沈建康,袁建明,蔡中瑞

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院普外科,上海 200020)

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CEA、CA199、CA724及HSP60在胃癌患者血清中的表達(dá)及應(yīng)用價(jià)值

沈建康,袁建明,蔡中瑞

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院普外科,上海 200020)

目的：探討腫瘤標(biāo)記物癌胚抗原(CEA)、糖類抗原19-9(CA199)、糖類抗原7-24(CA724)及熱休克蛋白60(HSP60)在胃癌患者血清中的表達(dá)及應(yīng)用價(jià)值。方法：采用電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法檢測(cè)胃癌組與正常對(duì)照組血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平，分析其與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期的關(guān)系及4項(xiàng)指標(biāo)單一、聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率。結(jié)果：CEA、CA199、CA724及HSP60在胃癌組中的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；血清CEA、CA199、CA724及HSP60的陽(yáng)性率與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)(P<0.05)；4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率達(dá)74.36%，明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)(P<0.05)。結(jié)論：胃癌患者血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平與胃癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，聯(lián)合檢測(cè)血清水平變化對(duì)胃癌診斷及病情變化的判斷具有重要意義。

胃癌;癌胚抗原;糖類抗原19-9;糖類抗原7-24;熱休克蛋白60

胃癌是危害人類健康的主要疾病之一，病發(fā)初始階段無(wú)明顯癥狀，確診時(shí)多已晚期，且常伴轉(zhuǎn)移。臨床治療胃癌的最佳準(zhǔn)則是早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早根治[1]。近年來，尋找腫瘤特異性抗原一直是腫瘤研究熱點(diǎn)，檢測(cè)血清中腫瘤標(biāo)志具有簡(jiǎn)單、迅速、非介入等優(yōu)點(diǎn)而廣泛用于臨床。癌胚抗原(CEA)、糖類抗原19-9(CA-199)、糖類抗原7-24(CA-724)是臨床常用的胃癌腫瘤標(biāo)志物，但均為非特異性抗原，聯(lián)合檢測(cè)能提高診斷準(zhǔn)確性[2-4]。熱休克蛋白60(HSP60)在胃癌組織中的表達(dá)明顯升高，同時(shí)其在胃癌患者血清中表達(dá)同樣高于正常人群，因此可作為一項(xiàng)新的胃癌腫瘤標(biāo)志物，以期提高胃癌的診斷敏感度。本研究應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)上述腫瘤標(biāo)志物在胃癌患者血清中的水平，分析其與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系及4項(xiàng)指標(biāo)單一、聯(lián)合測(cè)定對(duì)胃癌早期診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月至2014年12月于上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院普外科治療的胃癌患者39例為胃癌組。其中男性22例，女性17例；年齡50～74歲，平均(66.00±5.51)歲；按照國(guó)際癌癥基金會(huì)(UICC)新TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期，Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期26例。以體檢正常者41例為對(duì)照組，其中男性20例，女性21例；年齡55～74歲，平均(62.33±6.54)歲。

1.2 方法

采集兩組空腹外周靜脈血5 mL，分離血清后凍存于-80°C。采用AIA2000全自動(dòng)免疫分析儀及配套試劑盒檢測(cè)血清CEA、CA199、CA724，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明。臨界值設(shè)定：CEA>5 U/mL為陽(yáng)性，CA199>37 U/mL為陽(yáng)性，CA724>6.9 U/mL為陽(yáng)性。HSP60測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，所用試劑盒購(gòu)自于abcom公司，HSP60標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作按照說明書進(jìn)行，酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)測(cè)量光密度值(OD值)。以HSP60濃度為橫坐標(biāo)，其OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)樣品OD值從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到相應(yīng)濃度，HSP 60>0.7 μg/mL為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平比較

胃癌組血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平明顯高于對(duì)照，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 不同臨床分期及淋巴轉(zhuǎn)移胃癌患者血清CEA、CA199、CA724及HSP60陽(yáng)性率

有淋巴轉(zhuǎn)移的胃癌患者血清CEA、CA199、CA742及HSP60陽(yáng)性率差異顯著高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移的患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

臨床分期Ⅲ～Ⅳ期的胃癌患者血清各指標(biāo)陽(yáng)性率均顯著高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 2組血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平比較

*P<0.05，與對(duì)照組比較。

表2 不同臨床分期及有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移胃癌患者血清CEA、CA199、CA742及HSP60陽(yáng)性檢出率[n(%)]

臨床特點(diǎn)nCEACA199CA724HSP60淋巴轉(zhuǎn)移 無(wú)121(8.33)2(16.67)1(8.33)2(16.67) 有27 15(55.56)*17(62.96)*17(62.96)*18(66.67)*臨床分期 Ⅰ～Ⅱ133(23.08)2(15.38)1(7.69)3(23.08) Ⅲ～Ⅳ2613(50.00)#17(65.38)#17(65.38)#17(68.38)#

*P<0.05，與無(wú)轉(zhuǎn)移比較；#P<0.05，與Ⅰ～Ⅱ期比較。

2.3 血清CEA、CA199、CA724及HSP60的聯(lián)合診斷價(jià)值

CEA、CA199、CA724及HSP60單項(xiàng)指標(biāo)在胃癌患者血清中的陽(yáng)性檢出率較低(41.03%～51.28%)，4項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率達(dá)74.36%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表3)。

表3 血清CEA、CA199、CA724及HSP60的陽(yáng)性檢出率[n(%)]

*P<0.05，與單一檢測(cè)比較。

3 討論

腫瘤標(biāo)志物是在腫瘤發(fā)展過程中腫瘤細(xì)胞釋放或與宿主相互作用產(chǎn)生的出現(xiàn)于細(xì)胞、組織或體液中的一類物質(zhì)[5]，經(jīng)淋巴引流進(jìn)入血液循環(huán)，反映腫瘤的存在與生長(zhǎng)。其在血清中的含量除了受腫瘤組織產(chǎn)生量的影響，機(jī)體肝臟清除及膽道排泄能力也是重要的影響因素[6]。腫瘤標(biāo)志物在血清中的出現(xiàn)早于臨床癥狀的出現(xiàn)，因此在胃癌早期診斷、療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估中具有重要意義。

CEA是一種廣泛存在于消化道及胎兒血清中的非特異性腫瘤標(biāo)志物，常用于臨床消化道惡性腫瘤的診斷，因其為非特異性標(biāo)志物，故與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)以提高敏感性[7]。本研究中胃癌患者血清CEA陽(yáng)性率達(dá)41.03%，與既往研究[8]的陽(yáng)性檢出率23%～45%相符。CA199是一種從癌細(xì)胞株分離而來的糖蛋白抗原，與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。其在健康人群胃、結(jié)腸、子宮內(nèi)膜及胰腺等均可合成，在血清中含量較低，一些良性疾病發(fā)生時(shí)含量會(huì)略微升高[9]。消化系統(tǒng)出現(xiàn)惡性腫瘤時(shí)，癌細(xì)胞產(chǎn)生的CA199經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血液循環(huán)導(dǎo)致血清中含量明顯升高。目前血清CA199常用于胰腺癌的診斷、預(yù)后，目前有研究[10]報(bào)道CA199在胃癌患者血清中也存在一定表達(dá)，其在胃癌患者血清中陽(yáng)性率達(dá)36.43%，本研究CA199在胃癌患者血清中陽(yáng)性率達(dá)48.72%，與此報(bào)道一致，可見血清CA199可作為胃癌診斷和療效觀察的一個(gè)參考指標(biāo)。CA724是一種高分子量糖蛋白抗原[11]，在消化道腫瘤和卵巢癌患者血清中表達(dá)顯著升高，是胃癌診斷的首選血清，單一檢測(cè)胃癌的敏感性為40%～50%。本研究中單一檢測(cè)陽(yáng)性率為46.15%，與國(guó)內(nèi)學(xué)者研究結(jié)果[12]相似。熱休克蛋白(HSPs)是一種應(yīng)激蛋白，大量存在于原核及真核細(xì)胞中，在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)，已有研究[13-14]證實(shí)HSP與細(xì)胞轉(zhuǎn)化和惡變關(guān)系密切。HSP60是HSPs家族的重要成員之一，HSP60在胃癌腫瘤組織中的水平高于正常組織，但腫瘤組織檢測(cè)必須依賴組織活檢或者手術(shù)，不易常規(guī)開展。本研究中，胃癌組血清HSP60水平明顯高于對(duì)照組，可能因?yàn)榘┘?xì)胞產(chǎn)生的HSP60釋放至血液，引起外周血HSP60含量升高。本研究顯示，胃癌患者HSP60陽(yáng)性率達(dá)51.28%，與周高見[15]的研究結(jié)果接近。

觀察組血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平明顯高于對(duì)照組，提示檢測(cè)上述指標(biāo)在外周血中的水平對(duì)胃癌早期診斷意義重大。血清CEA、CA199、CA724及HSP60陽(yáng)性率與胃癌有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期相關(guān)，提示監(jiān)測(cè)血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平可用于胃癌早期診斷、判定胃癌的進(jìn)展、惡性程度及轉(zhuǎn)移。此外，本研究中CEA、CA199、CA724及HSP60單一指標(biāo)在胃癌患者血清中的陽(yáng)性檢出率較低，因此單一腫瘤標(biāo)志物在臨床上診斷僅具有輔助價(jià)值，4項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率達(dá)74.36%，明顯高于單一檢測(cè)，提示聯(lián)合監(jiān)測(cè)外周血中腫瘤標(biāo)志物可用于體檢、普查，對(duì)胃癌的診斷、判斷病情變化具有一定臨床價(jià)值。

[1] 鄭加榮,張敏,徐日,等.腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)在胃癌診斷和監(jiān)控治療中的臨床應(yīng)用[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2015,9(3):382-386.

[2] 杜翠霞.血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)對(duì)胃癌的診斷價(jià)值[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2012,25(6):540-541.

[3] 徐風(fēng)亮,吳鵬,徐日.血清腫瘤標(biāo)記物與卵巢良惡性腫瘤的相關(guān)性分析[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2013,7(6):83-85.

[4] 甘建春,劉寧,王德侯,等.血清腫瘤標(biāo)志物CEA、CA19-9及CA72-4在胃癌中的應(yīng)用價(jià)值研究[J].中華全科醫(yī)學(xué)雜志,2014,12(6):882-884,919.

[5] 焦艷.腫瘤標(biāo)志物對(duì)胃癌診斷及預(yù)后的評(píng)估價(jià)值[J].實(shí)用癌癥雜志,2013,28(6):614-616.

[6] 葉妙琴,廖奔兵.腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合病理學(xué)檢查在胃癌診斷中的臨床價(jià)值分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(11):1439-1440.

[7] Li XS,Xu Q,Fu XY,etal.Heat shock protein 22 overexpression is associated with the progression and prognosis in gastric cancer[J].J Cancer Res Clin Oncol,2014,140(8):1305-1313.

[8] Al-Zhoughbi W,Huang J,Paramasivan GS,etal.Tumor Macroenvironment and Metabolism[J].Seminars in Oncology,2014,41(2):281-295.

[9] Wu H,Wang W,Tong S,etal.Nucleostemin regulates proliferation and migration of gastric cancer and correlates with its malignancy[J].Int J Clin Exp Med,2015,8(10):17634-17643.

[10]袁立新,陳忠.胃癌患者血清CEA、CA199 及CA724 聯(lián)檢的臨床意義[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2011,11(12):2868-2869.

[11]吳玉波,劉干忠,王永良.血清CEA、CA199、CA724 聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胃癌的診斷價(jià)值 [J].疑難病雜志,2011,11(1):50-51.

[12]Shimada H,Noie T,Ohashi M,etal.Clinical significance of serum tumor markers for gastric cancer: a systematic review of literature by the Task Force of the Japanese Gastric Cancer Association[J].Gastric Cancer,2014,17(1):26-33.

[13]孟慶松,李向東,李獻(xiàn)忠,等.血清腫瘤標(biāo)志及熱休克蛋白60聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胃癌早期診斷的價(jià)值[J].中華腫瘤防治雜志,2009,12(23):1884.

[14]陳佳佳,吳榮.5種腫瘤標(biāo)志物在胃癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,40(8):752-754.

[15]周高見.熱休克蛋白27、60和90在胃癌中的表達(dá)及其臨床價(jià)值[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2016,26(1):69-75.

(學(xué)術(shù)編輯：任亦星)

Expression and application values of serum CEA, CA199, CA724 and HSP60 in patients with gastric cancer

SHEN Jian-kang,YUAN Jian-ming,CAI Zhong-rui

(DepartmentofGeneralSurgery,LuwanBranchHospitalofRuijinHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaoTongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200020,China)

Objective：To explore the expression and application values of tumor markers carcinoembryonic antigen(CEA),carbohydrate antigen19-9 (CA199),carbohydrate antigen7-24 (CA724) and heat shock protein60 (HSP60) in the serum of patients with gastric cancer.Methods：Electrochemiluminescence immunoassay and enzyme linked immunosorbent assays were used to detect the levels of serum CEA,CA199,CA724 and HSP60 in gastric cancer group and normal control group,so as to analyze their relationships with lymph node metastasis and clinical stages of gastric cancer as well as the positive rates of single and combined detection of above four indexes.Results：The expression levels of CEA,CA199,CA724 and HSP60 were markedly higher in gastric cancer group than those in control group,and there were significant differences (P<0.05).The positive rates of serum CEA,CA199,CA724 and HSP60 were in close association with lymph node metastasis and clinical stages of gastric cancer (P<0.05).The positive rate of the combined detection of above fours indexes was 74.36%,evidently higher than that of single detection (P<0.05).Conclusion：The levels of serum CEA,CA199,CA724 and HSP60 were closely associated with the occurrence and development of gastric cancer,and the combined detection of the level changes of above four indexes is of great significance in the diagnosis of gastric cancer and the evaluation of disease changes.

Gastric cancer;Carcinoembryonic antigen;Carbohydrate antigen19-9;Carbohydrate antigen7-24;Heat shock protein60

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.06.019

上海市黃浦區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)優(yōu)秀青年人才培養(yǎng)計(jì)劃(RCPY1409)

2016-07-02

沈建康(1980-)，男，碩士，主治醫(yī)師。

蔡中瑞，E-mail：mauricesjk@hotmail.com

時(shí)間：2017-1-3 22∶01

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170103.2201.038.html

1005-3697(2016)06-0848-03

R735.2

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