許豪然　廖華軍　王河山　吳水生

福建中醫(yī)藥大學藥學院，福建　福州　350122

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文獻綜述

鉤吻的研究進展

許豪然廖華軍王河山吳水生

福建中醫(yī)藥大學藥學院，福建福州350122

【摘要】鉤吻為我國傳統(tǒng)的藥用植物，具有很強的毒性，同時具有鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、提高免疫力等生物活性，受到國內(nèi)學者廣泛的關注。筆者從鉤吻的化學成分、生物活性、代謝特征等方面進行綜述， 以期為鉤吻的進一步研究提供參考。

【關鍵詞】鉤吻；化學成分；生物活性；代謝特征；研究進展

鉤吻Gelsemiumelegans(Gardn.etChamp.)Benth.為馬錢科葫蔓藤屬植物，又名斷腸草、豬人參等。鉤吻始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性溫味辛、苦，有大毒[1]，全草可入藥，主要分布于福建、浙江等地，是我國傳統(tǒng)的藥用植物，也是世界著名的劇毒藥物[2]。其不僅具有祛風散瘀、消腫止痛、攻毒殺蟲的功效，還具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗炎、抗腫瘤、提高免疫力等多方面作用[3]。我國民間以其毒性大，一直以外用為主，但鉤吻具有很高的藥用價值。近幾年，一些國內(nèi)外的專家及學者對鉤吻進行了大量的研究，并取得了一定的研究成果。本文通過查閱近五年國內(nèi)的鉤吻研究文獻，綜述鉤吻的國內(nèi)最新研究進展，以利于進一步研究和開發(fā)鉤吻的藥用資源。

1化學成分研究

1.1化合物結構類型近年來，許多國內(nèi)外的專家對鉤吻的化學成分做了大量的研究，發(fā)現(xiàn)鉤吻的化學成分主要是生物堿類的化合物，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)50多種生物堿類化合物，主要分為鉤吻素甲類(Gelsemine)、鉤吻子素類(Koumine)、蛇根精類(Sarpagine)、胡蔓藤乙素類(Humantenine)、甲基鉤吻素乙類(Gelsedine)、Yohimbane等六大類型。除生物堿外，還包含大量的非生物堿,主要有苯丙素類化合物，酚酸類化合物，三萜類化合物，甾體及其苷類化合物，脂肪烷醇類揮發(fā)油等[4]。

1.2提取純化工藝研究王河山等[5]從3種不同型號的樹脂中篩選AB-8型大孔吸附樹脂可有效地富集閩產(chǎn)鉤吻根總生物堿，再對最佳樹脂吸附工藝參數(shù)進行全面優(yōu)化，確定最佳洗脫條件為90%乙醇洗脫，溶劑用量4BV。陳衛(wèi)琳等[6]對閩產(chǎn)鉤吻根、莖、葉3個部位中的鉤吻堿甲、鉤吻素子及葫蔓藤堿甲的含量進行了測定，結果顯示同一鉤吻植株不同部位生物堿的種類及含量存在較明顯的差異，鉤吻總生物堿以根部的含量最高，而葉部的含量最低。劉浩等[7]從中國鉤吻中提取得到的鉤吻總堿以氯仿-甲醇-0.1mol/LHCl為溶劑體系，通過高速逆流色譜進行分離鉤吻素子，高效液相色譜分析得到質(zhì)量分數(shù)為99.2%。以正己烷-乙酸乙酯-無水乙醇-水和氯仿-甲醇-0.2mol/L鹽酸為溶劑體系，鉤吻總堿中分離純化出鉤吻素甲單體，純度為97.76%[8]。

1.3含量檢測葉麗香等[9]采用高效液相色譜法測定3個批次鉤吻素子的含量，并考察鉤吻素子水溶液在室溫條件下穩(wěn)定性，方法簡單易行、專屬性強，準確可靠，適用于鉤吻素子含量測定，鉤吻素子水溶液室溫條件下連續(xù)7d穩(wěn)定性良好。蘇燕評等[10]通過對鉤吻素子的基本理化性質(zhì)及其水溶液穩(wěn)定性研究，發(fā)現(xiàn)鉤吻素子的水溶性較強，堿性條件下其親脂性比酸性條件下高，高溫條件下其強酸性水溶液穩(wěn)定性較差。馬克芹等[11]建立GC-MS法測定人血中鉤吻堿甲含量的方法。樣品經(jīng)乙醚提取、混懸、離心，取有機層氮氣吹干，殘渣甲醇定容，離心，上清液GC/MS分析，方法操作簡便，結果準確，可作為測定人血中鉤吻堿甲含量的方法。

2生物活性研究

國內(nèi)對鉤吻的活性研究歷史悠久，發(fā)現(xiàn)鉤吻具有抗腫瘤[12-13]、免疫調(diào)節(jié)[14]、鎮(zhèn)痛抗炎[15]、抗應激[16]等活性。但是，由于鉤吻總堿的中毒劑量與有效治療劑量相接近，導致其應用受到限制，故近年來，鉤吻堿單體的藥理作用越來越受到人們的重視[17]。

2.1抗腫瘤高明雅等[17]用鉤吻素子、鉤吻素甲、鉤吻素己生物堿單體對肝癌細胞HepG2增殖的抑制作用，并探討其相關機制,研究結果發(fā)現(xiàn)，3種鉤吻生物堿單體中鉤吻素己能顯著抑制HepG2細胞體外增殖且細胞毒性較小，并通過影響細胞周期分布和激活Capspase-8、Capspase-9進而活化Capspase-3發(fā)揮抗腫瘤作用。

2.2抗炎鎮(zhèn)痛鉤吻素子對類風濕關節(jié)炎可能具有顯著的治療作用，該作用與其上調(diào)脾臟Treg細胞量可能有關[18]。李蘇平等[19]研究發(fā)現(xiàn)鉤吻素子抗神經(jīng)病理性疼痛(NPP)作用可能與上調(diào)脊髓3α-HSD酶表達有關。

2.3抗焦慮黃慧慧等[20]以大鼠高架十字迷宮實驗為動物模型，評價鉤吻素子單次皮下注射給藥和連續(xù)皮下注射給藥的抗焦慮活性及特點，鉤吻素子能顯著增加大鼠進入高架十字迷宮開臂次數(shù)和在開臂的停留時間百分率，鉤吻素子在實驗劑量下對大鼠自主運動活性無影響，鉤吻素子可能具有抗焦慮作用。

2.4其他陳超杰等[21]研究發(fā)現(xiàn)鉤吻素子在治療范圍的較高劑量下能引起小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用，超過治療劑量范圍的一定時間內(nèi)則產(chǎn)生興奮作用。許盈等[22]采用離體豚鼠回腸藥物依賴模型、小鼠藥物依賴催促戒斷模型和自然戒斷模型，分析鉤吻素子誘導嗎啡樣身體依賴性的潛力,實驗結果提示，鉤吻素子可能無產(chǎn)生嗎啡樣身體依賴性的潛力。

3體內(nèi)外代謝研究

許盈等[23]建立HPLC測定大鼠血液和組織鉤吻素子含量的方法，進而研究單次灌胃給予鉤吻素子的大鼠體內(nèi)藥動學以及組織分布。采用萃取法預處理大鼠的血液和組織樣品；建立HPLC-紫外檢測法測定生物樣品的鉤吻素子含量的方法，方法操作簡便，準確靈敏，可用于鉤吻素子體內(nèi)藥動學研究；鉤吻素子在大鼠體內(nèi)的藥代動力學符合二室模型；鉤吻素子在大鼠體內(nèi)分布迅速廣泛，以消化道濃度為高，可透過血腦屏障，消除速度快。

楊櫻等[24]研究鉤吻素子在豬和SD大鼠2種不同種屬肝微粒體體外代謝差異，評價其對鉤吻素子的代謝作用，初步揭示豬肝臟細胞色素P450酶系的解毒作用。在孵育條件相同的情況下，鉤吻素子與豬肝微粒體的孵育液在21min出現(xiàn)了一個色譜峰，且鉤吻素子峰面積有所減小，而鉤吻素子與大鼠肝微粒體孵育液中未出現(xiàn)任何物質(zhì)，且峰面積未有變化。結論為在相同孵育條件下，豬肝微粒體可以代謝鉤吻素子，而SD大鼠卻無此現(xiàn)象。李彧等[25]建立UPLC-MS/MS法測定大鼠肝微粒體中鉤吻素子的濃度及其酶促反應動力學研究，方法簡單、快速、可靠，適應于鉤吻素子的體外代謝研究。

4鑒別技術

余淑琳等[26]采用等溫擴增技術鑒別有毒植物鉤吻，發(fā)現(xiàn)采用LAMP方法能夠成功鑒別出鉤吻和金銀花類藥材及其水提液。LAMP方法用于鑒別有毒植物具有一定的可行性。鄧禮明等[27]探討基層實驗室快速檢測斷腸草鉤吻堿的方法,為應對斷腸草中毒事件提供了快速、簡便、準確、實用的技術。方法:根據(jù)鉤吻堿具有堿性的特點,用5%氫氧化鈉浸泡,再用超聲波提取,然后用三氯甲烷萃取。提取物用傳統(tǒng)化學顯色法進行初步鑒定,再將樣品濃縮液點樣于熒光254nm硅膠薄層板上,展開后置于熒光燈下觀察鉤吻堿的展開情況。該法在食物中毒快速鑒定過程中實用、可靠,可供基層實驗室參考。

5小結

總之，鉤吻是著名的劇毒植物，鉤吻的毒性主要來源于生物堿成分，總堿的中毒劑量與有效治療劑量相接近，被認為是已發(fā)現(xiàn)的生物堿中毒性最大的植物，因而其應用受到極大的限制。但由于其臨床療效顯著，越來越受到國內(nèi)外學者的關注，目前的研究主要集中在化學成分、生物活性等研究。但是對于如何降低藥物的毒性，增強臨床應用的安全性還未見相關報道。因此，利用中藥炮制、配伍減毒的原理降低鉤吻的毒性保留或增強原有的療效，對發(fā)揮鉤吻藥材獨特的療效及開發(fā)鉤吻的藥材資源具有重要的意義。

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基金項目：福建中醫(yī)藥大學重點學科專項(X2014102，X2014146)。

【中圖分類號】R284

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)10-0037-02

(收稿日期：2016.03.18)