周亞玲

(四川省成都市第六人民醫(yī)院檢驗科，四川成都 610051)

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NSE和MMP-9檢測在腦膜炎中的診斷價值

周亞玲

(四川省成都市第六人民醫(yī)院檢驗科，四川成都 610051)

摘要:目的評價神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)對化膿性腦膜炎和病毒性腦膜炎的診斷價值。方法分別采用雙抗體夾心、化學(xué)發(fā)光法測定檢測60例腦膜炎患者和25例健康對照者腦脊液及血清內(nèi)MMP-9及NSE水平。結(jié)果化腦組病腦組分別與對照組比較，化腦組與病腦組比較，,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05) 。結(jié)論MMP-9、NSE參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦功能損傷的病理生理過程,監(jiān)測腦脊液中MMP-9、NSE的水平可作為化膿性腦膜炎和病毒性腦炎早期輔助診斷、鑒別診斷指標(biāo)。

關(guān)鍵詞:化膿性腦膜炎;病毒性腦膜炎;神經(jīng)元特異性烯醇酶;基質(zhì)金屬蛋白酶

化膿性腦膜炎、病毒性腦膜炎是兒科常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性危重疾病，新生兒臨床表現(xiàn)不典型，可不表現(xiàn)出腦膜刺激征，一旦發(fā)病病死率及發(fā)生后遺癥的比例較高，故早期診斷和及時正確的治療就尤為重要。目前常用的檢測手段為腦脊液(CSF)生化和細胞計數(shù)、血培養(yǎng)檢查等，但腦脊液生化、細胞計數(shù)影響因素較多，血培養(yǎng)耗時長，陽性率偏低。如何發(fā)現(xiàn)更加特異快速的生化指標(biāo)檢測腦組織的損害程度,顯得尤為重要[1-2]。

本研究測定腦膜炎患兒腦脊液和血清中神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs) 活性水平，探索對不同類型腦膜炎臨床診斷的意義和價值，以達到早期輔助診斷、鑒別診斷目的 。

1資料與方法

1.1一般資料觀察組60例，為2010年1月至2014 年12月成都市第六人民醫(yī)院收治且經(jīng)臨床確診的腦膜炎患兒(均有發(fā)熱、意識障礙，符合《臨床神經(jīng)病學(xué)》所制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且排除結(jié)核性腦膜炎),其中男 33 例,女27例，年齡4個月至 12 歲，其中化膿性腦膜炎組(即化腦組)32例,病毒性腦膜炎組(即病腦組)28 例 。對照組25例，為同期住院的非中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變的外科手術(shù)患兒,其中男15例,女10例，年齡3個月至13歲,無嚴(yán)重心、肺、肝、腎等相關(guān)疾病,腦脊液常規(guī)、生化檢查正常。兩組間年齡、性別比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05) 。

1.2標(biāo)本采集觀察組患兒于急性期(入院后24 h之內(nèi))無菌條件下行腰穿留取CSF 0.5 mL,同時抽血 3 mL,室溫下3 000 r/min離心15 min取上清液存于-20 ℃冰箱。對照組采集同量的腦脊液，同時抽血，方法同觀察組 。

1.3儀器與試劑雙抗體夾心ABCELISA法試劑盒購自美國R&D公司，測定NSE水平采用美國Roche公司Elecsys 2010全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及原裝試劑。標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品有生產(chǎn)廠家提供。

1.4方法采用雙抗體夾心ABC酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測血清和腦脊液中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)。

2結(jié)果

由表1可見，各組患兒CSF及血清內(nèi)MMP-9及NSE水平對比，化膿性腦膜炎組CSF及血清內(nèi)MMP-9，N S E活力明顯高于病毒性腦膜炎組和對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。病毒性腦膜炎組CSF及血清內(nèi)MMP-9，N S E活力明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。

表1　　各組患兒腦脊液及血漿內(nèi)MMP-9及NSE

*：P<0．05，與對照組比較；▽：P<0．05，與病腦組及對照組比較。

由表2可見，不同預(yù)后結(jié)果比較結(jié)果顯示，MMP-9和NSE水平隨著病情的好轉(zhuǎn)呈現(xiàn)遞減趨勢，在治愈與好轉(zhuǎn)患兒之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表2　　不同預(yù)后患兒MMP-9和NSE檢測

腦脊液中MMP-9和NSE診斷化膿性腦膜炎、病毒性腦膜炎的價值見表3、4。

表3　　腦脊液中MMP-9和NSE診斷化膿性

表4　　腦脊液中MMP-9和NSE診斷病毒性

3討論

小兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染由于患兒本身病情復(fù)雜多變，加之越來越多抗生素的濫用使得早期診斷和鑒別診斷十分困難，傳統(tǒng)的檢測方法區(qū)分化膿性腦膜炎和病毒性腦炎比較局限。因此,就需要尋找一個早期診斷和鑒別診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的可靠指標(biāo),使中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染能被準(zhǔn)確診斷和及時治療。

MMPs是一組結(jié)構(gòu)與功能同源的鋅離子依賴性中性蛋白酶超基因家族，可由體內(nèi)中性粒細胞，巨噬單核細胞及血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生[3]。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中，MMP-9參與多種病理生理活動，可協(xié)同降解多種細胞外基質(zhì)(ECM)成分，促進炎癥性浸潤的發(fā)生，破壞血腦屏障(BBB)，崩解神經(jīng)血管單位，對血神經(jīng)屏障水腫的形成起促進作用[4-6]。

本研究發(fā)現(xiàn)化膿性腦炎組與病毒性腦炎組和對照組相比較，化膿性腦炎組較病毒性腦炎組明顯增高。國外研究顯示，MMP-2，MMP-9尤其是MMP-9在化膿性腦膜炎腦脊液中水平增高表達增強[7]，與本文研究一致。這表明腦脊液中MMP-9的水平與腦炎的嚴(yán)重程度具有很好的正性相關(guān)，隨著臨床患兒腦損傷的加重，炎癥性侵入對血腦屏障的破壞亦加重，腦脊液中的MMP-9水平隨之上升，這對病情的判斷及預(yù)后有具有重要的評估意義。

在本研究中，化膿性腦膜炎患兒腦脊液中MMP-9明顯高于病毒性腦膜炎組，診斷化膿性腦膜炎特異度為62.8 %,靈敏度為 71.6%,遠高于診斷病毒性腦膜炎的特異度42.9 %，靈敏度 56.3%。說明腦脊液中MMP-9可作為鑒別診斷化膿性腦膜炎與病毒性腦膜炎的一個敏感和特異的參考指標(biāo)。

MMP-9的合成與分泌受多種因素的調(diào)節(jié)與影響，最初以酶原形式存在，其活化后才具有降解ECM的活性。由于活化后可產(chǎn)生相應(yīng)抑制物，有研究認為抑制MMP-9的活性對治療病毒性腦炎有輔助作用[8]。目前認為抑制物(TIMPs)是最重要的抑制物，但這一新途徑由于技術(shù)的限制還有待探索。

烯醇化酶是中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布的糖酵解途徑中的一個重要酶，催化2-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變成烯醇化丙酮酸。有α、β、γ 3種亞基以二聚體的形式組成5種同工酶。其中γγ型特異性地存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌組織胞漿中，稱為 NSE。當(dāng)中樞神經(jīng)遭受炎癥損害后NSE通過受損的胞膜及血腦屏障釋放入腦脊液和血液，引起的NSE濃度變化與腦損傷的程度呈密切的正相關(guān)[9]。臨床研究表示NSE是一個易檢測、具有高度特異度，穩(wěn)定性好的腦損傷標(biāo)志物，腦外傷，腦出血，顱內(nèi)感染及癲癇發(fā)作時腦脊液和血清中NSE均會升高，其升高程度與腦損傷程度密切相關(guān)[10]。

本研究發(fā)現(xiàn)化膿性腦炎組與病毒性腦炎和對照組相比較，腦脊液中NSE的水平明顯升高，且化膿性腦炎組較病毒性腦炎明顯增高。診斷化膿性腦膜炎特異度為83.9%,靈敏度為55.4%,遠高于診斷病毒性腦膜炎組。說明腦脊液中NSE濃度變化可作為鑒別診斷化膿性腦膜炎與病毒性腦膜炎敏感而特異的參考指標(biāo)。

綜上所述，監(jiān)測腦脊液中MMP-9、NSE的水平可以幫助判斷患兒大腦神經(jīng)元受損的情況，反映病情的輕重，作為化膿性腦膜炎和病毒性腦炎早期輔助診斷、鑒別診斷指標(biāo)，對指導(dǎo)治療及判斷預(yù)后有重要的作用。

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·臨床研究·

收稿日期：(2015-07-28)·臨床研究·

文獻標(biāo)識碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.047A

文章編號：1673-4130(2015)24-3619-03