孫彩霞，景紹武，王 軍，*，許英杰

（1. 河 北省唐山市豐南區(qū)中醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北 唐山 063300；2. 河 北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院放療科，河北 石家莊 050011；3. 河 北大學(xué)附屬醫(yī)院眼科，河北 保定 071000）

低氧誘導(dǎo)因子-1α與卵巢上皮癌臨床病理關(guān)系的Meta分析

孫彩霞1，景紹武2，王 軍2，*，許英杰3

（1. 河 北省唐山市豐南區(qū)中醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北 唐山 063300；2. 河 北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院放療科，河北 石家莊 050011；3. 河 北大學(xué)附屬醫(yī)院眼科，河北 保定 071000）

卵巢上皮癌是女性常見的惡性腫瘤，難以早期發(fā)現(xiàn)，臨床預(yù)后差。如何提高其早期診斷率及改善預(yù)后已成為研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。已證實實體腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移依賴于腫瘤細(xì)胞對低氧環(huán)境的適應(yīng)，在這一過程中低氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia inducible factor-1α， HIF-1α） 起中樞紐帶作用［1］。有多項研究分析了HIF-1α 蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達(dá)及其與卵巢上皮癌臨床病理的關(guān)系，但結(jié)果報道不一［2-4］，目前尚無循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。本研究通過檢索相關(guān)文獻(xiàn)，運(yùn)用Meta分析探討了HIF-1α蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達(dá)及其與患者年齡、病理分級等的關(guān)聯(lián)，旨在明確HIF-1α與卵巢上皮癌的關(guān)系，為尋找新的治療方法提供參考和思路。

1 材料與方法

1.1 文獻(xiàn)來源

通過計算機(jī)檢索從建庫至2014-03-10中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫等國內(nèi)數(shù)據(jù)庫收錄的文獻(xiàn)，使用的關(guān)鍵詞為卵巢上皮癌和HIF-1α 或低氧誘導(dǎo)因子-1α，同時以ovarian epithelial carcinoma、HIF-1α或hypoxia inducible factor-1α為英文關(guān)鍵詞，從Cochrane Library、EMbase、Pubmed等外文數(shù)據(jù)庫檢索相關(guān)文獻(xiàn)，隨后對檢索到的文獻(xiàn)通過閱讀摘要和全文進(jìn)行人工篩選。最后一次檢索日期為2014-03-10。

1.2 納入與剔除標(biāo)準(zhǔn)

①國內(nèi)文獻(xiàn)須發(fā)表于核心期刊（被2013年版《中國科技核心期刊目錄》收錄的期刊），國外文獻(xiàn)采用英文全文發(fā)表，剔除僅有摘要的文獻(xiàn)；②HIF-1α蛋白檢測采用免疫組化法，檢測物為術(shù)后組織標(biāo)本，剔除免疫印跡法或檢測物為血漿；③臨床分期采用國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）分期標(biāo)準(zhǔn)；④包含統(tǒng)計需要的原始數(shù)據(jù)；⑤統(tǒng)計方法應(yīng)用恰當(dāng)，數(shù)據(jù)可靠，結(jié)果表達(dá)明確，有或可計算出優(yōu)勢比（odds ratio， OR）值及相應(yīng)的95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）。

1.3 質(zhì)量評估

對各獨(dú)立研究從以下幾方面進(jìn)行質(zhì)量評估，以考察各個研究是否存在偏倚及偏倚的影響程度：①研究對象納入標(biāo)準(zhǔn)及其基本構(gòu)成是否明確；②試驗設(shè)計是否科學(xué)；③統(tǒng)計方法運(yùn)用是否恰當(dāng)；④是否為病例對照研究；⑤是否就本研究存在的偏倚進(jìn)行了討論。以上5項，每滿足一項為1分，總分≥3者，視為質(zhì)量可靠。由2名評價員（孫彩霞和景紹武）根據(jù)統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立進(jìn)行評估，提取文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，而后交叉核對，如遇分歧通過討論解決或由第3位研究者（王軍）協(xié)助解決。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用Cochrane協(xié)作網(wǎng)提供的STATA 11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行Meta分析。計算OR及95%CI作為效應(yīng)量表示結(jié)果。應(yīng)用χ2檢驗對各研究結(jié)果進(jìn)行異質(zhì)性檢驗（以α=0.05為檢驗水平）。若各研究間無異質(zhì)性即P＞0.05，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行效應(yīng)量合并，反之則采用隨機(jī)效應(yīng)模型。進(jìn)行合并效應(yīng)值的顯著性檢驗采用z檢驗。剔除文獻(xiàn)中大樣本研究進(jìn)行敏感性分析，重新估計效應(yīng)量，并與排除前的效應(yīng)量進(jìn)行比較。應(yīng)用Begg test繪制漏斗圖，并進(jìn)行線性回歸模型（Egger’s z 檢驗，α=0.05為檢驗水準(zhǔn)）分析，檢驗倒漏斗圖的對稱性來識別納入文獻(xiàn)是否存在發(fā)表偏倚。

2 結(jié) 果

2.1 檢索結(jié)果及質(zhì)量評價

初檢出文獻(xiàn)81篇，通過閱讀摘要，剔除非核心期刊文獻(xiàn)28篇，再剔除研究對象為卵巢上皮癌細(xì)胞或移植瘤模型35篇。進(jìn)一步閱讀全文，剔除綜述性文獻(xiàn)5篇、重復(fù)發(fā)表文獻(xiàn)2篇、缺乏原始數(shù)據(jù)文獻(xiàn)5篇，最終僅6篇文獻(xiàn)納入本次Meta分析［5-10］，質(zhì)量評估均為4分，見表1。

2.2 納入文獻(xiàn)的基本數(shù)據(jù)

入選文獻(xiàn)中共257例患者，均為國內(nèi)病例資料。HIF-1α陽性表達(dá)率介于41.9%～90.0%之間?；颊卟±眍愋桶{液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、子宮內(nèi)膜樣癌、透明細(xì)胞癌4種類型，研究涵蓋了年齡、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等多個方面，詳細(xì)資料詳見表1。

2.3 HIF-1α在卵巢上皮癌中的表達(dá)

6篇文獻(xiàn)均比較了HIF-1α蛋白在卵巢上皮癌組織和正常組織中的表達(dá)情況，兩組間有統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性（P= 0.046），故采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行效應(yīng)量合并。結(jié)果顯示，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（OR=0.036， 95%CI： 0.010～0.135，P=0.000），HIF-1α在卵巢上皮癌組織中的總體陽性表達(dá)率為72.4%（186/257），較正常組織明顯增強(qiáng)，Meta分析森林圖見圖1。

2.4 HIF-1α與卵巢上皮癌各臨床病理特征的關(guān)系

2.4.1 HIF-1α與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移共納入3篇文獻(xiàn)，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性患者共60例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性患者共83例，經(jīng)比較兩組間無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性（P=0.760），故采用固定效應(yīng)模型。結(jié)果顯示HIF-1α與卵巢上皮癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在明顯相關(guān)（OR=0.080，95%CI：0.029～0.220， P=0.000），提示HIF-1α表達(dá)可促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移， Meta分析森林圖見圖2。

2.4.2 HIF-1α與臨床分期6項研究均分析了HIF-1α與卵巢上皮癌臨床分期的關(guān)系，6項研究中I+II期患者共97例，III+IV期共160例，兩組之間無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性（P=0.566），故采用固定效應(yīng)模型。結(jié)果顯示HIF-1α與卵巢上皮癌臨床分期存在明顯相關(guān)（OR=0.258， 95%CI：0.136～0.490，P=0.000），HIF-1α陽性表達(dá)患者臨床分期偏晚，Meta分析森林圖見圖3。

2.4.3 HIF-1α與年齡、病理類型及病理分級根據(jù)有無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性，選擇相應(yīng)的效應(yīng)模型，結(jié)果顯示HIF-1α與患者年齡、病理類型及病理分級均無明顯相關(guān)（P均＞0.05），見表2。

2.5 敏感性分析

6項研究納入病例數(shù)均較少，其中文獻(xiàn)［5］病例數(shù)為62，所占權(quán)重最大。在6篇有關(guān)HIF-1α蛋白在卵巢上皮癌表達(dá)的文獻(xiàn)中剔除1篇［5］大樣本文獻(xiàn)后合并OR為0.046，95%CI：0.022～0.099，P=0.000，與剔除前基本一致。在3篇有關(guān)HIF-1α與卵巢上皮癌患者年齡關(guān)系研究的文獻(xiàn)中剔除1篇［5］大樣本文獻(xiàn)后合并OR為2.155，95%CI：0.664～6.127，P=0.136，與剔除前基本一致。在4篇有關(guān)HIF-1α與病理類型關(guān)系研究的文獻(xiàn)中剔除1篇［5］大樣本文獻(xiàn)后合并OR為1.320，95%CI：0.512～3.405，P=0.565，與剔除前基本一致。在6篇有關(guān)HIF-1α與病理分級關(guān)系的文獻(xiàn)中剔除1篇［5］大樣本文獻(xiàn)后合并OR為0.595，95%CI：0.265～1262，P= 0.078，與剔除前基本一致。在3篇有關(guān)HIF-1α與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的文獻(xiàn)中剔除1篇［5］大樣本文獻(xiàn)后合并OR為0.080， 95% CI：0.015～0.412，P=0.003，與剔除前基本一致。在6篇有關(guān)HIF-1α與臨床分期關(guān)系的文獻(xiàn)中剔除1篇［5］大樣本文獻(xiàn)后合并OR為0.229，95%CI： 0.102～0.514， P=0.000，與剔除前基本一致。

2.6 發(fā)表偏倚分析

對納入文獻(xiàn)進(jìn)行漏斗圖分析，通過Egger’s z 檢驗來分析漏斗圖對稱性，如表3顯示所引有關(guān)文獻(xiàn)均無發(fā)表偏倚存在（P均＞0.05）。

3 討 論

腫瘤體積大于1 mm3時，自身的血液供應(yīng)就不能滿足其快速生長的需要，腫瘤內(nèi)部處于低氧的環(huán)境中［11］。HIF-1α是調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞適應(yīng)低氧的核心轉(zhuǎn)錄因子，在腫瘤的能量代謝、血管形成、侵襲轉(zhuǎn)移等方面發(fā)揮重要作用［12］。近年來已在人體多種惡性腫瘤中檢測到HIF-1α的表達(dá)，而在正常組織中HIF-1α不表 達(dá)［13］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，用小分子物質(zhì)抑制HIF-1α的表達(dá)后，腫瘤血管的形成能力明顯減弱，從而實現(xiàn)抑制腫瘤的生長［14］。因此，HIF-1α有可能成為治療惡性腫瘤的有效分子靶點(diǎn)。

卵巢癌中以上皮癌最為多見，占卵巢惡性腫瘤的80%～90%。由于其深居盆腔，目前還缺乏有效的早期診斷手段，臨床上患者就診時多已屬中晚期，預(yù)后較差［15］。提高卵巢上皮癌患者的早期診斷率及改善預(yù)后成為亟待解決的問題。檢索國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，HIF-1α在卵巢上皮癌中的表達(dá)及其與臨床病理特征關(guān)系的研究尚缺乏大樣本臨床病理資料，且結(jié)果不盡一致。根據(jù)本研究中納入與剔除標(biāo)準(zhǔn)，僅有6篇國內(nèi)文獻(xiàn)納入本次Meta分析。從表1中可以看出，各個研究得分均為4分，說明質(zhì)量較高。HIF-1α在卵巢上皮癌中的陽性率介于41.9%～90.0%之間，并且研究包括了病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等多個方面，能提供較為全面的數(shù)據(jù)來分析HIF-1α與卵巢上皮癌各臨床病理的關(guān)系。

納入的6項研究共包括257例卵巢上皮癌術(shù)后患者，HIF-1α總體陽性率為72.4%，結(jié)果顯示HIF-1α在卵巢上皮癌組織中的陽性表達(dá)率顯著升高（P＜0.05），說明HIF-1α蛋白高表達(dá)增加了卵巢上皮癌的發(fā)病風(fēng)險。通過臨床病理因素分層分析后發(fā)現(xiàn)，HIF-1α與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期明顯有關(guān)（P均＜0.05），HIF-1α高表達(dá)可促進(jìn)卵巢上皮癌患者出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床分期偏晚，而HIF-1α與年齡、病理類型及病理分級均無明顯相關(guān)（P均＞0.05）。HIF-1α可以作為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或臨床分期的判斷指標(biāo)。在分析HIF-1α表達(dá)及其與卵巢上皮癌各臨床病理的關(guān)系中分別剔除大樣本研究后發(fā)現(xiàn)，剔除后所得結(jié)果與之前結(jié)果基本一致，從而進(jìn)一步增加了結(jié)果的可靠性。

考慮到原始文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚也有可能影響結(jié)果的可靠性，本研究對納入本次Meta分析的文獻(xiàn)有無偏倚也進(jìn)行了統(tǒng)計分析。通過Egger分析各個倒漏斗圖可知，本次納入的文獻(xiàn)偏倚性較小（P均＞0.05），見表3，說明潛在的偏倚對最終結(jié)論無實質(zhì)性影響，從而進(jìn)一步增加了結(jié)果的可靠性。然而本次Meta分析還存在著源自發(fā)表文獻(xiàn)的局限性，如本研究采納的文獻(xiàn)均為公開發(fā)表的，文種僅限定為中文，而尚未公開發(fā)表文獻(xiàn)及可能存在的文種偏倚也可能影響本次Meta分析的結(jié)果。盡管納入的6項研究均采用免疫組化法來檢測HIF-1α蛋白的表達(dá)，但抗體的生產(chǎn)廠家、稀釋濃度、判定標(biāo)準(zhǔn)并不完全一致，也有可能影響本次Meta 分析的結(jié)果。此外，由于納入研究缺少卵巢上皮癌患者生存率的原始數(shù)據(jù)，有關(guān)HIF-1α與卵巢上皮癌預(yù)后的關(guān)系尚需進(jìn)一步隨訪報道。

綜上所述，本研究結(jié)果提示HIF-1α蛋白高表達(dá)增加了卵巢上皮癌的發(fā)病風(fēng)險。HIF-1α可以作為卵巢上皮癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期的判斷指標(biāo)，值得進(jìn)一步深入研究。

［1］ Semenza GL. Development of novel therapeutic strategies that target HIF-1［J］. Expert Opin Ther Targets，2006，10（2）： 267-280.

［2］ Kato M，Yamamoto S，Takano M，et al. Aberrant expression of the mammalian target of rapamycin，hypoxia-inducible factor-1α，and glucose transporter 1 in the development of ovarian clear-cell adenocarcinoma［J］. Int J Gynecol Pathol，2012，31（3）：254-263.

［3］ Miyazawa M，Yasuda M，F(xiàn)ujita M，et al. Association of hypoxia-inducible factor-1 expression with histology in epithelial ovarian tumors：a quantitative analysis of HIF-1［J］. Arch Gynecol Obstet，2009，279（6）：789-796.

［4］ Nakayama A，Kanzaki A，Hata K，et al. Hypoxia-inducible factor-1 alpha （HIF-1 alpha） gene expression in human ovarian carcinoma［J］. Cancer Lett，2002，176（2）：215-223.

［5］ 陳 穎，張 磊，劉翔宇，等. HIF-1α、VEGF和Sema4D 蛋白在卵巢上皮癌組織中的表達(dá)及其臨床意義［J］. 中華婦產(chǎn)科雜志，2011，46（10）：786-788.

［6］ 肖穎麗，梁志清，邱 敏. 卵巢上皮性癌中HIF-1α、COX-2表達(dá)和血管生成的關(guān)系［J］. 重慶醫(yī)學(xué)，2005，34（10）： 1503-1505.

［7］ 張麗芬，張艷梅，趙金紅，等. 卵巢上皮性癌組織中HIF-1α及VEGF的表達(dá)［J］. 山東醫(yī)藥，2007，47（18）：72-73.

［8］ 李鎖嚴(yán)，楊薇薇，溫秋婷，等. 上皮性卵巢上皮癌中PTEN和HIF-1α的表達(dá)及其相關(guān)性［J］. 臨床與實驗病理學(xué)雜志，2009，25（4）：361-363.

［9］ 俞 晶，黃云超，張麗娟，等. HIF-1α和GLUT-1在卵巢上皮癌中的表達(dá)及臨床意義［J］. 臨床腫瘤學(xué)雜志，2009，14（3）：207-211.

［10］ 江飛云，倪觀太. 卵巢上皮癌中缺氧誘導(dǎo)因子1α蛋白的表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的相關(guān)性［J］. 腫瘤研究與臨床，2012，24（12）：850-851.

［11］ Dewhirst MW，Cao Y，Moeller B. Cycling hypoxia and free radicals regulate angiogenesis and radiotherapy response ［J］. Nat Rev Cancer，2008，8（6）：425-437.

［12］ Ellis L，Hammers H，Pili R. Targeting tumor angiogenesis withhistone deacetylase inhibitors［J］. Cancer Lett，2009，280（2）：145-153.

［13］ Argyriou P，Papageorgiou SG，Panteleon V，et al. Hypoxiainducible factors in mantle cell lymphoma：implication for an activated mTORC1→HIF-1 alpha pathway［J］. Ann Hematol，2011，90（3）：315-322.

［14］ Nordgren IK，Tavassoli A. Targeting tumor angiogenesis with small molecule inhibitors of hypoxia inducible factor［J］. Chem Soc Rev，2011，40（8）：4307-4317.

［15］ 劉新民. 婦產(chǎn)科手術(shù)學(xué)［M］. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：317-318.

Relationship between hypoxia inducible factor -1α and clinicopathology of epithelial ovarian cancer：Meta analysis

SUN Caixia1，JING Shaowu2，WANG Jun2，*，XU Yingjie3
（1. Department of Gynecology， Traditional Chinese Medicine Hospital of Fengnan District， Tangshan 063300； 2. Department of Radiation Oncology， Fourth Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050011； 3. Department of Ophthalmology， Affiliated Hospital of Hebei University， Baoding 071000， Hebei， China）

目的： 探討低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）在卵巢上皮癌中的表達(dá)及其與卵巢上皮癌各臨床病理指標(biāo)的關(guān)系，明確HIF-1α在卵巢上皮癌惡性生物學(xué)行為中的作用。方法：計算機(jī)檢索Cochrane Library、EMbase、Pubmed數(shù)據(jù)庫以及中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫中有關(guān)HIF-1α與卵巢上皮癌研究的文獻(xiàn)，采用STATA 11.0軟件包分析HIF-1α蛋白表達(dá)與患者年齡、病理類型、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期之間的關(guān)系，采用合并優(yōu)勢比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）進(jìn)行分析。結(jié)果：最終入選6篇文獻(xiàn)共257例卵巢上皮癌患者，結(jié)果顯示HIF-1α總體陽性表達(dá)率為72.4%（186/257），較正常組織表達(dá)明顯增加（OR= 0.036， 95%CI：0.010～0.135，P=0.000）。HIF-1α與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)（OR=0.080，95%CI：0.029～0.220， P=0.000； OR= 0.258，95%CI：0.136～0.490，P=0.000）。HIF-1α陽性表達(dá)患者易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期偏晚。HIF-1α與年齡、病理類型及病理分級無明顯相關(guān)（P均＞0.05）。結(jié)論：HIF-1α蛋白表達(dá)增加了卵巢上皮癌的發(fā)病風(fēng)險，HIF-1α可能作為有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或臨床分期的判斷指標(biāo)。

低氧誘導(dǎo)因子-1α；卵巢腫瘤；低氧；免疫組化

OBJECTIVE:To explore the expression of hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α） in epithelial ovarian cancer and its relationship with clinical pathology，in order to understand the effect of HIF-1α in malignant biological behavior of ovarian epithelial carcinoma clear.METHODS：Original foreign literatures on the correlation between HIF-1α and epithelial ovarian cancer were selected from Cochrane Library，EMbase database，Pubmed，and Chinese original literatures were from CNKI，CBM. All analyses were performed by software STATA 11.0. Relationships between HIF-1α expression and age，pathological type，histological grade，lymph node metastasis，clinical stage were analyzed using pooled odds ratio （OR） with 95% confidence interval （CI）.RESULTS：A total of 6 papers including 257 cases of epithelial ovarian cancer were analyzed. Compared with that in normal tissue，total positive rate of HIF-1αin epithelial ovarian cancer was 72.4%，which was increased significantly （OR=0.036，95%CI：0.010-0.135，P=0.000）； HIF-1α was significantly correlated with lymph node metastasis and clinical stage（OR=0.080，95%CI：0.029-0.220，P=0.000； OR=0.258，95%CI：0.136-0.490， P=0.000）. Patients with positive expression of HIF-1α were prone to lymph node metastasis and advanced clinical stage. HIF-1α had no significant relation with age，pathological type and pathological grading （P＞0.05）.CONCLUSION：The expression of HIF-1α protein increased the risk of epithelial ovarian cancer. HIF-1α could be used as indicator of lymph node metastasis and clinical stage.

hypoxia inducible factor-1α；ovarian carcinoma；hypoxia；immunohistochemistry

R730.2

A

1004-616X（2014）01-0049-06

10.3969/j.issn.1004-616x.2014.01.011

2014-06-17；

2014-09-06

作者信息：孫彩霞，E-mail：scx13784095356@126.com。*通信作者：王 軍，E-mail：wangjun90@aliyun.com