王東明，薛 晶，申興斌，張志勇

（1.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院；3.唐山市工人醫(yī)院病理科）

MTA2和MMP-14在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及意義

王東明1，薛 晶2，申興斌2，張志勇3△

（1.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院；3.唐山市工人醫(yī)院病理科）

目的：研究轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2（MTA2）和基質(zhì)金屬蛋白酶-14（MMP-14）在結(jié)腸癌中的表達(dá)及意義。方法：采用免疫組織化學(xué)MaxVision法檢測(cè)86例結(jié)腸癌組織、60例結(jié)腸腺瘤上皮內(nèi)瘤變組織和60例癌旁正常結(jié)腸黏膜組織MTA2和MMP-14的表達(dá)情況。結(jié)果：結(jié)腸癌組織MTA2、MMP-14的陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于結(jié)腸腺瘤和癌旁正常黏膜（P＜0.01），且均與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、脈管浸潤(rùn)、是否伴有黏液有關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論：結(jié)腸癌組織MTA2和MMP-14的異常表達(dá)可能為判斷結(jié)腸癌是否有轉(zhuǎn)移與浸潤(rùn)提供依據(jù)。

結(jié)腸癌；轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2（MTA2）；基質(zhì)金屬蛋白酶-14（MMP-14）；免疫組織化學(xué)

結(jié)直腸癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，世界范圍內(nèi)死于結(jié)直腸癌的患者每年約有60萬(wàn)人，在我國(guó)結(jié)直腸癌的發(fā)病率居第三位，死亡率已居第五位［1-2］。在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的過(guò)程中，最常見(jiàn)的生物學(xué)行為是轉(zhuǎn)移。作為組蛋白去乙?；钢匾M成部分的轉(zhuǎn)移相關(guān)家族，通過(guò)對(duì)核染色質(zhì)的影響進(jìn)行基因調(diào)控，其中轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2（MTA2）的促腫瘤形成及轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)作用已在多種腫瘤組織中得到證實(shí)?；|(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）及其抑制物在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要的促進(jìn)作用，其中的MMP14作為一類新膜型MMPs，對(duì)降解細(xì)胞外基質(zhì)具有重要作用。本研究通過(guò)免疫組化法觀察MTA2及MMP14在結(jié)腸癌中的表達(dá)情況及其與結(jié)腸癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系，分析二者在結(jié)腸癌浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2006年1月-2007年9月河北醫(yī)科大學(xué)附屬唐山市工人醫(yī)院手術(shù)切除治療的86例結(jié)腸癌患者，男46例、女40例，年齡36-78歲、平均52.52±8.72歲。同期60例結(jié)腸腺瘤并伴有上皮內(nèi)瘤變的標(biāo)本，男30例、女30例，年齡37-77歲、平均51.44±7.61歲。同期60例癌旁正常黏膜標(biāo)本，男30例、女30例，年齡38-75歲、平均51.63±8.01歲。所有患者在接受治療前均排除糖尿病、慢性肝病、糖皮質(zhì)激素用藥史等，結(jié)腸癌患者在手術(shù)前均未接受過(guò)放療、化療及免疫治療。三組患者性別、年齡、體重等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法及結(jié)果判定 采用MaxVision免疫組化染色法。MTA2一抗為兔抗人MTA2多克隆抗體（美國(guó)DAKO公司），陽(yáng)性產(chǎn)物為棕黃色顆粒狀，位于細(xì)胞核；MMP14一抗為兔抗人MMP-14多克隆抗體（武漢博士德生物技術(shù)有限公司），陽(yáng)性產(chǎn)物為棕黃色顆粒狀，位于細(xì)胞質(zhì)。每個(gè)切片于高倍鏡（×400）下選擇10個(gè)細(xì)胞染色集中的區(qū)域（熱點(diǎn)區(qū)），計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞占全部計(jì)數(shù)細(xì)胞的百分率，以陽(yáng)性細(xì)胞率＜25%為陰性、≥25%為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SSPS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，行卡方檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 MTA2和MMP14的表達(dá)情況 從癌旁正常黏膜到結(jié)腸腺瘤和結(jié)腸癌，MTA2、MMP14的陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高，兩兩比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見(jiàn)表1：2.2 MTA2、MMP14表達(dá)結(jié)腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期C+D期、腫瘤直徑≥3cm、浸潤(rùn)至漿膜及以外、有脈管浸潤(rùn)、伴有黏液的結(jié)腸癌MTA2、MMP14的陽(yáng)性表達(dá)率均明顯升高（P ＜0.05）。結(jié)直腸癌MTA2、MMP14表達(dá)與性別、年齡，炎細(xì)胞浸潤(rùn)、腫瘤部位無(wú)關(guān)（P＞0.05）。見(jiàn)表2：

表1 三種結(jié)腸組織MTA2和MMP14的表達(dá)情況

表2 MTA2在結(jié)腸癌組中與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系

3 討論

MTA2是1998年Zhang等首先發(fā)現(xiàn)屬于MTAs（metastasisassociated gene）家族的成員之一。MTA2是一個(gè)由668個(gè)氨基酸殘基編碼、分子量為70kDa的蛋白質(zhì)，人MTA2基因位于染色體11q1213.1，在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，與MTA1有65%的同源性。MTA1促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移途徑可能是通過(guò)促進(jìn)腫瘤血管生成或降低細(xì)胞間黏附性完成。由此推測(cè)，MTA2可能具有同樣促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的作用；此外還有研究認(rèn)為MTA2與生物個(gè)體的發(fā)育相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌組織MTA2的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于結(jié)腸腺瘤和癌旁正常黏膜，并且結(jié)腸癌組織低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期C+D期、腫瘤直徑≥3cm、浸潤(rùn)深度達(dá)漿膜及以外、有脈管浸潤(rùn)、伴有黏液者M(jìn)TA2的陽(yáng)性表達(dá)率升高，此結(jié)果與Lee等［3］的研究結(jié)果相似。

MMP14（膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1，MT1-MMP）作為膜型蛋白酶的一員，為首次被發(fā)現(xiàn)具有跨膜序列的MMPs，其主要的生物學(xué)功能為：通過(guò)上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)血管的生成；介導(dǎo)MMP2酶原的激活，從而共同參與腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。近年的研究表明，MMP14在食管癌、乳腺癌、胃癌等惡性腫瘤中表達(dá)升高，且與有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的分期密切相關(guān)［4-6］。本研究亦證實(shí)了這一點(diǎn)，結(jié)腸癌組織MMP14的陽(yáng)性表達(dá)率明顯升高，且與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、脈管浸潤(rùn)、是否伴有黏液有關(guān)。

綜上所述，結(jié)腸癌組織MTA2、MMP-14的陽(yáng)性表達(dá)率明顯升高，且均與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、脈管浸潤(rùn)、是否伴有黏液有關(guān)，因此提示，MTA2和MMP-14可能在結(jié)腸癌的轉(zhuǎn)移與浸潤(rùn)過(guò)程發(fā)揮重要作用。

［1］Garcia-Albeniz X， Chan AT. Aspirin for the prevention of colorectal cancer［J］. Best Pract Res Clin Gastroenterol， 2011， 25（4-5）： 461-472.

［2］鄭榮壽，張思維，吳良有，等.中國(guó)腫瘤登記地區(qū)2008年惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析［J］.中國(guó)腫瘤，2012，21（1）：1-12.

［3］Lee H， Ryu SH， Hong SS， et al. Overexpression of metastasisassociated protein 2 is associated with hepatocellular carcinoma size and differentiation［J］. J Gastroenterol Hepatol， 2009， 24（8）：1445-1450.

［4］Akanuma N， Hoshino I， Akutsu Y， et al. MicroRNA-133a regulates the mRNAs of two invadopodia-related proteins，F(xiàn)SCN1 and MMP14， in esophageal cancer［J］. Br J Cancer， 2014，110（1）： 189-198.

［5］He L， Chu D， Li X， et al. Matrix metalloproteinase-14 is a negative prognostic marker for patients with gastric cancer［J］. Dig Dis Sci， 2013， 58（5）： 1264-1270.

［6］張金玲，費(fèi)雁，陳偉，等.MMP-2，MMP-14，TIMP-2在胃癌組織中的表達(dá)及意義［J］.華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2013，42（2）：227-230.

EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF MTA2 AND MMP-14 IN COLON CANCER

WANG Dong-ming， XUE Jing， SHEN Xing-bin， et al

（School of Basic Medical Sciences， Hebei United University， Hebei Tangshan 063000， China）

Objective： To study the expression and signifi cance of metastasis-associated protein 2 （MTA2） and matrix metalloproteinase -14 （MMP-14） in colon cancer.Methods： MaxVision immunohistochemical method was used to detect the expression of MTA2 and MMP-14 in 86 cases colon cancer tissue， 60 cases colonic adenoma intraepithelial neoplasia tissue and 60 cases adjacent normal colonic mucosa tissue. Results：The positive expression rate of MTA2 and MMP-14 in colon cancer tissue were obviously higher than colonic adenoma intraepithelial neoplasia tissue and adjacent normal mucosa tissue （P＜0.01）. Moreover， the expression of MTA2 and MMP-14 in colon cancer were associated with differentiated degree，lymph node metastasis， Dukes stage， tumor size， infi ltration depth， vascular invasion and if accompanied by mucus （P＜0.05）. Conclusions： Abnormal expression of MTA2 and MMP-14 may provide basis for judging metastasis and invasion of colon cancer.

Colon cancer； Metastasis-associated protein 2 （MTA2）； Matrix metalloproteinase -14 （MMP-14）；Immunohistochemistry

R735.3

A

1004-6879（2015）02-0104-03

2014-09-07）

（基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)欄目編輯：陳志宏）