董靈根 徐 明 金鐵峰

(延邊大學(xué)病理學(xué)教研室 吉林 延吉 133002)

近年來，絲氨酸蛋白酶抑制劑SerpinB2（serine proteinase inhibitor B2）的作用機制已成為腫瘤研究領(lǐng)域新的熱點。目前，SerpinB2在腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程中所起的作用仍存在爭議。有學(xué)者認為，SerpinB2可以抑制腫瘤的生長。但最近的研究成果證實，SerpinB2在腫瘤組織中的表達明顯異常，而且其過表達與惡性腫瘤的發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[ 1- 3]。本文重點分析乳腺癌組織及其癌旁組織中SerpinB2的表達情況，探討將SerpinB2作為評估乳腺癌erpinB2過表達與本組乳腺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系及預(yù)后分子標志物的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 本研究中的150例乳腺癌患者的癌組織及30例乳腺癌患者的癌旁組織均為購自上海芯超生物科技有限公司的乳腺癌組織芯片，其相關(guān)的臨床資料齊全。這些組織標本均為腫瘤原發(fā)灶標本。本研究的150例乳腺癌患者的癌組織標本中包括143例浸潤性導(dǎo)管癌患者的癌組織標本及7例浸潤性導(dǎo)管癌伴浸潤性小葉癌患者的癌組織標本。這些組織標本采集自150例女性患者。這些患者在進行手術(shù)前均未接受過放療或化療，其年齡為29～83歲，其中位年齡為53.5歲，其中 ≥50歲的患者有86例，＜50歲的患者有64例；其腫瘤的最大直徑為1.2～8.0cm,其中腫瘤最大直徑≥2.0cm的患者有 88例，腫瘤最大直徑＜2.0cm的患者有62例。在這些患者中，左乳乳腺癌患者有68例，右乳乳腺癌患者有82例，乳腺癌的臨床分期為I期的患者有48例，乳腺癌的臨床分期為II期的患者有58例，乳腺癌的臨床分期為III期的患者有44例，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有61例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有89例。

1.2 方法 本研究所用的SerpinB2兔抗人單克隆抗體購自Abcam生物技術(shù)公司（ab47742）。對本研究中的組織標本進行免疫組化兩步法染色，操作的步驟是：對組織標本進行常規(guī)的脫蠟及抗原修復(fù)，加入一抗（1∶100），在4℃的溫度下孵育過夜，使用蘇木素進行復(fù)染，使用中性樹膠封片。將經(jīng)免疫組化染色的石蠟組織以4μ m的厚度進行連續(xù)切片。在組織切片中加入標記辣根過氧化物酶的抗兔二抗，在室溫下孵育45min，再進行DAB顯色及Mayer蘇木素復(fù)染。在對本組組織標本進行免疫組化染色后，若其發(fā)生棕色或金黃色著色可判定其染色結(jié)果呈陽性。根據(jù)本組組織標本中陽性細胞數(shù)所占的比例將其染色結(jié)果分為以下4級：（-）組織標本中陽性細胞數(shù)占0～5%；（+）組織標本中陽性細胞數(shù)占6%～25%。（++）組織標本中陽性細胞數(shù)占26%～50%。（+++）組織標本中陽性細胞數(shù)占51%～75%。（++++）組織標本中陽性細胞數(shù)占75%以上。由兩位有經(jīng)驗的病理醫(yī)師以雙盲法判定對本組組織標本進行免疫組化染色的結(jié)果。若組織標本的染色結(jié)果為（++）～（+++），可判定其中SerpinB2的表達呈陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件對本研究的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，在進行組間比較時采用X2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SerpinB2在本組乳腺癌組織中表達情況的分析在本組150例乳腺癌患者的癌組織中，有82例患者的癌組織中SerpinB2的表達呈陽性，其SerpinB2表達的陽性率為54.7%。在本組30例乳腺癌患者的癌旁組織中，有10例患者的癌組織中SerpinB2的表達呈陽性的組織，其SerpinB2表達的陽性率為33.3%。與癌旁組織相比，SerpinB2在本組乳腺癌組織中表達的陽性率較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 SerpinB2在本組乳腺癌組織中表達情況的分析

2.2 SerpinB2過表達與本組乳腺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 對SerpinB2在本組乳腺癌患者癌組織中的過表達與本組患者臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系進行分析的結(jié)果顯示，SerpinB2的過表達與患者的年齡、其腫瘤的大小及TNM分級均無關(guān)（p＞0.05）。在癌細胞發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的本組患者中，有65.6%（40/61）的患者 其癌組織中SerpinB2的表達呈陽性。在癌細胞未發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的本組患者中，有47.2%（42/89）的患者其癌組織中SerpinB2的表達呈陽性。與癌細胞未發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的患者相比，癌細胞發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的本組患者其癌組織中SerpinB2表達的陽性率較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 SerpinB2過表達與本組乳腺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系分析

3 討論

SerpinB2的作用機制是進行腫瘤學(xué)研究領(lǐng)域的熱點[4]。SerpinB2對細胞外的uPA具有抑制的作用，并具有參與調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的信號通路及細胞的存活率等生理功能。但腫瘤細胞內(nèi)SerpinB2的活性尚不確定[3]。纖溶酶原激活物系統(tǒng)（包括uPA、SerpinE1和SerpinB2)的過表達是惡性腫瘤的特征，與惡性腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移相關(guān)[4]。SerpinB2可抑制腫瘤的uPA，對各種癌癥的治療結(jié)果和預(yù)后的評估具有至關(guān)重要的作用。

本次研究的結(jié)果證實，SerpinB2在乳腺癌腫瘤組織中呈異常的過表達，SerpinB2的過表達可能成為預(yù)測乳腺癌患者是否發(fā)生癌細胞淋巴轉(zhuǎn)移的重要指標。

[1] Schroder WA, Major L, Suhrbier A. The role of SerpinB2 in immunity. Crit Rev Immunol, 2011; 31: 15-30.

[2] Boncela J, Przygodzka P Wyroba E, Papiewska-Pajak I, Cie rniewski CS. Secretion of SerpinB2 from endothelial cel ls activated with inflammatory stimuli. Exp Cell Res 20 13; 319: 1213-1219.

[3] McMahon BJ, Kwaan HC. Components of the Plasminogen-Plasmin System as Biologic Markers for Cancer. AdvExp Med Biol 2015; 867: 145-156.

[4] Toiyama Y, Hur K, Tanaka K, Inoue Y, Kusunoki M, Boland CR et al. Serum miR-200c is a novel prognostic and meta stasis-predictive biomarker in patients with colorectal cancer. Ann Surg 2014; 259: 735-743.