周小芳，黃秀英，馮 林，鐘白玉，張 戀，沈 柱，翟志芳

中國(guó)西南地區(qū)200例不孕不育患者支原體感染及藥敏分析

周小芳，黃秀英，馮 林，鐘白玉，張 戀，沈 柱，翟志芳

[摘要]目的 了解中國(guó)西南地區(qū)不孕不育患者支原體感染及藥敏試驗(yàn)情況，以指導(dǎo)臨床進(jìn)行合理治療。方法 回顧性分析西南地區(qū)200例不孕不育患者的支原體培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果 200例患者中支原體陽(yáng)性168例，陽(yáng)性率為84%，其中單獨(dú)解脲支原體感染者114例，陽(yáng)性率為57%，解脲與人型支原體混合感染54例，陽(yáng)性率為27%。藥敏試驗(yàn)顯示支原體對(duì)交沙霉素、米諾環(huán)素、多烯環(huán)素、四環(huán)素等抗生素較敏感，敏感率分別為94.6%、89.9%、86.9%、80.9%；而對(duì)環(huán)丙沙星、紅霉素、司帕沙星等耐藥率較高。結(jié)論 對(duì)于不孕不育患者應(yīng)進(jìn)行支原體培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，并根據(jù)其藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行針對(duì)性治療，這樣有利于疾病的治療和防止耐藥菌株的產(chǎn)生。

[關(guān)鍵詞]不孕不育；支原體感染；藥敏分析

[中圖分類號(hào)]R711.6；R518.9

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1674-1293(2015)05-0324-03

DOI：10.11786/sypfbxzz.1674-1293.20150502

作者簡(jiǎn)介：周小芳，技師，主要從事皮膚性病學(xué)臨床檢驗(yàn)工作， 翟志芳，E-mail: zhaizf1004@163.com

[Abstract]Objective To investigate Mycoplasma infection and drug sensitivity in infertile patients, so as to guide rational clinical treatment. Methods A retrospective analysis of Mycoplasma infection in 200 cases of infertility from the southwestern region of China was executed, which include culture and identification of Mycoplasma, as well as antimicrobial susceptibility test results. Results Among the total 200 patients, 168 cases confirmed to be Mycoplasma positive, the positive rate was 84%, including simple Uu infection 114 cases(the positive rate was 57%), Ureaplasma and Mycoplasma hominis mixed infection 54 cases(the positive rate was 27%). Drug susceptibility results showed that Mycoplasma was sensitive to josamycin, minocycline, doxycycline and tetracycline antibiotics, the sensitive rates were 94.6%, 89.9%, 86.9% and 80.9% respectively, but resistant to ciprofloxacin, erythromycin and sparfloxacin. Conclusion Mycoplasma culture and drug susceptibility testing should be given to infertile patients, and targeted therapy should be based on the results of drug susceptibility, which will be beneficial to the treatment of the disease and prevent the production of resistant strains.

收稿日期（2015-04-19 修回日期 2015-05-19）

作者單位：400038 重慶，第三軍醫(yī)大學(xué)附屬西南醫(yī)院皮膚性病科（周小芳，黃秀英，馮林，鐘白玉，張戀，沈柱，翟志芳）

E-mail: 1013745344@qq.com

The study on Mycoplasma infection and drug sensitivity in 200 infertile patients from southwest China

ZHOU Xiao-fang，HUANG Xiu-ying，F(xiàn)ENG Lin，et al
Department of Dermatology, Southwest Hospital Affilliated to Third Military Medical University, Chongqing 400038, China

[Key words]Infertility；Infection，Mycoplasma；Drug sensitivity analysis

[J Pract Dermatol, 2015, 8(5):324-326]

近年來(lái)不孕不育發(fā)病率呈逐步上升趨勢(shì)，據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測(cè)，不孕不育將成為威脅人類的第三大疾病[1]，其中泌尿生殖道感染是不孕不育人群的一個(gè)高危因素，支原體則是影響人類生殖健康的重要病原體之一[2,3]。解脲支原體（Uu）和人型支原體（Mh）與不孕癥的關(guān)系越來(lái)越引起人們的重視。有研究表明，支原體感染造成的不孕不育可達(dá)30%～50%，進(jìn)行支原體檢測(cè)并給予敏感的藥物成為治療不孕癥的重要措施[4]。本文對(duì)我國(guó)西南地區(qū)200例不孕不育患者泌尿生殖道分泌物支原體培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，以探討不孕不育患者支原體感染及其藥敏試驗(yàn)情況，為指導(dǎo)臨床合理治療支原體感染提供依據(jù)。

1　資料與方法

1.1 一般資料

2012年5月—2014年6月就診于我院生殖醫(yī)學(xué)中心，并確診為不孕不育患者共200例，均來(lái)自我國(guó)西南地區(qū)（含重慶、四川、貴州、云南）。其中男12例，年齡27～49歲；女188例，年齡21～43歲。所有患者均在我院中心實(shí)驗(yàn)室行實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)為支原體陽(yáng)性，經(jīng)生殖醫(yī)學(xué)中心臨床醫(yī)生給予經(jīng)驗(yàn)性用藥治療后，PCR檢測(cè)支原體仍未轉(zhuǎn)陰者。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 女性患者取宮頸分泌物?；颊呷〗厥?/p>

位，括開陰道充分暴露宮頸口。先用無(wú)菌棉拭子擦去宮頸黏液，用另一棉拭子插入宮頸管內(nèi)1～2 cm，捻轉(zhuǎn)數(shù)次取出；男性患者取尿道分泌物或通過(guò)前列腺按摩后取前列腺液，用棉拭子將分泌物置于支原體培養(yǎng)基內(nèi)。1.2.2 操作方法 培養(yǎng)過(guò)程按照支原體培養(yǎng)鑒定藥敏試劑盒（珠海迪爾生物工程有限公司）操作步驟進(jìn)行操作。所用試劑均在有效期內(nèi)。將已取材的拭子接種在支原體培養(yǎng)基中，取100 μl分別加入到微孔測(cè)試板的各孔中，再分別加2滴無(wú)菌液體石蠟至各孔中，蓋上微孔測(cè)試蓋，置于35～37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)孵育24～48 h。Uu在20～24 h、Mh在24～48 h觀察并記錄結(jié)果。

1.2.3 結(jié)果判斷 支原體培養(yǎng)基顏色無(wú)改變?nèi)猿庶S色為陰性，呈櫻桃紅色或紅色并且透亮清澈為陽(yáng)性。藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定：兩孔均呈黃色為陰性，對(duì)該抗生素敏感；下孔呈紅色，上孔呈黃色為陽(yáng)性，對(duì)該抗生素中度敏感；兩孔均呈紅色為陽(yáng)性，對(duì)該抗生素有耐藥性。

2　結(jié)果

2.1 陽(yáng)性率

入選的200例PCR檢測(cè)支原體陽(yáng)性的不孕不育患者中，經(jīng)支原體培養(yǎng)確定為Uu、Mh感染者共168例（84%），其中單獨(dú)Uu感染者114例（57%），單獨(dú)Mh感染者0例，Uu和Mh混合感染者54例（27%）（表1）。

表1　200例不孕不育患者支原體培養(yǎng)結(jié)果 [例(%)]

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

200例患者的支原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果見表2。從表2可見支原體對(duì)交沙霉素、多烯環(huán)素、米諾環(huán)素、四環(huán)素等抗生素較敏感，而對(duì)環(huán)丙沙星、紅霉素、司帕沙星等耐藥性較高。支原體對(duì)12種抗生素的敏感性從高到低依次為：交沙霉素（94.6%）、米諾環(huán)素（89.9%）、多烯環(huán)素（86.9%）、四環(huán)素（80.9%）、克拉霉素（69.6%）、阿齊霉素（65.5%）、羅紅霉素（53%）、紅霉素（35.1%）、司帕沙星（20.8%）、左氧沙星（17.3%）、氧氟沙星（16.7%）、環(huán)丙沙星（3.6%）。

表2　168株支原體對(duì)12種抗生素的體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果 [株（%）]

3　討論

支原體是一種介于細(xì)菌和病毒之間能獨(dú)立生長(zhǎng)的原核微生物，與泌尿生殖系統(tǒng)感染有關(guān)的主要是Uu和Mh，引起下生殖道炎癥及男女不孕不育癥等[3]。支原體與男女的不孕不育癥、自然流產(chǎn)率、死胎等臨床癥狀有密切關(guān)系[2]。已有研究發(fā)現(xiàn)，不孕不育患者夫婦Uu感染率明顯高于正常人，該結(jié)果提示Mh的感染與不孕不育有密切聯(lián)系[5]。Uu的感染不僅可引起胚胎發(fā)育停止與胎兒生長(zhǎng)遲緩，甚至引起死胎。Uu感染可以使男性精液中白細(xì)胞增加，活性氧降低，使精子的細(xì)胞膜以及DNA損傷，引起精子正常代謝和生理機(jī)能受損，進(jìn)而降低精子濃度和運(yùn)動(dòng)能力，影響精子識(shí)別卵細(xì)胞的能力[6-8]。同時(shí)，男性生殖泌尿道感染Uu后可引起女伴子宮內(nèi)膜和輸卵管黏膜等慢性炎癥反應(yīng)，感染也可誘發(fā)變態(tài)反應(yīng)和自身免疫反應(yīng)，它們都可能是引起不孕不育的重要因素[9]。因此，通過(guò)支原體檢測(cè)與藥敏試驗(yàn)進(jìn)而指導(dǎo)合理用藥成為治療不孕不育癥的重要措施。本研究中，入選的200例經(jīng)PCR檢測(cè)陽(yáng)性且治療后PCR仍然陽(yáng)性

的不孕不育患者中Uu陽(yáng)性率高達(dá)84%，其中單獨(dú)Uu感染的占67.9%，并發(fā)Mh感染的為32.1%，Uu≥104的患者占單獨(dú)Uu陽(yáng)性患者的93.9%；Uu+Mh陽(yáng)性患者中，Uu≥104的患者占94.4%，由此可見治療Uu感染對(duì)于臨床不孕不育治療具有重要意義。

目前，治療支原體藥物已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床患者，因此支原體的耐藥率也在不斷升高。至今為止，常用的支原體檢測(cè)主要有支原體培養(yǎng)、血清學(xué)鑒定、基因診斷等。支原體培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn)的檢測(cè)方法穩(wěn)定性好，特異性高，臨床應(yīng)用廣泛。本文200例患者均給予過(guò)經(jīng)驗(yàn)性抗生素治療，常用的藥物為羅紅霉素、阿奇霉素或司帕沙星，但其治療效果欠佳，其中重要的一個(gè)原因是產(chǎn)生耐藥性。因?yàn)橹гw缺乏正常的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，包括β-內(nèi)酰胺類與糖肽類等?？股氐闹饕咕鷻C(jī)制是阻礙微生物細(xì)胞壁的形成，因此支原體對(duì)它們具有天然耐藥性。所以基于這個(gè)原因，臨床工作中通常將四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類和喹諾酮類這3類抗生素作為支原體感染治療的一線藥物[10]。從本文的藥敏試驗(yàn)結(jié)果看，支原體對(duì)交沙霉素、米諾環(huán)素、多烯環(huán)素、四環(huán)素等抗生素較敏感，敏感率分別為94.6%、89.9%、86.9%、80.9%；而對(duì)環(huán)丙沙星、紅霉素、司帕沙星等耐藥性較高。早在2004年，我科曾對(duì)Uu感染患者進(jìn)行過(guò)藥敏試驗(yàn)，結(jié)果與此次分析結(jié)果基本一致[11]，同時(shí)這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)其他研究結(jié)果也大致相符[12-14]。耐藥性的產(chǎn)生可能是由于臨床上的不合理用藥以及支原體自身DNA旋轉(zhuǎn)酶基因結(jié)構(gòu)發(fā)生突變而造成藥效失去了靶點(diǎn)。本文的研究表明，支原體對(duì)于四環(huán)素類抗生素具有較高敏感性，但有研究發(fā)現(xiàn)，Uu和Mh的基因中攜帶鏈球菌耐四環(huán)素基因terM，因此支原體有可能對(duì)四環(huán)素潛在性耐藥[15]。因此，臨床醫(yī)生在沒(méi)有得到藥敏試驗(yàn)結(jié)果之前，應(yīng)盡可能給予患者非氟喹諾酮類藥物治療支原體感染。

對(duì)于不孕不育患者應(yīng)常規(guī)進(jìn)行支原體培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)[16]，并根據(jù)其藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行針對(duì)性治療，避免盲目的應(yīng)用抗生素，從而造成細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。同時(shí)，應(yīng)用抗生素治療應(yīng)堅(jiān)持規(guī)律、足量、足療程的原則，以達(dá)到徹底治愈的目的。

【參 考 文 獻(xiàn)】

[1]閆立青, 桑慧, 司紅衛(wèi), 等. 不孕癥患者支原體感染376例臨床分析 [J]. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志, 2006, 14(2):97-98.

[2]呂曉麗, 閻琳, 鄒菊賢, 等. 生殖道感染與不孕不育的關(guān)系 [J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 35(7):835-836.

[3]Takahashi S, Takeyama K, Kunishima Y, et al. Analysis of clinical manifestations of male patients with urethritis [J]. J Infect Chemother, 2006, 12(5):283-286.

[4]王芬, 何文娟, 周紅. 不孕癥患者的解脲支原體和人型支原體感染率分析 [J]. 中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志, 2012, 13(1):59-60.

[5]李柳銘, 江莉, 吳惠梅, 等. 不孕不育夫婦生殖道感染解脲支原體和沙眼衣原體的臨床分析 [J]. 廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2007, 24(4):508-509.

[6]Liu J, Wang Q, Ji X, et al. Prevalence of Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Chlamydia trachomatis infections, and semen quality in infertile and fertile men in China [J]. Urology, 2014, 83(4):795-799.

[7]Zhang Q, Xiao Y, Zhuang W. et al. Effects of biovar I and biovar II of Ureaplasma urealyticum on sperm parameters, lipid peroxidation, and deoxyribonucleic acid damage in male infertility [J]. Urology, 2014, 84(1):87-92.

[8]楊怡, 張捷, 張小偉, 等. 泌尿生殖道支原體培養(yǎng)及耐藥性變遷研究 [J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2006, 16(10):1183-1186.

[9]賀惠瓊, 黃志峰, 胡紅波, 等. 熒光定量PCR在不孕癥沙眼衣原體和解脲支原體檢測(cè)中臨床意義 [J]. 中國(guó)計(jì)劃生育雜志, 2002, 10(9):554-555.

[10]張緒東, 陳飛. 解脲支原體感染與胎膜早破及早產(chǎn)關(guān)系 [J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2013, 23(6):1385-1386.

[11]Zhai zhifang, Hao Fei, Zhong Baiyu, et al. Analysis of culture and drug sensitivity tests of Mycoplasmas for 387 patients with nongonococcal urethritis (cervicitis) in Chongqing [J]. Chin J Sex Transm Infect, 2004, 4(2):126-129.

[12]邢玉鑒, 陳燕. 不孕不育患者支原體感染狀況及藥敏分析 [J]. 中國(guó)婦幼保健, 2014, 29(7):1056-0158.

[13]李珍, 林波, 徐力華. 牡丹江地區(qū)某性病門診女性患者泌尿生殖道支原體培養(yǎng)及藥敏分析 [J]. 實(shí)用皮膚病學(xué)雜志, 2010, 3(3):141-142.

[14]鄔玉美, 陳磊, 胡曉燕, 等. 性病門診患者泌尿生殖道支原體感染及耐藥分析 [J]. 實(shí)用皮膚病學(xué)雜志, 2009, 2(2):81-83.

[15]陳東科, 陳麗, 胡云建. 泌尿生殖道支原體感染趨勢(shì)及耐藥性分析 [J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2006, 29(2):170-172.

[16]Lee JS, Kim KT, Lee HS, et al. Concordance of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis in infertile couples: impact on semen parameters [J]. Urology, 2013, 81(6):1219-1224.

（本文編輯 耿建麗）