張海峰，申興斌，張志勇

（1.河北聯(lián)合大學基礎醫(yī)學院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科；3.唐山市工人醫(yī)院病理科）

IGFBP-2在結(jié)直腸癌中的表達和意義

張海峰1，申興斌2△，張志勇3△

（1.河北聯(lián)合大學基礎醫(yī)學院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科；3.唐山市工人醫(yī)院病理科）

目的：探討胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2（IGFBP-2）在結(jié)直腸癌中的表達情況及其與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關系。方法：采用免疫組化Maxvision法檢測80例結(jié)直腸癌、50例癌旁正常黏膜和50例結(jié)直腸腺瘤中IGFBP-2的表達情況。結(jié)果：結(jié)直腸癌組織IGFBP-2蛋白的表達水平明顯高于結(jié)直腸腺瘤和癌旁正常黏膜組織（P＜0.01，P＜0.05）。結(jié)直腸癌IGFBP-2蛋白表達與年齡、性別無關（P＞0.05），與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Duke’s分期有關（P＜0.05）。結(jié)論：IGFBP-2蛋白高表達在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要作用，可作為判斷結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的預測因素。

結(jié)直腸癌；胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2（IGFBP-2）；免疫組織化學染色

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2（IGFBP-2）是與胰島素樣生長因子（IGF）有高度親和力的七肽蛋白［1］。研究發(fā)現(xiàn)，IGFBP-2可通過多種途徑促進腫瘤細胞增殖、分化，并通過刺激腫瘤血管形成誘導腫瘤發(fā)生發(fā)展。本研究采用免疫組化法檢測IGFBP-2蛋白的表達水平，分析其與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的關系。

1 材料與方法

1.1 材料 承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院2013年5月-2014年12月手術切除經(jīng)病理證實為結(jié)直腸癌（CC）的標本80例，術前均未接受放化療且全部為腺癌，其中高-中分化66例、低分化14例，未穿透肌層18例、穿透肌層至漿膜及漿膜外62例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移52例、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例。同時，選取距癌旁5-10cm經(jīng)病理證實為正常黏膜（NM）的標本50例，以及外科手術后經(jīng)病理證實為結(jié)直腸腺瘤（Ad）標本50例。所有組織常規(guī)取材，石蠟包埋。

1.2 免疫組化染色及結(jié)果判定 采用MaxVision免疫組化法檢測IGFBP-2蛋白表達。兔抗人IGFBP-2單克隆抗體，Abcam公司；Maxvision試劑盒，邁新生物技術公司。以PBS代替一抗為陰性對照，以已知胃癌陽性組織切片為陽性對照，以細胞膜及細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應。采用Volm雙評分法判定結(jié)果［2］。在染色均勻的腫瘤區(qū)選取5個高倍鏡視野（×400）：①按陽性細胞百分率（A值）評分：＜25%為1分，25%-50%為2分，50%為3分；②按染色強度（B值）評分，不著色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。以A+B判定最終結(jié)果：陰性（-）：0分，弱陽性（+）：1-2分，中度陽性（++）：3-4分，強陽性（+++）：5-6分。

1.3 統(tǒng)計分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析，等級資料行秩和檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 IGFBP-2蛋白的表達情況 IGFBP-2主要表達于細胞漿和細胞膜，呈棕黃色顆粒狀。結(jié)直腸癌IGFBP-2蛋白的表達水平明顯高于結(jié)直腸腺瘤和癌旁正常黏膜（P ＜0.01，P＜0.05）。見表1：

表1 不同結(jié)直腸組織IGFBP-2蛋白的表達情況

2.2 IGFBP-2蛋白表達與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關系結(jié)直腸癌IGFBP-2蛋白表達與年齡、性別無關（P＞0.05），與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Duke’s分期有關（P＜0.05）。見表2：

表2 IGFBP-2蛋白表達與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關系

3 討論

結(jié)直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，嚴重威脅著人類的健康，其死亡率占所有惡性腫瘤的9%，在全世界排名第二，在我國發(fā)病率一直呈上升趨勢［3-4］。結(jié)直腸癌的發(fā)生是一個長期的多因素多階段參與的復雜過程，涉及到多種因子和多個步驟的協(xié)同累積作用。

IGFBP-2屬胰島素樣生長因子（IGFs）家族成員，其表達受多種激素和生長因子的影響，已知調(diào)節(jié)IGFBP-2表達的激素包括生長激素、IGF-1、IGF-2、雌激素和胰島素等［5］。近年研究發(fā)現(xiàn)，IGFBP-2具有許多獨立于IGF之外的作用，與腫瘤細胞的生長、黏附和侵襲等有關，參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展［6-10］。IGFBP-2高表達促進腫瘤發(fā)生發(fā)展的可能機制包括：高表達的IGFBP-2通過蛋白水解酶的降解作用增強IGF的功能；IGFBP-2直接作用于腫瘤細胞，促進腫瘤細胞生長、增殖。

本研究結(jié)果顯示，在癌旁正常黏膜、結(jié)直腸腺瘤、結(jié)直腸癌中IGFBP-2蛋白的表達水平逐漸升高，證實了前人的研究結(jié)果，同時提示IGFBP-2參與了結(jié)直腸組織的癌變過程。進一步分析顯示，結(jié)直腸癌IGFBP-2蛋白的表達與年齡、性別無關，與腫瘤的分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Duke’s分期有關。提示IGFBP-2可能參與了結(jié)直腸癌的浸潤、發(fā)展和遠處播散過程，伴隨著IGFBP-2的高表達，結(jié)直腸癌更具有侵襲性。這與Zhang等［11］研究發(fā)現(xiàn)的IGFBP-2基因高表達有利于腫瘤侵襲的結(jié)果一致。另外，有觀點認為造成腫瘤發(fā)展的部分原因是由于IGFBP-2的過度表達，導致MMP-2（基質(zhì)金屬蛋白酶-2）的表達增加，從而促進了腫瘤的侵襲［12］。最近還有研究認為，IGFBP-2能通過促進腫瘤組織的血管生成促進腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移。

綜上所述，本研究為IGFBP-2蛋白成為預測結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移和預后的潛在的腫瘤標志物提供了實驗依據(jù)。

［1］Schlenska-Lange A， Knupfer H， Lange T， et al. Cell proliferation and migration in glioblastoma multiforme cell lines are inf luenced by insulin-like growth factor I in vitro［J］.Anticancer Res， 2008，28（2A）： 1055-1060.

［2］Volm M， Koomagi R， Mattern J. Prognathic value of vascular endothelial growth factor and its receptor Flt-1 in squamous cell lung cancer［J］.Int J Cancer， 1997，74（1）： 64-68.

［3］Labianca R， Beretta GD， Kildani B， et al. Colon cancer［J］. Crit Rev Oncol Hematol， 2010， 74（2）： 106-133.

［4］Siegel R， Ward E， Brawley O， et al. Cancer statistics， 2011：the impact of eliminating socioeconomic and racial disparities on premature cancer deaths［J］.CA Cancer J Clin， 2011， 61（4）： 212-236.

［5］Cardona-Gómez GP， Chowen JA， Garcia-Segura LM. Estradiol and progesterone regulate the expression of insulin-like growth factor-I receptor and insulin-like growth factor binding protein-2 in the hypothalamus of adult female rats［J］. J Neurobiol， 2000，43（3）： 269-281.

［6］Zhang L， Huang W， Chen J， et al. Expression of IGFBP2 in gastric carcinoma and relationship with clinicopathologic parameters and cell proliferation［J］. Dig Dis Sci， 2007， 52（1）： 248-253.

［7］Huynh H， Iizuka S， Kaba M， et al. Insulin-like growth factorbinding protein 2 secreted by a tumorigenic cell line supports ex vivo expansion of mouse hematopoietic stem cells［J］. Stem Cells，2008， 26（6）： 1628-1635.

［8］Mehrian-Shai R， Chen CD， Shi T， et al. Insulin growth factorbinding protein 2 is a candidate biomarker for PTEN status and PI3K/Akt pathway activation in glioblastoma and prostate cancer［J］. Proc Natl Acad Sci U S A， 2007， 104（13）： 5563-5568.

［9］Miyako K， Cobb LJ， Francis M， et al. PAPA-1 is a nuclear binding partner of IGFBP-2 and modulates its growth-promoting actions［J］. Mol Endocrinol， 2009， 23（2）： 169-175.

［10］Hoeflieh A， Fettscher O， Lahm H， et al. Overexpression of insulin-like growth factor-binding protein-2 results in increased tumorigenic potential in Y-1 adrenocortical tumor cells［J］. Cancer Res， 2000， 60（4）： 834-838.

［11］Zhang W， Wang H， Song SW， et al. Insulin-like growth factor binding protein 2： gene expression microarrays and the hypothesisgeneration paradigm［J］.Brain Pathol， 2002， 12（1）： 87-94.

［12］Wang H， Wang H， Shen W， et al. Insulin-like growth factor binding protein 2 enhances glioblastoma invasion by activating invasion-enhancing genes［J］.Cancer Res， 2003， 63（15）：4315-4321.

EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF IGFBP-2 IN COLORECTAL CARCINOMA

ZHANG Hai-feng， SHEN Xing-bin， ZHANG Zhi-yong

（Basic Medical College of Hebei United University， Hebei Tangshan 063000， China）

Objective：To investigate the expression of insulin like growth factor binding protein 2 （IGFBP-2）in colorectal carcinoma and the relationships between IGFBP-2 expression and clinicopathologic features of colorectal carcinoma.Methods：Maxvision immunohistochemical stain was used to detect the IGFBP-2 expression in 80 cases colorectal carcinoma， 50 cases colorectal adenomas and 50 cases adjacent normal mucosa. Results： IGFBP-2 expression in colorectal carcinoma was obviously higher than that in colorectal adenomas and adjacent normal mucosa （P＜0.01， P ＜0.05）. In colorectal carcinoma， the IGFBP-2 expression was irrelevant to age and sex （P＞0.05）； but relevant to degree of differentiation， infi ltration depth， lymph node metastasis and Duke’s stage （P＜0.05）. Conclusions： High expression of IGFBP-2 protein plays important role in development of colorectal carcinoma， which can be acted as predictive factors for judging development of colorectal carcinoma.

Colorectal carcinoma； Insulin like growth factor binding protein 2 （IGFBP-2）； Immunohistochemical stain

R735.5

A

1004-6879（2015）02-0097-03

2014-10-13）