。結(jié)果 40例非小細(xì)胞肺癌患者血清中FS和MUC1的血清含量、陽(yáng)性率均高于對(duì)照組（P＜0.01）。結(jié)論FS、MUC1與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、生物學(xué)特征以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，聯(lián)和檢測(cè)這些指標(biāo)有利于非小細(xì)胞肺癌的早期診斷以及預(yù)后判斷。

FS基因；MUCI基因；非小細(xì)胞肺癌；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

肺癌在臨床中十分常見(jiàn)，對(duì)其早發(fā)現(xiàn)、早診治可有效提高患者的治療效果。卵泡抑素（FS）也即激活素結(jié)合蛋白，有研究發(fā)現(xiàn)[1-2]FS-Activin A與肺小細(xì)胞癌可能存在一定的相關(guān)性。本研究以ELISA法、CanAgMUC1檢測(cè)試劑盒對(duì)患者血清內(nèi)FS、MUC1水平進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)收集吉林省人民醫(yī)院2015年1～6月非小細(xì)胞肺癌患者40例，均行肺癌根治術(shù)，并經(jīng)病理診斷。按照國(guó)際肺癌研究協(xié)會(huì)2009年發(fā)布的肺癌TNM分期，其中I期4例，Ⅱ期18例，Ⅲ期15例，Ⅳ期3例。根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)分型：其中肺鱗狀細(xì)胞癌27例，肺腺癌13例。男性33例，女性7例，年齡42～79歲，平均（52.5±4.6）歲。對(duì)照組：肺部良性疾病20例，其中經(jīng)病理診斷為炎性假瘤4例，肺膿腫12例，肺結(jié)核瘤3例，錯(cuò)構(gòu)瘤1例。男性為12例，女性為8例。年齡41～63歲，平均（48.9±6.8）歲。全組病例術(shù)前均未行放化療。

1.2 方法

在空腹?fàn)顟B(tài)下采集3 ml靜脈血，以3 000 r/min離心10 min，在-80℃環(huán)境中保存。以FS雙位點(diǎn)ELISAE[3]進(jìn)行檢查，其中酶聯(lián)免疫測(cè)定儀測(cè)490砌光吸收值（A490砌），進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，借助標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣本內(nèi)FS水平進(jìn)行檢測(cè)，以低于2.8 ng/ml為正常值。以CanAgMUC1檢測(cè)試劑盒對(duì)患者血清內(nèi)MUC1含量進(jìn)行檢測(cè)。正常值為低于20 U/ml，根據(jù)相關(guān)說(shuō)明展開(kāi)操作。

1.3 結(jié)果判斷

采用FS雙位點(diǎn)ELISAE。測(cè)定血清FS正常參考值2.8 ng/ml。高于正常值為陽(yáng)性。參考試劑盒確定MUC1參考值≥20 U/ml。FS和MUC1聯(lián)檢中如果有一項(xiàng)為陽(yáng)性者即為陽(yáng)性病例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究以SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料以（±s） 表示，并進(jìn)行t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組FS血清含量及陽(yáng)性率比較

肺癌組FS的血清含量及陽(yáng)性率分別為（3.65±1.33）ng/ml、32.50%，20例對(duì)照組中、FS血清含量及陽(yáng)性率分別為（2.82±0.31）ng/ml、0.00%，其血清含量均小于參考值。肺癌組MUC1的血清含量及陽(yáng)性率分別為（38.63±23.21）U/ml、47.50%，20例對(duì)照組中，肺膿腫有1例呈陽(yáng)性，但其血清值均小于38.63 U/ml。肺癌組和對(duì)照組此兩項(xiàng)指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.2 鱗狀細(xì)胞癌與腺癌FS及MUC1血清含量、陽(yáng)性率比較

病理分型中，鱗狀細(xì)胞癌與腺癌FS（3.77±0.23）ng/ml、（3.48±1.25）ng/ml， MUC1血 清 含 量（39.31±16.87）U/ml、（36.33±21.36）U/ml及陽(yáng)性 率33.33%與30.70%、51.85%與46.15%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 肺癌血清中FS陽(yáng)性組與陰性組MUC1含量及陽(yáng)性率比較

肺癌患者血清中FS陽(yáng)性組MUC1含量（38.47±6.60）ng/ml高于FS陰性組（18.63±7.32）ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），F(xiàn)S陽(yáng)性組的MUC1陽(yáng)性率84.62%，亦高于FS陰性組的33.33%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

3 討論

現(xiàn)階段腫瘤疾病的診斷多需借助腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，肺癌腫瘤標(biāo)志物中以癌胚抗原（CEA）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）使用的較為廣泛[4-5]。但其診斷時(shí)陽(yáng)性率約為60%，且有一定的假陽(yáng)性存在，因此仍需探討更為優(yōu)良的腫瘤標(biāo)志物。

卵泡抑素對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化、腎、皮膚、腦損傷、皮膚損傷、肺或肝纖維化等疾病發(fā)展發(fā)揮著一定作用，為分析其對(duì)于肺癌發(fā)病的影響，本研究以非小細(xì)胞肺癌患者為研究對(duì)象[6]，疾病包括肺鱗狀細(xì)胞癌、肺腺癌。肺部良性疾病組，其中包括炎性假瘤、肺膿腫、肺結(jié)核瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤。以ELISA法檢測(cè)病人外周血循環(huán)FS，發(fā)現(xiàn)。肺癌組與對(duì)照組的FS與MUC1差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）?？梢?jiàn)，肺癌患者外周血內(nèi)FS的表達(dá)水平較高，這可能是因腫瘤細(xì)胞分泌所致[7]。腫瘤細(xì)胞膜上MUC1可借助高度表達(dá)而對(duì)整合素、鈣粘連素表達(dá)加以干預(yù)，對(duì)型膠原酶合成發(fā)揮影響；同時(shí)，MUC1可于細(xì)胞表面上大量表達(dá)，促使細(xì)胞與細(xì)胞之間、細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)之間的黏附減少，從而為腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)的腫瘤位置提供便利，這對(duì)于腫瘤轉(zhuǎn)移而言更為有利。癌組織中MUC1表達(dá)有糖基化不完全、畸形糖基化現(xiàn)象，這些可導(dǎo)致MUC1核心蛋白中出現(xiàn)新糖抗原與新蛋白，且可在癌細(xì)胞表面廣泛分布，其可被免疫系統(tǒng)所識(shí)別而作為腫瘤特異性抗原存在[8]，MUCl在正常的肺、支氣管組織中和NSCLC的癌組織中均有表達(dá)，但在正常的外周血中該基因無(wú)表達(dá)或表達(dá)低，如果在NSCLC患者的外周血中檢測(cè)到MUCl基因較高的表達(dá)，就可考慮為癌轉(zhuǎn)移。

總之，我們認(rèn)為，對(duì)肺癌的診斷不能依靠單項(xiàng)檢測(cè)，應(yīng)該聯(lián)合檢測(cè)，尤其是FS與MUC1的聯(lián)合檢測(cè)，可以大大提高非小細(xì)胞肺癌的陽(yáng)性檢出率，為臨床提供更可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以滿足臨床的需求。

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Expression and Clinical Significance of MUC1 and FS Gene in the Serum of Patients With Non Small Cell Lung Cancer

ZHANG Lumin YAO Jian CHEN Lingling YANG Ruiguang Department of Thoracic Surgery, Jilin Provincial People’s Hospital, Changchun Jilin 130021, China

Objective To investigate the connection between the expression of FS and MUC1 proteins in the non-small cell lung cancer (NSCLC)

FS, MUC1, NSCLC, ELISA

R734

A

1674-9308（2016）33-0059-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.33.033

吉林省衛(wèi)生計(jì)生科技發(fā)展計(jì)劃資助項(xiàng)目（20142008）

吉林省人民醫(yī)院胸外科，吉林 長(zhǎng)春 130021

張錄民，E-mail：zhanglumin2008@sina.com

patients serum and tumor growth and metastasis, and to explore the clinical significance. Methods The serum samples of 60 patients with lung cancer were collected, including 40 cases of non small cell lung cancer and 20 cases of benign lung tumors. The serum levels of FS and MUC1 were detected by ELISA and CanAgMUC1 respectively. Results The content of serum FS and serum MUC1 in 40 cases of non-small cell lung cancer patients, the positive rate was significantly higher than that of the control group (P＜0.01). Conclusion FS and MUC1 proteins were closely related to tumoral occurrence, development, biological characteristics and transfer, and testing of the two proteins together will be helpful to the early diagnosis of non-small cell lung cancer and prognostic judgement.