衛(wèi)茂玲

（四川大學(xué)華西醫(yī)院中國循證醫(yī)學(xué)中心，四川成都610041，maolingwei@hotmail.com）

醫(yī)學(xué)動物替代研究發(fā)展現(xiàn)狀研究

衛(wèi)茂玲

（四川大學(xué)華西醫(yī)院中國循證醫(yī)學(xué)中心，四川成都610041，maolingwei@hotmail.com）

目的了解我國動物替代研究發(fā)展現(xiàn)狀，發(fā)現(xiàn)問題，提出對策。方法文獻(xiàn)檢索與定性描述法。以主題、篇名或關(guān)鍵詞“動物替代”或“動物減少”或“動物優(yōu)化”精確檢索中文醫(yī)學(xué)常用數(shù)據(jù)庫中國知網(wǎng)、維普數(shù)據(jù)和萬方數(shù)據(jù)庫，補充查找相關(guān)研究參考文獻(xiàn)。納入分析組織建設(shè)、立法、醫(yī)學(xué)教育和替代研究方法文獻(xiàn)，并進行定性描述概括，檢索時間截止2015年7月20日。結(jié)果初檢引文219條，文獻(xiàn)發(fā)表于1999-2014年，以描述性研究為主。動物替代研究領(lǐng)域包括皮膚刺激、眼刺激毒理學(xué)檢測、熱敏試驗和動物模型替代等。替代研究信息交流平臺已建立，部分教師已經(jīng)在實踐運用替代原則，相關(guān)專著已出版，但法規(guī)建設(shè)和驗證體系滯后，替代研究認(rèn)識還不樂觀，驗證方法研究不多。結(jié)論國內(nèi)動物替代研究不多，缺乏系統(tǒng)化建設(shè)。未來應(yīng)加強動物替代研究體系研究，重點在立法、政策引導(dǎo)、醫(yī)學(xué)教育、人才培養(yǎng)和研究方法等。

非動物研究；替代動物檢測；替代動物使用；人性化教育；知識轉(zhuǎn)化

1　動物替代研究概述

1.1概念與內(nèi)容

動物替代研究（Nonanimal Alternatives），也叫非動物研究（Nonanimal Research），它是指利用替代活體動物的方法，實現(xiàn)生命科學(xué)及其他相關(guān)研究的實驗驗證目的。動物替代研究方法的理論代表為3R原則，替代（Replacement）、減少（Reduction）和優(yōu)化（Refinement）。其主要內(nèi)容包括：①減少動物的使用數(shù)量和時間；②以非動物模型來替代動物模型的使用；③優(yōu)化動物的使用方法，以減少給動物帶來的疼痛和不適等。

1.2分類

按研究范圍分，動物替代主要包括動物檢測替代（Animal Testing Alternatives）和動物使用替代（Animal Use Alternatives）。①動物檢測替代：在程序方面，以體外檢測方法代替動物整體檢測，如組織培養(yǎng)技術(shù)和數(shù)學(xué)模型等，提倡科學(xué)研究或?qū)嶒炇以\斷中使用替代動物的檢驗方法。②動物使用替代：在研究、檢驗和教育中使用替代動物的方法，以達(dá)到相同目的。按實驗動物替代的層次分為：非生物替代，如以數(shù)理化、計算機等方法替代；發(fā)育較低的動物替代較高動物，如魚、昆蟲等替代；減少型替代，實驗動物使用數(shù)量和時間；優(yōu)化型替代，若確實要進行動物實驗且沒有其他替代方法，注意優(yōu)化實驗程序，包括動物飼養(yǎng)、運輸、麻醉、實驗全過程、實驗結(jié)束及尸體處置等。

1.3動物實驗替代方法的驗證和批準(zhǔn)程序

一種新的動物實驗替代方法的誕生需經(jīng)過建立、優(yōu)化、驗證、評估和管理審批等程序。①替代方法的建立，要求必須具有一定的科學(xué)性、可靠性、有效性、可操作性和經(jīng)濟性以及應(yīng)用價值；②研究方案的優(yōu)化，其結(jié)果能夠較好地預(yù)測受試物的體內(nèi)生物學(xué)；③多個實驗室驗證：即在不同時間和地點驗證替代方法的相關(guān)性、可信性和重復(fù)性等；④同行評價，獨立評估替代方法的科學(xué)有效性、經(jīng)濟性、與特定目的適用性、倫理性等；⑤提交國家和國際專門管理機構(gòu)審核，按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)審核同意后，方可在實踐中推廣應(yīng)用。

1.4開展動物替代方法研究的必要性

開展動物替代研究，具有社會倫理、經(jīng)濟、人文教育和科學(xué)性等多重價值。首先，它順應(yīng)社會倫理發(fā)展需求。其次，可減少大量不必要的實驗動物經(jīng)費。第三，助推醫(yī)學(xué)實驗教學(xué)趨向更加人性化、創(chuàng)新高效的模式發(fā)展。第四，促使實驗設(shè)計更加合理，在科學(xué)有效性方面與人類疾病的相關(guān)性更好，直接、省時，避免動物模型在人體疾病預(yù)測方面的困難和不精確性，有利于醫(yī)學(xué)研究成果迅速向?qū)嵺`轉(zhuǎn)化。

2　國外動物替代研究起源與發(fā)展現(xiàn)狀

2.1國外動物替代研究起源、發(fā)展

國外替代研究起源于英國。1954年Charles Hume最先提出3R原則，Russell&Burch于1959共同代表《人性化的實驗技術(shù)原則》（The Principles of Humane Experimental Technique），被公認(rèn)為當(dāng)前該領(lǐng)域早期代表作。20世紀(jì)70年代，英國Dr Hadwen Trust基金和FRAME（Fund for Replacement Animal in Medical Experiments）基金為傳播3R原則、推動歐洲動物替代研究發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。FRAME實驗室1991年成立于英國諾丁漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院，主研急性毒性測試，如替代兔眼刺激試驗方法等，該實驗室許多研究已被當(dāng)作毒性測試動物替代研究的主流發(fā)現(xiàn)。實驗室使用的細(xì)胞來源于人體組織，而非塑料表面單層生長細(xì)胞，可復(fù)制人類生活環(huán)境的相關(guān)發(fā)現(xiàn)。目前細(xì)胞模型包括人體肝臟、骨骼肌、脂肪組織和皮膚，并創(chuàng)辦雜志Alternatives to Laboratory Animals（ATLA）。2013年1月16日，由英國倡導(dǎo)，全球首個教育和研究協(xié)作組啟動，呼吁全球科學(xué)家共同來發(fā)現(xiàn)、使用動物替代的方法，尋求更加符合倫理、與人類相關(guān)的治療措施研究、動物替代驗證方法，被視為醫(yī)學(xué)動物替代研究發(fā)展的一個重要里程碑［1］。

2.2機構(gòu)建設(shè)

全球替代研究組織機構(gòu)主要集中在英國、美國和歐洲經(jīng)濟發(fā)達(dá)國家和地區(qū)。據(jù)毒性測試非動物方法網(wǎng)站ALTTOX最近更新信息，截至2015年10月19日，歐洲替代研究機構(gòu)有47個，主要分布在英國、德國、荷蘭、法國、意大利、比利時、瑞士、瑞典、丹麥、挪威、葡萄牙等。美國替代研究組織有24個，亞太地區(qū)和南美等國家動物替代研究機構(gòu)包括澳大利亞、巴西、加拿大、日本和韓國等［2］。

2.3醫(yī)學(xué)人性化替代教育

歐洲人性化教育網(wǎng)絡(luò)（EuroNICHE）創(chuàng)建于1988年，2000年更改為國際人性化教育網(wǎng)絡(luò)（The International Network for Humane Education，InterNICHE），倡導(dǎo)并推動全球?qū)W生、教師和動物運動者，努力在生物科學(xué)、醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)教育中使用動物替代研究方法［3］。美國國家反活體解剖學(xué)會（The National Anti-Vivisection Society，NAVS），致力于構(gòu)建包括課堂內(nèi)外、對所有生物的同情、尊重和公正的世界，結(jié)束科學(xué)界對動物的濫用。在尊重倫理、科學(xué)和法律基礎(chǔ)上，通過對大量殘忍活體解剖和浪費等活動的宣傳教育，提高公眾對動物實驗替代方法的意識和積極尋找解決方案，推進人性化科學(xué)，支持研發(fā)使用替代動物產(chǎn)品，通過協(xié)作者個人和團體努力，幫助動物免除不必要的痛苦和傷害。開設(shè)生物學(xué)教育發(fā)展項目BioLEAP，為那些不愿意參加解剖實驗課的學(xué)生提供豐富的教育資源，利用21世紀(jì)教學(xué)工具，幫助老師和學(xué)校尋找介紹解剖課的替代品，提高學(xué)生對解剖、生理和生命科學(xué)的理解。在協(xié)會網(wǎng)站上還提供有成本效果和人性化的動物替代教室鏈接，以及保護學(xué)生擁有選擇使用替代解剖課程、法律和政策權(quán)利的相關(guān)信息［4］。

2.4立法建設(shè)

美國替代方法驗證協(xié)調(diào)委員會（The Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods，ICCVAM）成立于1997年，評估減少動物急性毒性測試，設(shè)計減少動物使用限定在較窄范圍的起始劑量［5］。歐盟2007年6月1日起實施化學(xué)品監(jiān)管體系，法規(guī)名稱為《化學(xué)品的注冊、評估、授權(quán)和限制》（REGULATION concerning the Registration，Evaluation，Authorization and Restriction of Chemicals），簡稱REACH法規(guī)。旨在保護人類健康和環(huán)境安全，保持和提高歐盟化學(xué)工業(yè)競爭力，研發(fā)無毒無害化合物的創(chuàng)新能力，增加化學(xué)品使用透明度，促進非動物實驗，追求社會可持續(xù)發(fā)展等。

歐盟是第一個實現(xiàn)禁止化妝品動物試驗立法地區(qū)，巴西、以色列、印度等國參考?xì)W盟立法，制定了本國禁止化妝品動物試驗立法。

2.5替代方法研究成果

據(jù)毒性測試非動物方法網(wǎng)站ALTTOX信息，至2014年9月30日，已有20個專題93項替代方法獲得認(rèn)可，包括：急性哺乳動物毒性、血液、吸入、殺蟲劑急性毒性檢測、生物和疫苗、腫瘤基因、慢性毒性、皮膚吸收/滲透、生態(tài)毒性、內(nèi)分泌活性替代物、眼腐蝕、刺激、遺傳毒性、光毒性、臨床前和非臨床藥物研發(fā)安全性研究（協(xié)調(diào)指導(dǎo)可減少動物使用）、熱源檢測、生殖與發(fā)育毒性、皮膚腐蝕、刺激、過敏等［5］。

2013年，美國哈佛大學(xué)Wyss研究所和AstraZeneca團隊使用一種芯片上的組織（organs-onchips）——一種微縮型的人類組織，由明確、可變多聚體，包含有少量導(dǎo)管，連接著人類活細(xì)胞，該芯片半透明，幫助優(yōu)化藥物測試，可觀察對動物和人體組織內(nèi)部作用，通過利用組織芯片來模擬器官的生物功能，為取代傳統(tǒng)的動物實驗提供了可能［7］。

3　我國動物替代研究現(xiàn)狀

筆者通過文獻(xiàn)復(fù)習(xí)法，以主題、篇名或關(guān)鍵詞“動物替代”或“動物減少”或“動物優(yōu)化”精確檢索中文醫(yī)學(xué)常用數(shù)據(jù)庫中國知網(wǎng)、維普數(shù)據(jù)和萬方數(shù)據(jù)庫，補充查找相關(guān)研究參考文獻(xiàn)。納入分析組織建設(shè)、立法、醫(yī)學(xué)教育和替代研究方法文獻(xiàn)，并進行定性描述概括，檢索時間截止為2015年7月20日。

初步檢出引文219條，主要發(fā)表于1999-2014年，發(fā)表最早的是王遵瓊在生理學(xué)實驗教學(xué)中實踐3R原則［8］。替代方法主要研究內(nèi)容包括：毒理學(xué)檢測、化妝品毒性檢測、眼刺激試驗替代方法；動物模型替代，以體外細(xì)胞實驗代替整體動物實驗；藥物代謝反應(yīng)和動物實驗教學(xué)等。

3.1國內(nèi)替代研究組織

廣東出入境檢驗檢疫局2010年成立中國替代方法研究評價中心，建立網(wǎng)站，為中國的替代方法技術(shù)、研究和標(biāo)準(zhǔn)搭建了研究信息共享和培訓(xùn)交流平臺，主要目標(biāo)包括：宣傳、普及、共享和推廣3R理念和替代方法；輔助科學(xué)家和其他人尋求進行替代方法研究；作為網(wǎng)絡(luò)信息中心——替代信息、文獻(xiàn)、數(shù)據(jù)庫、事件和其他咨詢；推動3R原則的認(rèn)可和體外新替代方法新技術(shù)應(yīng)用；促進國內(nèi)外動物福利和替代技術(shù)的合作交流。北京實驗動物學(xué)會2007年成立了實驗動物替代法研究會，并在雜志開設(shè)專欄，介紹國外3R研究及其在各學(xué)科的應(yīng)用［9］。

3.2立法與政策規(guī)定

中國化妝品動物試驗立法包括：《實驗動物管理條例》（1988年11月14日起施行）、《關(guān)于善待實驗動物的指導(dǎo)性意見》（科技部2006年9月13日發(fā)布）以及《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（衛(wèi)生部2007年1月4日印發(fā)）等。中國國家食品藥品監(jiān)督管理總局《關(guān)于調(diào)整化妝品注冊備案管理有關(guān)事宜的通告》規(guī)定，自2014年6月30日起，取消國內(nèi)非特殊用途化妝品強制性動物試驗的要求。國家科技部1997年在《關(guān)于“九五”期間實驗動物發(fā)展的若干意見》中把對3R研究列為資助重點。值得注意的是，歐洲藥典規(guī)定企業(yè)在破傷風(fēng)人免疫球蛋白（HTIG）研制階段應(yīng)建立與小鼠毒素中和試驗法（TNT）相當(dāng)?shù)捏w外免疫學(xué)檢測方法，如酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），但我國在原液、半成品和成品的效價檢測階段，TNT法仍為法定方法，未能與國際接軌［10］。

3.3國內(nèi)替代方法教育和出版

在生理學(xué)實驗中，教師已開始有意識應(yīng)用動物替代原則，優(yōu)化重組實驗課程，開展人性化醫(yī)學(xué)教育，節(jié)省動物消耗和動物經(jīng)費。例如，王遵瓊等主動采取較小動物平滑肌來代替大動物平滑肌的生理學(xué)實驗，減少動物數(shù)量，節(jié)約經(jīng)費［7］。還有學(xué)者2011年對中國部分地區(qū)實驗動物飼養(yǎng)機構(gòu)及使用情況進行調(diào)研，包括高校在校研究生、教師、生物制藥企業(yè)職員等專業(yè)人員，發(fā)現(xiàn)中國實驗動物使用現(xiàn)狀及實驗動物操作人員的實驗動物福利觀并不樂觀［10］。在出版發(fā)行方面，已有彭雙清等主編的《毒理學(xué)替代法》和程樹軍等主編的《實驗動物替代方法原理與應(yīng)用》等專著先后出版，對加快我國該領(lǐng)域理論和實踐應(yīng)用具有重要意義。

3.4國內(nèi)動物實驗替代方法研究進展

多名學(xué)者在進行快速替代方法研究，以代替?zhèn)鹘y(tǒng)耗時、耗費的整體動物皮膚刺激過敏和眼刺激試驗等。例如，平皿法雞胚試驗和人體斑貼試驗的結(jié)果一致，可用于評價化妝品的皮膚刺激性［11］。利用3T3細(xì)胞光毒性試驗評價化妝品光毒性是可行的［12］。利用人皮膚成纖維細(xì)胞與鼠尾膠原混合培養(yǎng)模擬真皮層進行細(xì)胞活性和細(xì)胞因子測定對10種農(nóng)藥腐蝕性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)人皮膚模型和動物測試結(jié)果一致性達(dá)到80%［13］。針對細(xì)胞來源及個體差異性問題，建議皮膚致敏性檢測模型未來應(yīng)尋找來源廣、性狀穩(wěn)定均一、與角質(zhì)形成細(xì)胞構(gòu)建三維模型復(fù)制性強、能體現(xiàn)Langerhans細(xì)胞相關(guān)功能的免疫細(xì)胞；對于終末檢測指標(biāo)確定，從細(xì)胞因子、表面標(biāo)記物發(fā)展到基因表達(dá)檢測和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究，提高檢測靈敏度多種檢測指標(biāo)組合［14］。采用免疫雞，從雞蛋清中收集提純抗體方法實現(xiàn)減少動物用量目的［15］。張華捷等分別用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和小鼠毒素中和試驗法（TNT）測定7家企業(yè)9批破傷風(fēng)人免疫球蛋白待檢品效價，發(fā)現(xiàn)兩種方法檢測結(jié)果一致性和相關(guān)性良好［9］。胚胎干細(xì)胞生物學(xué)特性決定其在藥物研發(fā)、藥物篩選過程中具有重要作用，尤其是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（hiPS）出現(xiàn)，hiPS可以針對不同人、不同部位進行取材，可以獲得各種類型終末細(xì)胞，進行靶組織、靶細(xì)胞的毒性評價。構(gòu)建基于胚胎干細(xì)胞的藥物安全性評價模型，可實現(xiàn)藥物研發(fā)及安全性評價個性化，提高藥物治療、藥物研發(fā)針對性，并且可以避免動物實驗帶來的種屬差異，降低藥物研發(fā)費用、縮短研發(fā)周期，是藥物大規(guī)模篩選的理想平臺［16］。采用綿羊紅細(xì)胞（SRBC）體外溶血試驗測定32種化妝品篩選配方或終配方樣品半數(shù)溶血濃度，并與家兔眼刺激試驗結(jié)果比較。結(jié)果表明，32個樣品中有5個樣品具有輕微眼刺激性，其余樣品均無眼刺激性。結(jié)果顯示，SRBC溶血試驗可以用于替代化妝品的動物眼刺激試驗［17］。

4　小結(jié)

替代研究是隨著科技進步和社會需要而不斷發(fā)展，尤其是細(xì)胞、組織培養(yǎng)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)與代謝組學(xué)、計算機模擬輔助評價系統(tǒng)等發(fā)展，使得以前需要活體動物進行的研究可以全部或部分利用體外方法實現(xiàn)。我國部分實驗室和研究人員在生物制品、藥品研發(fā)、化妝品安全性檢測、體外毒性測試、醫(yī)療器械安全性評價等方面進行了相關(guān)研究，但與國外替代方法發(fā)展相比，相關(guān)研究數(shù)量、內(nèi)容、方法和范圍有限，驗證程序尚處于探索階段，工作缺乏系統(tǒng)性，在立法體系、人性化教育和替代方法學(xué)研究等方面滯后于國際水平。

為此，有必要借鑒國際動物替代研究先進管理理念和方法技術(shù)，成立醫(yī)學(xué)動物替代研究協(xié)作與教育信息資源共享中心。系統(tǒng)發(fā)展動物替代方法學(xué)研究，設(shè)立基金和獎項，喚醒公眾意識，推動各級各類生命科學(xué)相關(guān)的院校重視人性化的動物替代管理與教學(xué)方法，鼓勵動物實驗替代方法研究及培訓(xùn)，建立醫(yī)學(xué)實驗替代方法研究數(shù)據(jù)庫，提供人性化的動物替代教學(xué)資源，保護學(xué)生擁有選擇替代解剖課的權(quán)利，推動非動物實驗立法，推動創(chuàng)新、人性化生命科學(xué)研究策略和人才培養(yǎng)模式，促進科研成果迅速向?qū)嵺`轉(zhuǎn)化，促進人與自然、環(huán)境、生態(tài)和社會健康可持續(xù)發(fā)展。

［1］World＇s First for Animal Replacement Science Announced［EB/OL］.（2013-01-16）［2015-10 -30］.http：//www.drhadwentrust.org/latestnews/news-and-views/post/171-worlds-first -for-animal-replacement-science-announced.

［2］Organizations&Associations［EB/OL］.（2015-10-23）［2015-10-30］.http：//alttox.org/resource-center/organizations-associations/.

［3］About InterNICHE.［EB/OL］.（2013-01-20）［2015-10-30］.http：//www.interniche.org/ en/about.

［4］Biology Education Advancement Program—BioLEAP［EB/OL］.（2015-09-27）［2015-10-30］.http：//www.navs.org/education/animals-in-education.

［5］Table of Validated&Accepted Alternative Methods［EB/OL］.（2015-09-27）［2015-10-30］. http：//alttox.org/mapp/table-of-validatedand-accepted-alternative-methods/.

［6］AstraZeneca，Wyss Institute To Develop Animal Organs-on-Chips［EB/OL］.（2015-09-27）［2015-10-30］.http：//www.dddmag.com/ news/2013/10/astrazeneca-wyss-institute-develop-animal-organs-chips.

［7］王遵瓊，鄭世玲，王過渡.改進動物腸平滑肌取材進行實驗的質(zhì)效比較研究［J］.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志，1999，15（3）：286-287.

［8］胡建武.北京實驗動物學(xué)學(xué)會舉辦學(xué)術(shù)講座暨成立實驗動物替代法專業(yè)委員會［J］.實驗動物科學(xué)，2007，35（4）：7.

［9］張華捷，顧磊，趙建榮，等.酶聯(lián)免疫吸附法測定破傷風(fēng)人免疫球蛋白效價的試驗研究［J］.藥物分析雜志，2012（10）：1722-1725，1717.

［10］張國偉，扆雪濤，彭濤，等.實驗動物替代技術(shù)在中國實驗動物部分調(diào)查初步報告［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2011；21（10，11）：144-149.

［11］楊曉冉，鄭洪艷，董益陽，等.五種化妝品的皮膚刺激性：平皿法雞胚試驗評價［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13（29）：5673 -5679.

［12］楊曉冉，鄭洪艷，董益陽，等.兩種3T3光毒性試驗方法在防曬化妝品光毒性評價中的應(yīng)用［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13（34）：6765-6768.

［13］樊國彪，王學(xué)民.皮膚刺激體外模型在化妝品安全性評價中的應(yīng)用［J］.毒理學(xué)雜志，2011，25（1）：64-67.

［14］曹玉萍，馬鵬程，劉維達(dá).皮膚致敏性動物替代模型的研究進展［J］.中國美容醫(yī)學(xué)，2009，18（2）：268-271.

［15］楊曉冉，董益陽，李銘，等.應(yīng)用雞胚尿囊絨膜錐蟲藍(lán)吸收法評價化學(xué)物質(zhì)的眼刺激性［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13（8）：1509 -1512.

［16］趙增明，方海琴，何俊，等.胚胎干細(xì)胞毒性評價模型的建立及其在藥物安全性評價中的應(yīng)用［J］.中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2013，27（3）：487-488.

［17］陸澤安，鄭賽華，馬來記，等.綿羊紅細(xì)胞溶血試驗用于化妝品眼刺激試驗的動物替代方法研究［J］.日用化學(xué)品科學(xué)，2013，36（1）：23-27.

〔修回日期2016-02-03〕

〔編輯吉鵬程〕

Study on the Current Status of Medical Alternative Animal Researches

WEI Maoling
（Chinese Cochrane Centre，West China Hospital，Sichuan University，Chengdu 610041，China，E-mail：maolingwei@hotmail.com）

Objective：To investigate the current status of alternative animal researches in China and thus find the problems and put forward countermeasures.Method：This study was carried out by the methods of literature search and qualitative description.The authors precisely searched the medicine databases commonly used in China（CNKI，VIP，and Wanfang Data）using the MeSH word，title，or keyword namely"animal alternative"，"animal decrease"or"animal optimization"，and added to find the related researches＇references.Then the author included the literature regarding to the organization construction，legislation，medical education，and alternative research methods，and conducted a qualitative description.The deadline was July 20，2015.Results：There were 219 initial quotations published from 1999 to 2014，and mainly were descriptive researches.The fields of alternative animal researches included skin and eye stimulating toxicology test，thermal hyperalgesia and animal model replacement，and etc.The information communication platform of replacement researches had established，part of teachers were in practice using the substitution principle，the related monographs had been published，but the law and regulation construction and validation system were lag，the cognitive of replacement researches was not optimistic，and the validation method researches were insufficient.Conclusion：The domestic alternative animal researches were insufficient and lacking of systematic construction.It should strengthen the study on alternative animal research system，focused on legislation，policy leading，medical education，talent cultivation，and research methods.

Non-animal Research；Alternative Animal Test；Alternative Animal Use；Humanistic Education；Knowledge Translation

R-052

A

1001-8565（2016）02-0304-04

2015-12-27〕