栗 嬋，韓麗萍（鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450003）

CD4、CD8及FOXP3T淋巴細(xì)胞在子宮頸癌中的表達(dá)及意義

栗 嬋，韓麗萍
（鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450003）

目的 探討CD4、CD8及Foxp3T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的表達(dá)及意義。方法 應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)，選取2012年7月～2014年7月我院婦科手術(shù)切除或活檢的宮頸組織石蠟標(biāo)本75例，其中宮頸癌患者63例，年齡40～60歲，平均年齡50歲。檢測(cè)CD4、CD8及Foxp3T淋巴細(xì)胞在宮頸癌組織中的表達(dá)，從而進(jìn)一步了解CD4、CD8及Foxp3T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中意義。結(jié)果 CD4T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為46%（29/63）；CD8T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為35%（22/63）；Foxp3T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為78%（49/63）。結(jié)論 CD4、CD8分子在宮頸癌組織中表達(dá)顯著減少或無表達(dá)，F(xiàn)oxp3則升高。說明宮頸局部微環(huán)境變化和免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)狀態(tài)的改變與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系。

CD4；CD8；Foxp3；宮頸微環(huán)境；子宮頸癌

隨著對(duì)免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)對(duì)腫瘤影響的關(guān)注度逐年提高，人們對(duì)CD4、CD8及Foxp3T淋巴細(xì)胞在腫瘤細(xì)胞免疫中的作用也越來越重視。故此，研究CD4，CD8及Foxp3T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的表達(dá)及意義對(duì)了解宮頸癌時(shí)子宮微環(huán)境的變化及宮頸癌的診斷及治療有明確的臨床意義[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年7月～2014年7月我院婦科手術(shù)切除或活檢的宮頸組織石蠟標(biāo)本75例，其中宮頸癌患者63例，年齡40～60歲，平均年齡50歲。依據(jù)2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）的臨床分期標(biāo)準(zhǔn)：宮頸鱗癌I期21例；II期17例；III期11例；IV期14例；其中發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移9例，宮頸炎12例。

1.2 主要試劑和儀器

CD8mAb：兔抗人CD8單克隆抗體，工作濃度為1:500；CD4mAb：兔抗人CD4單克隆抗體，工作濃度為1:250；Foxp3 mAb：鼠抗人Foxp3單克隆抗體，工作濃度為1:100；攤片機(jī)，烤片機(jī)（新苗DHG-914385-III電熱恒溫干燥箱）；CHS型光學(xué)顯微鏡（01ympus光學(xué)有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

將選好的石蠟標(biāo)本連續(xù)切片，制成4 μm厚的切片。依次經(jīng)過脫蠟和水化。行蘇木精-伊紅染色（HE）和免疫組化染色，高溫高壓抗壓修復(fù)，二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色，最后進(jìn)行鏡檢和拍照。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

CD4陽性產(chǎn)物呈棕黃色顆粒狀，主要分布于CD4+T細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜中。CD4T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為46%，宮頸癌Ⅰ期（-）5例，（+）11例，（++）5例；宮頸癌Ⅱ期（-）7例，（+）7例，（++）3例；宮頸癌Ⅲ期（-）9例，（+）2例；宮頸癌Ⅳ期（-）13例，（+）1例。CD8分子表達(dá)于T淋巴細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿，染色從淺黃到棕褐色。多分布于宮頸上皮層及基底層的間質(zhì)組織，在癌灶組織亦有少量表達(dá)。CD8T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為35%，宮頸癌Ⅰ期（-）8例，（+）10例，（++）3例；宮頸癌Ⅱ期（-）9例，（+）6例，（++）2例；宮頸癌Ⅲ期（-）10例，（+）1例；宮頸癌Ⅳ期（-）13例，（+）1例。Foxp3陽性染色主要位于細(xì)胞核內(nèi)，少數(shù)在細(xì)胞膜中顯色。其陽性表達(dá)表現(xiàn)為淺黃色、棕黃色、棕褐色顆粒，逐漸加深。Foxp3T淋巴細(xì)胞在宮頸癌中的陽性表達(dá)率為78%，宮頸癌I期（-）1例，（+）20例；宮頸癌Ⅱ期（-）3例，（+）6例，（++）8例；宮頸癌Ⅲ期（-）4例，（+）3例，（++）4例；宮頸癌Ⅳ期（-）6例，（+）2例，（++）3例，（+++）3例。

CD4、CD8分子在宮頸癌組的陽性表達(dá)率明顯低于宮頸炎組（P＜0.05）；Foxp3在宮頸癌組的陽性表達(dá)率明顯高于宮頸炎組（P＜0.05）。見圖1、圖2、圖3。

圖1 CD4在不同宮頸病變組織中的表達(dá)情況

圖2 CD8在不同宮頸病變組織中的表達(dá)情況

圖3 Foxp3在不同宮頸病變組織中的表達(dá)情況

3 討 論

3.1 CD4+T淋巴細(xì)胞與宮頸癌的關(guān)系

CD4+T淋巴細(xì)胞主要識(shí)別腫瘤細(xì)胞分泌的可溶性抗原，同時(shí)，CD4+T淋巴細(xì)胞還能釋放多種細(xì)胞因子參與機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答[2]。因此，CD4+T淋巴細(xì)胞減少為腫瘤細(xì)胞的免疫逃避提供了條件。

3.2 CD8+T淋巴細(xì)胞與宮頸癌的關(guān)系

CD8分子是T淋巴細(xì)胞表面的糖蛋白，T淋巴細(xì)胞活化并分化為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL），從而發(fā)揮殺傷靶細(xì)胞的作用[3]，當(dāng)腫瘤細(xì)胞HLA-I類抗原表達(dá)降低時(shí)，被激活的CTL數(shù)量減少，機(jī)體清除腫瘤細(xì)胞的能力相應(yīng)減弱，從而使腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)繼續(xù)生存。由此可見CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T 淋巴細(xì)胞在抗腫瘤反應(yīng)中雖然發(fā)揮了不同作用，但它們一旦改變，就能夠使腫瘤細(xì)胞逃避機(jī)體的免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和清除，為腫瘤細(xì)胞的發(fā)展、侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移提供了必要條件。

3.3 Foxp3與宮頸癌的關(guān)系

有研究發(fā)現(xiàn)，持續(xù)的HPV感染與Foxp3的表達(dá)高度相關(guān)，F(xiàn)oxp3+淋巴細(xì)胞的數(shù)量及功能的增加主要與機(jī)體對(duì)腫瘤抗原免疫反應(yīng)差以及機(jī)體免疫系統(tǒng)功能紊亂有關(guān)[4]。

4 結(jié) 語

本研究采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)宮頸癌、CIN及慢性宮頸炎中CD4、CD8和Foxp3分子的表達(dá)，結(jié)果如下。

1）CD4、CD8分子在宮頸癌組的表達(dá)率均明顯降低；而Foxp3則升高。2）CD4、CD8分子的表達(dá)存在正相關(guān)關(guān)系。3）在宮頸癌組中，CD4、CD8和Foxp3分子在宮頸癌的不同臨床分期表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

綜上所述，CD4、CD8分子在宮頸癌組織中表達(dá)減少及無表達(dá)，F(xiàn)oxp3則升高。提示宮頸的局部免疫狀態(tài)與宮頸病變的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

[1] 樂 杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011.

[2] RE. Pollock.臨床腫瘤學(xué)手冊(cè)[M].第7版.吉林:吉林科學(xué)出版社,2001.

[3] 曹澤毅.中華婦產(chǎn)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:565-577.

[4] 覃 燁,王紅麗,任 彤.宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤病變與生殖道感染的相關(guān)性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(4):811-813.

本文編輯：吳玲麗

Expression and signifi cance of CD4, CD8and FOXP3T lymphocytes in cervical cancer

LI Chan, HAN Li-ping (The First Affi liated Hospital of Zhengzhou University, Henan Zhengzhou 450003, China)

R737.3

B

ISSN.2095-8803.2015.09.009.02