脂聯(lián)素抑制脂肪組織MHCⅡ表達(dá)及對糖脂代謝的影響*

湯愛蓮，李燦，鄒楠，張霞△

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院消化內(nèi)科，重慶 400016)

[摘要]目的： 探討脂聯(lián)素是否通過影響脂肪組織主要組織相容性復(fù)合物Ⅱ類(MHCⅡ)的表達(dá)調(diào)節(jié)糖脂代謝。方法: 脂聯(lián)素基因敲除小鼠(KO)和C57BL/6小鼠 (WT)分別給予高脂飼料或普通飼料，24周后，測量小鼠體重、空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、穩(wěn)態(tài)胰島素評價指數(shù)(HOMA-IR)、血清甘油三酯(TG)、血清總膽固醇(TC)、血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)；行肝臟組織病理形態(tài)學(xué)評價；檢測脂肪組織MHCⅡ反式激活因子(CIITA)、小鼠MHCⅡ抗原Eβ(H2-Eb1)、MHCⅡ恒定鏈(CD74) mRNA及MHCⅡ相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)水平。用siRNA沉默3T3-L1脂肪細(xì)胞中MHC Ⅱ的表達(dá)及用過表達(dá)載體升高3T3-L1脂肪細(xì)胞中的脂聯(lián)素和(或)MHC Ⅱ的表達(dá)，檢測脂聯(lián)素對MHC Ⅱ蛋白水平的影響。結(jié)果: 高脂飼料或普通飼料喂養(yǎng)的KO小鼠體重、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、肝脂肪變性、脂肪組織中CIITA、H2-Eb1、CD74 mRNA和MHCⅡ蛋白表達(dá)水平均高于WT小鼠。在脂肪細(xì)胞中，抑制脂聯(lián)素能夠在一定程度上逆轉(zhuǎn)siRNA干擾所引起的MHCⅡ表達(dá)降低，過表達(dá)脂聯(lián)素后脂肪細(xì)胞中MHCⅡ的表達(dá)降低。結(jié)論: 脂聯(lián)素可以通過抑制脂肪組織中MHCⅡ的表達(dá)改善糖脂代謝。

[關(guān)鍵詞]脂聯(lián)素； 主要組織相容性復(fù)合物Ⅱ類； 糖脂代謝

[中圖分類號]R363[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

doi:10.3969/j.issn.1000-4718.2015.11.017

[文章編號]1000-4718(2015)11-2033-06

[收稿日期]2015-05-04[修回日期] 2015-07-07

[基金項(xiàng)目]*山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.ZR2012HL14); 濟(jì)南市青年科技明星計劃(No.20120145)

通訊作者△Tel: 0531-68616034； E-mail： liuming404@163.com

Protective effect of adiponectin on glucose and lipid metabolism by suppressing MHCⅡ expressionTANG Ai-lian, LI Can, ZOU Nan, ZHANG Xia

(DepartmentsofGastroenterologyandHepatology,TheSecondAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China.E-mail:sunnyzhangx@gmail.com)

ABSTRACT[]AIM: To investigate whether the protective effect of adiponectin on glucose and lipid metabolism is achieved through down-regulating major histocompatibility complex class Ⅱ (MHCⅡ) in the adipose tissue. METHODS: Adiponectin knockout (KO) mice and C57BL/6 (WT) mice were fed with high-fat diet and standard diet for 24 weeks, respectively. The body weight, fasting blood glucose (FBG), fasting insulin (FINS), homeostasis model assessment of insulin resistance (HOMA-IR), triglyceride (TG), total cholesterol (TC), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), hepatic histology, and class Ⅱ trans-activator (CIITA), histocompatibility 2 class II antigen E beta (H2-Eb1) and cluster of differentiation 74 (CD74) mRNA and MHC II protein levels in adipose tissue were measured at sacrifice. siRNA targeting MHC II and overexpression vector was used in 3T3-L1 cells to explore the effect of adiponectin on the protein level of MHCⅡ. RESULTS: The levels of body weight, FBG, FINS, HOMA-IR, TC, TG, LDL-C, hepatic steatosis, CIITA, H2-Eb1 and CD74 mRNA expression, and MHCⅡ protein expression in the KO mice were higher than those in the WT mice that fed with high-fat diet or standard diet. In 3T3-L1 cells, inhibition of adiponectin reversed MHC II protein level induced by specific siRNA. The expression of MHC II in adipocytes decreased after adiponectin was overexpressed. CONCLUSION: Adiponectin improves glucose and lipid metabolism through suppressing the expression of MHCⅡ in the adipose tissue.

[KEY WORDS]Adiponectin; Major histocompatibility complex class Ⅱ; Glucose and lipid metabolism

脂肪組織不僅是能量儲存器，也是內(nèi)分泌和免疫活性器官。它可分泌多種生物活性因子，其中脂肪細(xì)胞表達(dá)量最大的脂肪因子——脂聯(lián)素(adiponectin)在調(diào)節(jié)全身能量代謝和免疫/炎癥平衡中起著重要作用[1]。肥胖和胰島素抵抗患者中，循環(huán)脂聯(lián)素水平降低[2-3]。研究發(fā)現(xiàn)，肥胖患者脂肪細(xì)胞中主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(major histocompatibility complex class Ⅱ，MHCⅡ)表達(dá)增高。通過介導(dǎo)脂肪組織中淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的相互作用，MHCⅡ可以造成全身炎癥反應(yīng)和胰島素抵抗。暴露于高脂飲食的MHCⅡ基因敲除小鼠比野生型小鼠有更高的胰島素敏感性和血清脂聯(lián)素水平[4]。目前研究表明，脂聯(lián)素主要通過激活過氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisome proliferator-activated receptor α，PPARα)和腺苷酸活化蛋白激酶 (adenine monophosphate-activated protein kinase，AMPK)增強(qiáng)脂肪酸氧化,降低循環(huán)血糖水平,提高胰島素敏感性[5-6]。而脂聯(lián)素是否可以通影響脂肪組織中MHCⅡ的表達(dá)參與調(diào)節(jié)糖脂代謝，目前尚沒有相關(guān)的研究。因此本實(shí)驗(yàn)主要探討脂聯(lián)素對脂肪組織MHCⅡ表達(dá)及糖脂代謝的影響。

材料和方法

1實(shí)驗(yàn)動物和細(xì)胞

10只雄性、6 周齡、體重16～20 g 的C57BL/6野生型(wild-type，WT)小鼠，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。10只雄性、6 周齡、體重16～20 g以C57BL/6為遺傳背景的基因敲除(knockout，KO)小鼠，購自上海南方模式生物研究中心。3T3-L1前脂肪細(xì)胞系購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞中心。實(shí)驗(yàn)過程中對動物的飼養(yǎng)和取材均遵守重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l列和實(shí)驗(yàn)動物保護(hù)的相關(guān)規(guī)定。

2主要試劑

高脂飼料(普通混合飼料86%，豬油12%，膽固醇2%)購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限公司；胰島素放射免疫試劑盒購自北京原子高科股份有限公司；TRIzol、逆轉(zhuǎn)錄 PCR 試劑盒和PCR 擴(kuò)增試劑盒均購自TaKaRa；CIITA、H2-Eb1和CD74引物由生工生物工程股份有限公司合成；脂聯(lián)素I抗購自CST；MHCⅡ和CIITA的I抗購自Abcam；β-actin的I抗和辣根酶標(biāo)記山羊抗兔IgG Ⅱ抗購自武漢三鷹生物技術(shù)有限公司。

3主要方法

3.1動物分組和標(biāo)本取材將WT小鼠隨機(jī)分為2組：普通飼料組(NWT組)和高脂飼料組(HWT組)，將KO小鼠隨機(jī)分為2組：普通飼料組(NKO組)和高脂飼料組(HKO組)，小鼠自由進(jìn)水、進(jìn)食。每日觀察小鼠攝食及生長情況，每隔2周稱量小鼠體重并記錄。第24周末，小鼠禁食水12 h后稱重，摘除眼球取血并于4 000 r/min 離心15 min后分離出血清保存于-80 ℃冰箱備用，小鼠肝臟及腹腔脂肪用液氮速凍后保存于-80 ℃冰箱備用。

3.2肝臟組織病理形態(tài)學(xué)檢查取小鼠部分肝臟，10%的甲醛溶液固定，石蠟包埋，常規(guī) HE 染色。光鏡下觀察肝臟組織病理形態(tài)學(xué)變化。

3.3血清學(xué)指標(biāo)測定按摩小鼠尾靜脈，75%乙醇消毒，待干后采血1滴，用快速血糖儀檢測鼠尾靜脈中葡萄糖濃度。取200 μL血清于全自動放射免疫分析儀上檢測空腹胰島素(fasting insulin，F(xiàn)INS)，取500 μL血清于全自動生化分析儀上檢測血清甘油三酯(triglyceride，TG)、血清總膽固醇(total cholesterol，TC)、血清高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)和血清低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)。

3.4實(shí)時熒光定量PCR(real-time PCR)檢測脂肪組織中CIITA、H2-Eb1和CD74的mRNA表達(dá)水平取80 mg脂肪組織加入液氮研磨，研至粉末狀時加入1 mL TRIzol液提取總RNA，將逆轉(zhuǎn)錄后的 cDNA 在定量PCR儀上進(jìn)行實(shí)時熒光PCR反應(yīng)，檢測脂肪組織MHCⅡ相關(guān)基因的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)中涉及的引物如下所示：Ciita的上游引物為5’-CCACGAGACACAGCAACCT-3’，下游引物為5’-TGCCCAGCACATACACATCT-3’；H2-Eb1的上游引物為5’-TGGACTTCAGCCAACAGGAC-3’，下游引物為5’-GGGATAAACAGCCATCAGGA-3’；Cd74的上游引物為5’-GTGCCTCAGCCCTTCTTATG-3’，下游引物為5’-GACTTCATTTGCCGTGTCCT-3’；內(nèi)參照甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)的上游引物為 5’-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3’，下游引物 為5’-GGGGTCGTTGATGGCAACA-3’。擴(kuò)增條件：95 ℃ 1 min，95 ℃ 10 s，60 ℃ 40 s，39 個循環(huán)；72 ℃ 7 min，4 ℃保存。Real-time PCR 結(jié)果由CFX96 Manager Software軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以2-ΔΔCt值表示目的基因的相對表達(dá)水平。

3.5細(xì)胞分組和培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞系用含10%胎牛血清的H-DMEM培養(yǎng)基于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中孵育。每2天更換培養(yǎng)液1次，細(xì)胞達(dá)約70%～80% 豐度時，傳代或用于實(shí)驗(yàn)。siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞分為對照組(control，Con)、siRNA沉默脂聯(lián)素組(si-Adipo)、siRNA沉默MHCⅡ組(si-MHCⅡ)及siRNA共沉默脂聯(lián)素和MHCⅡ組(si-Adipo+si-MHCⅡ)。質(zhì)粒pcDNA 3.1轉(zhuǎn)染細(xì)胞分為對照組(pNC)、過表達(dá)脂聯(lián)素組(pAdipo)、過表達(dá)MHC Ⅱ組(pMHC Ⅱ)、過表達(dá)脂聯(lián)素和MHC Ⅱ組(pAdipo+pMHC Ⅱ)。

3.6siRNA合成、轉(zhuǎn)染及過表達(dá)脂聯(lián)素和MHC Ⅱ 特異性靶向脂聯(lián)素以及MHC Ⅱ的siRNA以及陰性對照siRNA，過表達(dá)脂聯(lián)素和MHC II的質(zhì)粒均由銳博生物科技公司設(shè)計合成。HiPerFect轉(zhuǎn)染試劑購自QIAGEN，轉(zhuǎn)染步驟按說明書進(jìn)行。

3.7Western blot法檢測脂肪組織中MHCⅡ和CIITA以及3T3-L1脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素和MHCⅡ的蛋白表達(dá)水平取脂肪組織和脂肪細(xì)胞加入裂解液裂解，提取總蛋白，用BCA 法蛋白定量。加入電泳加樣緩沖液沸水浴中10 min，行 SDS-PAGE 電泳。電轉(zhuǎn)膜儀轉(zhuǎn)膜，將蛋白膜加入Western blot封閉液中，室溫封閉1 h；加入MHCⅡ、CIITA、脂聯(lián)素和β-actin 的 I 抗，4 ℃ 冰箱孵育過夜，洗膜 3 次，Ⅱ抗(HRP-羊抗兔 IgG)37 ℃ 孵育 1 h，ECL 顯影。

4統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析，組間均數(shù)比較用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

1小鼠肝臟組織病理形態(tài)學(xué)比較

HE染色觀察肝臟組織形態(tài)學(xué)變化，普通飼料喂養(yǎng)的WT和KO小鼠肝組織結(jié)構(gòu)均清楚完整，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞為多邊形排列成索狀，在中央靜脈周圍呈放射狀分布。而高脂飼料喂養(yǎng)的WT和KO小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞腫大變圓，部分脂滴形成大空泡，將細(xì)胞核推擠至細(xì)胞一側(cè)，肝細(xì)胞排列紊亂，并伴大量肝細(xì)胞腫脹，部分呈氣球樣變,小葉內(nèi)炎癥明顯。同給予高脂飼料的KO小鼠肝臟脂肪變性，小葉炎癥及肝細(xì)胞氣球樣變比WT小鼠更為明顯，見圖1。

Figure 1.Representative images of the liver sections (HE staining, ×200).

圖1各組小鼠肝臟組織HE染色

2小鼠體重和血清生化指標(biāo)比較

24周后，高脂組KO和WT小鼠均出現(xiàn)明顯的肥胖、高血糖、胰島素抵抗和高脂血癥。高脂飼料或普通飼料喂養(yǎng)的KO小鼠體重、空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR、總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇水平均高于WT小鼠 ，見表1。

3小鼠脂肪組織CIITA、H2-Eb1和CD74的mRNA表達(dá)水平比較

為了解KO和WT小鼠脂肪組織中MHCⅡ相關(guān)基因的變化，我們采用real-time PCR法檢測脂肪組織中CIITA、H2-Eb1和CD74 的mRNA表達(dá)水平。CIITA為調(diào)控MHCⅡ表達(dá)的關(guān)鍵分子并協(xié)調(diào)多種轉(zhuǎn)錄因子與 MHCⅡ基因啟動子。小鼠主要組織相容性基因H2-Eb1為人HLA-DRB1基因的同源基因。CD74即MHC Ⅱ恒定鏈參與MHC Ⅱ類分子的形成且與MHC Ⅱ同抗原肽的結(jié)合有關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示長時間的高脂飲食導(dǎo)致KO和WT小鼠脂肪組織中CIITA、H2-Eb1、CD74的mRNA表達(dá)增加，且高脂飼料組KO小鼠脂肪組織中CIITA、H2-Eb1和CD74 的mRNA表達(dá)水平明顯高于WT小鼠，見圖2。

表1　各組小鼠體重和血清生化指標(biāo)結(jié)果的比較

*P<0.05vsNWT group;#P<0.05vsHWT group.

Figure 2.The mRNA expression of CIITA，H2-Eb1 and CD74 in the adipose tissues. Mean±SD.n=5.*P< 0.05vsNWT group;#P<0.05vsHWT group.

圖2各組小鼠脂肪組織中CIITA、H2-Eb1和CD74的mRNA表達(dá)水平

4小鼠脂肪組織CIITA和MHCⅡ的蛋白表達(dá)水平比較

高脂組WT小鼠脂肪組織CIITA和MHCⅡ的蛋白表達(dá)水平顯著高于普通飼料組，且高脂組KO小鼠脂肪組織MHCⅡ的蛋白表達(dá)水平明顯高于WT小鼠，見圖3。

Figure 3.The protein expression of CIITA and MHCⅡ in the adipose tissues. Mean±SD.n=5.*P< 0.05vsNWT group,#P<0.05vsHWT group.

圖3各組小鼠脂肪組織中CIITA和MHCⅡ蛋白表達(dá)水平

5脂聯(lián)素抑制脂肪細(xì)胞中MHC Ⅱ的表達(dá)

為了檢測脂聯(lián)素對脂肪細(xì)胞中MHC Ⅱ表達(dá)的影響，我們用特異性靶向脂聯(lián)素的siRNA干擾細(xì)胞中脂聯(lián)素的表達(dá)。沉默3T3-L1細(xì)胞中脂聯(lián)素的表達(dá)后，MHC Ⅱ的水平明顯升高。同時，我們還篩選了一個特異性靶向MHC Ⅱ的siRNA。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，沉默了3T3-L1細(xì)胞中的MHC Ⅱ后，脂聯(lián)素的水平?jīng)]有明顯改變。在3T3-L1細(xì)胞中轉(zhuǎn)染特異性沉默MHC Ⅱ的siRNA 24 h后，更換新鮮培養(yǎng)基，再次共轉(zhuǎn)染靶向脂聯(lián)素的siRNA，結(jié)果si-Adipo能夠在一定程度上逆轉(zhuǎn)si-MHC Ⅱ所引起的MHC Ⅱ表達(dá)下調(diào)。這些結(jié)果表明，脂聯(lián)素能夠在脂肪細(xì)胞中反向調(diào)控MHC Ⅱ的表達(dá)，見圖4。

Figure 4.The protein expression of adiponectin and MHC Ⅱ in the 3T3-L1 cells transfected with siRNA. Mean±SD.n=5.*P<0.05vsCon group;#P<0.05vssi-MHC Ⅱ group.

圖4轉(zhuǎn)染siRNA的3T3-L1脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素和MHCⅡ蛋白表達(dá)水平

6過表達(dá)脂聯(lián)素后脂肪細(xì)胞中MHC Ⅱ的表達(dá)降低

為了進(jìn)一步確定脂聯(lián)素對脂肪細(xì)胞中MHC Ⅱ表達(dá)的影響，我們用過表達(dá)載體升高脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素和/或MHC Ⅱ的表達(dá)。在3T3-L1細(xì)胞中過表達(dá)脂聯(lián)素后，MHC Ⅱ的水平明顯降低；然而，過表達(dá)MHC Ⅱ后，脂聯(lián)素的水平?jīng)]有明顯改變。當(dāng)我們在3T3-L1細(xì)胞中同時過表達(dá)脂聯(lián)素和MHC Ⅱ后，脂聯(lián)素過表達(dá)引起的MHC Ⅱ表達(dá)降低在一定程度上逆轉(zhuǎn)。這些結(jié)果再次表明，脂聯(lián)素能夠在脂肪細(xì)胞中反向調(diào)控MHC Ⅱ的表達(dá)，見圖5。

討論

肥胖為慢性炎癥過程，而脂肪組織的慢性炎癥在肥胖相關(guān)的胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的作用。相關(guān)研究表明肥胖個體脂肪組織中T淋巴細(xì)胞的數(shù)量增加、活性增強(qiáng)，炎癥因子IFN-γ的表達(dá)量增加[7]。IFN-γ誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞MHCⅡ表達(dá)增加并介導(dǎo)T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞相互作用，引起脂肪組織內(nèi)巨噬細(xì)胞聚集并向炎癥表型M1極化，最終造成脂肪組織炎癥和胰島素抵抗[4]。高脂飼料喂養(yǎng)MHCⅡ基因敲除小鼠和野生型小鼠， MHCⅡ基因敲除小鼠肝重、肝脂肪變性、血糖、胰島素、游離脂肪酸水平均低于野生型小鼠[8]。這些提示MHC Ⅱ在肥胖引起的糖脂代謝紊亂中起著一定的作用。

Figure 5.The protein expression of adiponectin and MHC Ⅱ in the 3T3-L1 cells transfected with overexpression vectors. Mean±SD.n=5. *P<0.05vspNC group;#P<0 .05vspMHC Ⅱ group.

圖5轉(zhuǎn)染過表達(dá)載體的3T3-L1脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素和MHCⅡ蛋白表達(dá)水平

脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞分泌的具生物活性的細(xì)胞因子，占血漿總蛋白的0.01%。脂聯(lián)素自發(fā)現(xiàn)以來因其調(diào)節(jié)代謝、抗炎等生理作用備受關(guān)注。循環(huán)中脂聯(lián)素水平主要由遺傳因素、營養(yǎng)、運(yùn)動和腹部脂肪決定。肥胖、代謝綜合征和心血管疾病患者血清脂聯(lián)素水平降低[9]。脂聯(lián)素通過增強(qiáng)脂肪酸氧化和胰島素敏感性，抑制肝臟糖異生降低循環(huán)血糖水平，提高骨骼肌胰島素敏感性來調(diào)節(jié)機(jī)體的能量代謝[10]。除參與調(diào)節(jié)新陳代謝外，脂聯(lián)素也調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，可顯著抑制抗原特異性的T細(xì)胞增殖和巨噬細(xì)胞的吞噬活性，促使巨噬細(xì)胞向抗炎M2表型極化，減少炎癥細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2的產(chǎn)生及誘導(dǎo)抗炎因子IL-10的產(chǎn)生[11-14]?？寡滓蜃覫L-10調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞的功能，主要表現(xiàn)在下調(diào)MHC Ⅱ和B7-2的表達(dá)[15]。相關(guān)研究表明脂聯(lián)素亦可調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞功能使其MHC Ⅱ、IL-12 p40和CD80表達(dá)降低[16]。因而推測：脂聯(lián)素也可抑制脂肪細(xì)胞MHC Ⅱ表達(dá)，參與糖脂代謝的調(diào)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：高脂飼料喂養(yǎng)的脂聯(lián)素基因敲除小鼠同對照組小鼠相比脂肪細(xì)胞MHC II mRNA和蛋白表達(dá)水平、血糖、血脂、肝脂肪變性、胰島素抵抗均明顯增加。而且，在脂肪細(xì)胞中，沉默脂聯(lián)素的表達(dá)可以顯著升高細(xì)胞中MHC Ⅱ的蛋白水平。然而，MHC Ⅱ的蛋白表達(dá)被干擾掉后，脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素的水平?jīng)]有改變。這一結(jié)果提示脂聯(lián)素可以反向調(diào)控MHC Ⅱ的蛋白表達(dá)。當(dāng)細(xì)胞中MHC Ⅱ的蛋白被干擾24 h后，重新沉默脂聯(lián)素的表達(dá)，能夠明顯導(dǎo)致MHC Ⅱ蛋白水平的再次升高。過表表達(dá)脂肪細(xì)胞中的脂聯(lián)素后，MHC Ⅱ的水平明顯降低，但過表達(dá)MHCⅡ后，脂聯(lián)素的水平并沒有明顯改變;同時過表達(dá)脂聯(lián)素和MHC Ⅱ后，脂聯(lián)素過表達(dá)引起的MHC Ⅱ表達(dá)降低能在一定程度上得到逆轉(zhuǎn)。這些結(jié)果均證實(shí)，脂聯(lián)素能夠有效抑制MHC Ⅱ的表達(dá)。

本研究提示脂聯(lián)素抑制脂肪組織MHC Ⅱ表達(dá)，并改善糖脂代謝，為脂聯(lián)素治療肥胖等代謝相關(guān)的疾病提供了新的理論依據(jù)。但其作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Guerre-Millo M. Adiponectin: an update[J]. Diabetes Metab, 2008, 34(1): 12-18.

[2]Arita Y, Kihara S, Ouchi N, et al. Paradoxical decrease of an adipose-specific protein, adiponectin, in obesity. 1999[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2012, 425(3):560-564.

[3]Hotta K, Funahashi T, Arita Y, et al. Plasma concentrations of a novel, adipose-specific protein, adiponectin, in type 2 diabetic patients[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2000, 20(6):1595-1599.

[4]Deng T, Lyon CJ, Minze LJ, et al. Class II major histocompatibility complex plays an essential role in obesity-induced adipose inflammation[J]. Cell Metab, 2013, 17(3):411-422.

[5]Gualillo O, González-Juanatey JR, Lago F. The emerging role of adipokines as mediators of cardiovascular function: physiologic and clinical perspectives[J]. Trends Cardiovasc Med, 2007, 17(8):275-283.

[6]余慕雪，沈振宇，莫清萍, 等. 早期高蛋白飲食對 SGA 大鼠糖代謝的影響及脂聯(lián)素-AMPK信號通路在其中的作用[J]. 中國病理生理雜志, 2012，28(10):1812-1818.

[7]Andersson J, Libby P, Hansson GK. Adaptive immunity and atherosclerosis[J]. Clin Immunol, 2010, 134(1):33-46.

[8]Cho KW, Morris DL, Delproposto JL, et al. An MHC II-dependent activation loop between adipose tissue macrophages and CD4+T cells controls obesity-induced inflammation[J]. Cell Rep, 2014, 9(2):605-617.

[9]Ziemke F, Mantzoros CS. Adiponectin in insulin resistan-ce: lessons from translational research[J]. Am J Clin Nutr, 2010, 91(1):258S-261S.

[10]Turer AT, Scherer PE. Adiponectin: mechanistic insights and clinical implications[J]. Diabetologia, 2012, 55(9):2319-2326.

[11]Wilk S, Scheibenbogen C, Bauer S, et al. Adiponectin is a negative regulator of antigen-activated T cells[J]. Eur J Immunol, 2011, 41(8):2323-2332.

[12]Ohashi K, Parker JL, Ouchi N, et al. Adiponectin promotes macrophage polarization toward an anti-inflammatory phenotype[J]. J Biol Chem, 2010, 285(9):6153-6160.

[13]Folco EJ, Rocha VZ, Lopez-Ilasaca M, et al. Adiponectin inhibits pro-inflammatory signaling in human macrophages independent of interleukin-10[J]. J Biol Chem, 2009, 284(38):25569-25575.

[14]Wolf AM, Wolf D, Rumpold H, et al. Adiponectin induces the anti-inflammatory cytokines IL-10 and IL-1RA in human leukocytes[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2004, 323(2):630-635.

[15]Buelens C, Willems F, Delvaux A, et al. Interleukin-10 differentially regulates B7-1 (CD80) and B7-2 (CD86) expression on human peripheral blood dendritic cells[J]. Eur J Immunol, 1995, 25(9):2668-2672.

[16]Tsang JY, Li D, HO D, et al. Novel immunomodulatory effects of adiponectin on dendritic cell functions[J]. Int Immunopharmacol, 2011, 11(5):604-609.

(責(zé)任編輯： 林白霜， 羅森)