膿毒血癥老年患者血清中白細胞介素-18、-35和腫瘤壞死因子α表達及意義

楊培雄李琳業(yè)吳占慶韓何武侯明1張呈祥1

(青海大學附屬醫(yī)院急診外科，青海西寧810000)

摘要〔〕目的觀察膿毒血癥老年患者血清中白細胞介素(IL)-18、IL-35及腫瘤壞死因子(TNF)-α表達特征，關注其臨床意義。方法83例診斷為膿毒血癥的老年患者作為觀察組，55例體檢健康老年人的血清樣本作為對照組，應用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測兩組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達。結果兩組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異顯著。觀察組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達與病變類型、是否伴有并發(fā)癥及預后密切相關。相關分析顯示觀察組中IL-18和IL-35、IL-35和TNF-α均呈負相關性。結論膿毒血癥老年患者血清中IL-18和TNF-α高表達、IL-35低表達，IL-18、IL-35和TNF-α三者間具有協(xié)同作用，共同促病變的進展。聯(lián)合檢測IL-18、IL-35和TNF-α表達在一定程度上可以判斷預后。

關鍵詞〔〕膿毒血癥；白細胞介素(IL)-18；IL-35；腫瘤壞死因子(TNF)-α

中圖分類號〔〕R63〔文獻標識碼〕A〔

1青海大學附屬醫(yī)院急診ICU

第一作者：楊培雄(1966-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腹部創(chuàng)傷及危重病治療研究。

膿毒血癥是危重癥患者臨床較為嚴重的全身炎癥反應，病變嚴重者可以引起休克和多器官衰竭等嚴重并發(fā)癥〔1〕?；颊咴谀摱景Y發(fā)生和發(fā)展過程中可以分泌多種細胞因子，對病程的進展影響較大〔2，3〕。白細胞介素(IL)-18作為機體內(nèi)中性粒細胞的趨化和活化因子，可以誘導炎性細胞的形態(tài)改變，釋放超氧化物和溶酶體酶，促進炎癥反應〔4〕。腫瘤壞死因子(TNF)-α是急性炎性因子，對炎癥的發(fā)展和機體的免疫反應具有促進作用〔5〕。IL-35可以對抗促炎介質(zhì)，維持正常機體的炎性因子平衡〔6〕。本研究關注膿毒血癥老年患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達及其相關性。

1資料與方法

1.1一般資料近3年我院確診為膿毒血癥的老年患者83例作為觀察組。排除標準：①伴有惡性腫瘤的患者；②有嚴重先天性疾病或畸形的患者；③有精神疾病史的患者。其中男43例，女40例；年齡60～85(平均70.4)歲。55例我院經(jīng)體驗證實為健康的老年人血清標本作為對照組，其中男28例，女27例；年齡60～67(平均64.3)歲。兩組一般資料無明顯差異(P>0.05)。

1.2IL-18、IL-35和TNF-α檢測方法觀察組在確診后抽取空腹靜脈血5 ml，對照組常規(guī)抽取空腹靜脈血5 ml，分離血清后置于-20℃冰箱中待檢。IL-18、IL-35和TNF-α檢測均應用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法。樣本均于2 w內(nèi)集中檢測，并由同一檢驗師完成操作。

1.3病變程度分組依據(jù)按膿毒血癥的嚴重程度分為膿毒癥、嚴重膿毒癥和膿毒性休克。判斷標準：嚴重膿毒癥為膿毒癥伴有器官功能障礙、組織灌注不良或低血壓。膿毒性休克為嚴重膿毒癥給予足量的液體復蘇后仍然伴有無法糾正的持續(xù)性低血壓。

1.4統(tǒng)計學方法應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗、方差分析、線性相關性分析。

2結果

2.1兩組血清IL-18、IL-35和TNF-α的表達比較兩組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異顯著(P<0.001)。即觀察組中見IL-18和TNF-α高表達，IL-35低表達。見表1。

2.2不同病變程度患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α表達量的比較不同病變程度患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異有統(tǒng)計學意義。見表2。

表1　兩組血清中IL-18、IL-35和

表2　不同病變程度患者血清中IL-18、IL-35和

2.3是否伴有嚴重并發(fā)癥患者血清IL-18、IL-35和TNF-α表達量的比較觀察組是否伴有嚴重并發(fā)癥患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異有統(tǒng)計學意義。見表3。

表3　是否伴有嚴重并發(fā)癥患者血清中IL-18、

2.4隨訪存活組與死亡組患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α表達量的比較不同預后分組患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達量差異有統(tǒng)計學意義。見表4。

表4　隨訪存活組與死亡組患者血清中IL-18、IL-35和

2.5觀察組IL-18、IL-35和TNF-α表達的相關性分析觀察組中IL-18和IL-35(r=-0.49，P=0.041 2)、IL-35和TNF-α(r=-0.46，P=0.038 7)均具有負相關性。

3討論

膿毒癥是指由感染所誘發(fā)的全身炎癥反應，多種細胞因子形成相互作用〔7〕。老年人由于免疫力低下和抵抗力低下，感染時常較重。IL-18是機體中的促炎物質(zhì)，表達升高時可以對NK細胞的增殖有一定影響〔8〕。有觀點認為IL-18可以誘導淋巴細胞的增殖過程，即促進Th0細胞向Th1細胞分化。有學者認為IL-18可以啟動炎性級聯(lián)反應，誘導淋巴細胞的克隆性增生和活化〔9,10〕。IL-35是IL家族的新成員，主要由Treg分泌，在正常機體中的表達穩(wěn)定，主要發(fā)揮抑制炎性反應及免疫因子活性的負向調(diào)節(jié)作用〔11,12〕。有研究認為IL-35可以抑制炎癥反應，并防止過度的自身免疫反應的發(fā)生〔13〕。動物實驗研究顯示IL-35在經(jīng)樹突細胞刺激后產(chǎn)生，可以抑制外周血中CD4和CD8陽性的T細胞反應，抑制過敏性病變的進展〔14〕。TNF-α在炎性病變時可以引起前列腺素和基質(zhì)金屬蛋白酶的增多，促進各器官纖維組織的重塑，同時引起成纖維細胞的增生〔15,16〕。也有觀點認為TNF-α能刺激機體成纖維細胞分泌多種IL，有效降解蛋白多糖，同時刺激血管內(nèi)皮細胞表達黏附分子，加速炎癥的進展〔17〕。

本實驗結果提示血清中IL-18、TNF-α、IL-35異常表達對促進膿毒血癥病變進展有重要作用。IL-18和TNF-α的高表達是機體炎性高反應狀態(tài)的一個指標，可以激活細胞因子的“瀑布效應”，同時引發(fā)炎癥的進展〔18〕。IL-35正常表達對于免疫系統(tǒng)和免疫反應具有負向調(diào)控的作用，可以抑制過度的炎癥反應及過度的自身免疫反應〔19〕。有學者發(fā)現(xiàn)IL-35表達下降的機體Treg 細胞數(shù)量明顯低于正常機體〔20〕，因此膿毒癥患者Treg 細胞量對IL-35表達有直接影響，推測膿毒血癥患者Treg 細胞可能受到一定損傷。IL-18、IL-35和TNF-α的生物活性與宿主感染密切相關，一方面表現(xiàn)為IL-18和TNF-α 誘導干擾素-γ生成而保護宿主，并在非特異性反應中作為免疫刺激因子協(xié)助特異性B淋巴細胞介導免疫反應〔21〕，另一方面IL-35表達下降后，引起相關抗炎介質(zhì)表達下降，炎性介質(zhì)對機體的損傷加重，同時可以對抗相關治療〔22,23〕。也有研究認為IL-18和TNF-α的水平是判斷細菌和病毒感染的較好指標〔24〕。

綜上，膿毒血癥老年患者血清中IL-18和TNF-α高表達、IL-35低表達，IL-18、IL-35和TNF-α三者間具有協(xié)同作用，共同促病變的進展。聯(lián)合檢測IL-18、IL-35和TNF-α的表達在一定程度上可以判斷預后。

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〔2014-03-11修回〕

(編輯苑云杰)