趙紅波，王軍，邱建強(qiáng)，楊勰，覃文慶，邱冠周

?

細(xì)菌作用下斑銅礦表面物理化學(xué)性質(zhì)變化

趙紅波1, 2，王軍1, 2，邱建強(qiáng)1, 2，楊勰1，覃文慶1, 2，邱冠周1, 2

(1. 中南大學(xué) 資源加工與生物工程學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙，410083；2. 中南大學(xué) 生物冶金教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 長(zhǎng)沙，410083)

采用相同培養(yǎng)基培養(yǎng)的(，菌)和氧化亞鐵鉤端螺旋菌(，菌)浸出斑銅礦，通過(guò)接觸角和Zeta電位測(cè)定，分析其吸附之后斑銅礦表面物理化學(xué)性質(zhì)的變化，主要包括表面潤(rùn)濕性和表面電性的變化，并對(duì)比分析2種細(xì)菌對(duì)斑銅礦表面物理化學(xué)性質(zhì)改變的異同。研究結(jié)果表明：?jiǎn)为?dú)9K培養(yǎng)基對(duì)于斑銅礦表面潤(rùn)濕性無(wú)明顯影響，在2種細(xì)菌作用下，由于在浸出過(guò)程中斑銅礦表面親水銅硫化合物和硫酸鹽的產(chǎn)生導(dǎo)致斑銅礦表面接觸角持續(xù)減小；斑銅礦和細(xì)菌的Zeta電位隨溶液pH的升高而逐漸下降，斑銅礦Zeta電位和等電點(diǎn)分別朝細(xì)菌的Zeta電位和等電點(diǎn)方向偏移，表面細(xì)菌在斑銅礦表面發(fā)生了特性吸附；混合菌作用下斑銅礦Zeta電位和等電點(diǎn)正好介于2種細(xì)菌的動(dòng)電位和等電點(diǎn)之間，說(shuō)明2種細(xì)菌均能同時(shí)有效吸附于斑銅礦表面。

細(xì)菌；斑銅礦；表面物理化學(xué)性質(zhì)；Zeta電位；接觸角

微生物冶金因其具有流程短、設(shè)備簡(jiǎn)單和環(huán)境友好等技術(shù)優(yōu)勢(shì)，在濕法冶金領(lǐng)域已獲得廣泛關(guān)注[1?3]。吸附是微生物與礦物作用的第1步。由于細(xì)菌對(duì)硫化物的吸附及氧化是在礦物表面發(fā)生的，因此，礦物的表面性質(zhì)(包括表面元素分布、表面電性、缺陷、表面能和表面的不均勻性等)對(duì)細(xì)菌在礦物表面的吸附及氧化過(guò)程具有重要影響。Devasia等[4]認(rèn)為細(xì)菌在礦物表面的吸附不僅改變了細(xì)菌的生化性質(zhì)，同時(shí)也改變了浸礦體系中各種界面性質(zhì)。van Loosdrecht等[5]認(rèn)為細(xì)菌表面性質(zhì)中決定吸附的主要是表面疏水性和動(dòng)電位，暴露于礦物的細(xì)菌表面有NH3，NH2，NH，CONH，CO，CH3，CH2，CH和COOH等官能團(tuán)存在。Gehrke等[6]通過(guò)對(duì)浸礦細(xì)菌的胞外多聚物(EPS)分析后認(rèn)為，EPS在細(xì)菌解離金屬硫化礦物的第1步中起到重要作用，是細(xì)菌粘附在黃鐵礦和單質(zhì)硫等固態(tài)底物過(guò)程的先決條件。顧幗華等[7]通過(guò)對(duì)原子力顯微鏡表面進(jìn)行表征及搖瓶浸出實(shí)驗(yàn)，考察了不同能源(Fe2+、單質(zhì)硫和黃銅礦)培養(yǎng)的氧化亞鐵硫桿菌(，菌)對(duì)黃銅礦表面性質(zhì)的影響及其與黃銅礦浸出的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)馴化的菌在礦表面的附著能力更強(qiáng)，并顯著改變黃銅礦表面性質(zhì)，導(dǎo)致黃銅礦表面疏水性先增強(qiáng)再降低，黃銅礦Zeta電位朝細(xì)菌Zeta電位偏移。Liu等[8]考察了不同離子強(qiáng)度和pH條件下培養(yǎng)的氧化亞鐵硫桿菌(，菌)對(duì)黃鐵礦表面性質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌導(dǎo)致黃鐵礦等電點(diǎn)(IEP)朝細(xì)菌等電點(diǎn)(IEP)偏移，并提出了雙電層作用模型。硫化礦物的細(xì)菌浸出體系是一個(gè)礦物?細(xì)菌?溶液三相界面相互作用體系，該體系十分復(fù)雜，受許多因素如表面電荷、表面疏水性、表面聚合物的存在及構(gòu)型的影響，因而，對(duì)硫化礦物體細(xì)菌浸出體系中表面性質(zhì)的研究可以為解釋細(xì)菌復(fù)雜界面作用機(jī)理提供有效參數(shù)[9?10]。細(xì)菌在礦物表面的吸附可以極大地改變礦物表面性質(zhì)，而選礦過(guò)程(如浮選和絮凝)主要取決于礦物表面性質(zhì)，故通過(guò)生物處理實(shí)現(xiàn)對(duì)礦物之間的有效分離具有重要意義。許多研究者利用細(xì)菌選擇性地在黃鐵礦表面或煤表面富集，通過(guò)改變黃鐵礦的親水性或煤的疏水性，增大欲分離礦物間可浮性的差異，從而強(qiáng)化后續(xù)分選作業(yè)[11?12]。綜上所述，研究微生物對(duì)礦物表面物理化學(xué)性質(zhì)影響具有重要意義。目前，人們對(duì)此類問(wèn)題的研究主要集中于黃鐵礦、黃銅礦等礦物，而關(guān)于斑銅礦的研究鮮有報(bào)道。目前，在生物冶金領(lǐng)域，主要研究和應(yīng)用對(duì)象是硫氧化菌和鐵氧化菌，這2類細(xì)菌對(duì)硫化礦物具有不同的吸附和腐蝕機(jī)理，為此，本文作者選用2種重要的浸礦即細(xì)菌?嗜熱硫氧化硫桿菌(，菌)和氧化亞鐵鉤端螺旋菌(，菌)，分別考察其對(duì)斑銅礦表面性質(zhì)的影響，著重研究對(duì)比這2種細(xì)菌浸出前后斑銅礦表面接觸角和動(dòng)電位變化。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器

實(shí)驗(yàn)材料為：純斑銅礦，取自廣東梅州，經(jīng)過(guò)磨礦、干式篩分之后，取粒度小于0.074 mm的礦粒，再經(jīng)瑪瑙研磨至粒度小于5 μm，用于測(cè)定Zeta電位；結(jié)晶良好的塊狀斑銅礦，經(jīng)切割、打磨、拋光，用于接觸角測(cè)定；菌和菌，均取自中南大學(xué)生物冶金教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

實(shí)驗(yàn)儀器為：HZQ?C培養(yǎng)箱(哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)有限公司制造)，用于細(xì)菌的培養(yǎng)；Usk?Ⅱ型不銹鋼電熱蒸餾水器(上海三申醫(yī)療器械有限公司制造)，用于自制蒸餾水；YX280A型手提式不銹鋼蒸汽消毒器(上海三申醫(yī)療器械有限公司制造)，用于儀器滅菌；PHSJ?4A型pH計(jì)(上海精密儀器有限公司制造)，用于測(cè)試礦漿酸度；JJC?1型接觸角測(cè)定儀(長(zhǎng)春市第五光學(xué)儀器有限公司制造)，用于測(cè)量接觸角；TDL5?A?5型臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠制造)，用于離心細(xì)菌集合體；Coulter Dels44osx型 Zeta電位測(cè)定儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司制造)，用于測(cè)試動(dòng)電位。

1.2 研究方法

1.2.1 菌種培養(yǎng)

原始菌株用9K培養(yǎng)基培養(yǎng)，pH調(diào)節(jié)為2.0，9K培養(yǎng)基成分為：3.00 g/L (NH4)4SO4，0.10 g/L KCl，0.50 g/L K2HPO4，0.50 g/L MgSO4·7H2O，0.01 g/L Ca(NO3)2，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程均采用現(xiàn)制備的蒸餾水。培養(yǎng)菌時(shí)加入10.0 g/L硫粉作為能源物質(zhì)，培養(yǎng)菌時(shí)加入44.7 g/L FeSO4·7H2O作為能源物質(zhì)。培養(yǎng)基在滅菌鍋中滅菌20 min(壓力為0.1 MPa，溫度為 121 ℃)。細(xì)菌接種量均為5%(體積分?jǐn)?shù))，細(xì)菌培養(yǎng)均在搖床中進(jìn)行，轉(zhuǎn)速為170 r/min，溫度為48 ℃。

1.2.2 接觸角測(cè)定

測(cè)量礦物接觸角時(shí)，用微量進(jìn)樣器(2.0 mL)將蒸餾水在距待測(cè)固體表面約3.0 mm處垂直滴加在待測(cè)固體表面，形成座滴，快速測(cè)量，讀取9次接觸角值，計(jì)算平均值作為接觸角。

細(xì)菌接觸角的測(cè)定時(shí)，首先將已制成菌懸液的細(xì)菌溶液用微孔過(guò)濾膜(孔徑0.22 μm)過(guò)濾，形成一定的厚度，將附有細(xì)菌的生物膜在室溫條件下晾干，平鋪在蓋玻片上，按照上述方法測(cè)定細(xì)菌的接觸角。

1.2.3 Zeta電位的測(cè)定

將0.1 g斑銅礦粉分別加入到離子濃度為0.010 mol/L和0.001 mol/L的NaCl溶液中，調(diào)節(jié)pH，攪拌5 min后，放入洗凈的樣品槽，將樣品槽放入電位測(cè)定儀中，測(cè)定斑銅礦的Zeta電位；將0.1 g礦粉加入到細(xì)菌濃度為×108個(gè)/mL，pH為2.0的NaCl溶液中，攪拌60 min后，離心法分離出礦粒，控制礦漿質(zhì)量濃度為1 g/L，在離子強(qiáng)度=0.010 mol/L的NaCl溶液中測(cè)定細(xì)菌作用后礦物Zeta電位；同理，在離子強(qiáng)度為=0.010 mol/L的NaCl溶液中加入細(xì)菌(和)懸液，細(xì)菌濃度為2×108個(gè)/mL，調(diào)節(jié)pH，測(cè)定不同pH條件下細(xì)菌的Zeta電位。測(cè)試中用HCl和NaOH溶液調(diào)節(jié)pH，每個(gè)樣品測(cè)量3次，取平均值。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 接觸角的測(cè)定

斑銅礦的原始接觸角如表1所示。斑銅礦的接觸角達(dá)55°，說(shuō)明斑銅礦潤(rùn)濕性較小，主要由于斑銅礦的分子以共價(jià)鍵為主，偏向于非極性結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致斑銅礦的水溶性不是很好，在浸出過(guò)程中常需要 細(xì)磨[14]。

表1 斑銅礦的原始接觸角

菌和菌的接觸角分別如表2和表3所示。從表2和表3可見(jiàn)：菌和菌這2種浸礦細(xì)菌的接觸角都很小，表明它們潤(rùn)濕性較大，有很好的親水性。這主要是由于細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中，黏膜中分布了許多膜蛋白，其中含有多種極性基團(tuán)如羥基 (—OH)、羧基(—COOH)、巰基(—SH)、氨基(—NH2)等，這些極性基團(tuán)對(duì)極性水分子具有很強(qiáng)的親和性，有利于細(xì)菌與礦物的相互作用，降低體系自由能[15]。

表2 S. t菌的接觸角

表3 L. f菌的接觸角

許多研究者認(rèn)為，斑銅礦的微生物浸出過(guò)程主要包括以下化學(xué)反應(yīng)[13?17]：

Cu5FeS4+12Fe3+→ 5Cu2++13Fe2++4S0(1)

4Fe2++O2+4H+→4Fe3++2H2O (2)

2S0+3O2+2H2O →+4H+(3)

4Cu5FeS4+37O2+2OH?→20Cu2++4Fe3+++10H2O (4)

由于斑銅礦細(xì)菌浸出過(guò)程不僅包含了細(xì)菌的作用，還包含了培養(yǎng)基的影響，因此，在研究過(guò)程中必須了解培養(yǎng)基溶液在這個(gè)過(guò)程中的作用。斑銅礦分別浸泡于9K培養(yǎng)基、含菌和菌的9K培養(yǎng)基體系中，接觸角的變化如圖1所示。從圖1可見(jiàn)：在單獨(dú)9K培養(yǎng)基作用下，斑銅礦接觸角變化不明顯，因此，單獨(dú)的9K培養(yǎng)基對(duì)于斑銅礦表面潤(rùn)濕性無(wú)明顯影響。而含菌和菌的9K培養(yǎng)基中，斑銅礦表面接觸角持續(xù)減小，親水性增強(qiáng)。由此推斷主要是由于斑銅礦在菌和菌作用下，發(fā)生了上述(2)~(4)的反應(yīng)。由于斑銅礦表面親水性較強(qiáng)的銅硫化合物和硫酸鹽的產(chǎn)生，使礦物表面親水性增強(qiáng)。

1—9K培養(yǎng)基；2—9K培養(yǎng)基+菌；3—9K培養(yǎng)基+菌

圖1 不同浸出體系中斑銅礦表面接觸角的變化

Fig. 1 Variations of contact angle of bornite in different systems

隨著浸出過(guò)程的進(jìn)行，斑銅礦的接觸角變化很大，并且不斷接近所用細(xì)菌的接觸角，由此可推斷：可能是由于浸礦過(guò)程中不斷有細(xì)菌吸附在其表面，通過(guò)在礦物表面產(chǎn)生胞外聚合物(extracellular polymeric substances，EPS)，從而使斑銅礦表面潤(rùn)濕性不斷接近相應(yīng)浸礦微生物的潤(rùn)濕性[18?20]。

2.2 Zeta電位的測(cè)定

在不同離子強(qiáng)度為0.010 mol/L和0.001 mol/L的NaCl溶液中，測(cè)量不同pH下斑銅礦的Zeta電位，結(jié)果如圖2所示。從圖2可見(jiàn)：斑銅礦的Zeta電位隨溶液pH的升高而逐漸下降；當(dāng)離子強(qiáng)度=0.010 mol/L 時(shí)，斑銅礦的Zeta電位較離子強(qiáng)度=0.001 mol/L 時(shí)黃銅礦的Zeta電位明顯負(fù)移。根據(jù)–切普曼–斯特恩(GCS)雙電層模型[21?22]，在離子強(qiáng)度較低時(shí)，可以等同于動(dòng)電位，分散層可以等效為平行板電容，則斯特恩電位(即Zeta電位)的表達(dá)式可簡(jiǎn)化為：(其中，為電解質(zhì)濃度，為表面電荷密度，為法拉第常數(shù)，為介電常數(shù)，為氣體摩爾常數(shù)，為熱力學(xué)溫度)。由此式可知：隨著電解質(zhì)濃度增大，溶液離子強(qiáng)度增大，Zeta電位因雙電層被壓縮而變小。

/(mol?L?1): 1—0.010; 2—0.001

圖2 不同離子強(qiáng)度的氯化鈉條件下斑銅礦Zeta電位

Fig. 2 Zeta potential of bornite in sodium chloride solution with different ionic strengths

當(dāng)離子強(qiáng)度為=0.001 mol/L時(shí)，菌和菌的Zeta電位與pH的關(guān)系如圖3所示。從圖3可知：菌的等電點(diǎn)大約為pH=3.2，而菌的等電點(diǎn)大約是pH=6.1。2種菌的動(dòng)電位都是隨pH的增大呈下降趨勢(shì)。其主要原因是：隨著體系中pH的上升，體系中OH?濃度增大，吸附到細(xì)菌表面后使細(xì)菌的負(fù)電性增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)菌的Zeta電位向負(fù)方向移動(dòng)。菌的動(dòng)電位隨pH變化更顯著，其等電點(diǎn)值更大。

1—菌; 2—菌

圖3=0.001 mol/L時(shí)，不同pH下2種菌的Zeta電位

Fig. 3 Zeta potential of two bacteria at different pH when=0.001 mol/L

細(xì)菌與斑銅礦作用后，斑銅礦Zeta電位變化如圖4所示。從圖4可知：斑銅礦與細(xì)菌相互作用后的動(dòng)電位都是隨pH的增大呈減小趨勢(shì)，菌作用下斑銅礦動(dòng)電位比菌作用下高，且等電點(diǎn)也更高。細(xì)菌的吸附使斑銅礦的等電點(diǎn)朝細(xì)菌的等電點(diǎn)方向偏移，這表明在礦物表面發(fā)生了細(xì)菌的特性吸附，改變了原來(lái)斑銅礦的雙電層結(jié)構(gòu)。混合菌作用下動(dòng)電位和等電點(diǎn)正好介于2個(gè)細(xì)菌的動(dòng)電位和等電點(diǎn)之間，說(shuō)明2種細(xì)菌均能同時(shí)有效吸附于斑銅礦表面。不同細(xì)菌作用后斑銅礦展現(xiàn)出不同的電動(dòng)行為，表明不同的細(xì)菌對(duì)斑銅礦表面性質(zhì)的改變能力不同，吸附能力也不同。

1—菌+斑銅礦；2—菌+斑銅礦；3—混合菌+斑銅礦

圖4=0.001 mol/L時(shí)，不同細(xì)菌作用后斑銅礦Zeta電位

Fig. 4 Zeta potential of bornite after treated by different bacteria when=0.001 mol/L

3 結(jié)論

1) 斑銅礦的接觸角較大，親水性較弱，2種浸礦細(xì)菌(和菌)的接觸角均很小，親水性較強(qiáng)。

2) 在菌和菌作用下，斑銅礦表面接觸角持續(xù)減小，推測(cè)主要由于斑銅礦表面親水性較強(qiáng)的銅硫化合物和硫酸鹽的產(chǎn)生，使礦物表面親水性增強(qiáng)。

3) 細(xì)菌的吸附使斑銅礦的Zeta電位和等電點(diǎn)分別朝細(xì)菌的Zeta電位和等電點(diǎn)方向偏移，這表明在礦物表面發(fā)生了細(xì)菌的特性吸附；混合菌作用下斑銅礦動(dòng)電位和等電點(diǎn)正好介于2個(gè)細(xì)菌的動(dòng)電位和等電點(diǎn)之間，說(shuō)明2種細(xì)菌均能同時(shí)有效吸附于斑銅礦表面。

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Surface physicochemical properties of bornite in presence of bacteria

ZHAO Hongbo, WANG Jun1, 2, QIU Jianqiang1, 2, YANG Xie1, QIN Wenqing1, 2, QIU Guanzhou1, 2

(1. School of Minerals Processing and Bioengineering, Central South University, Changsha 410083, China;2. Key Laboratory of Biometallurgy, Ministry of Education, Central South University, Changsha 410083, China)

andcultured in the same 9K medium were used for the bioleaching of bornite. The variation of surface physicochemical properties mainly of surface wettability and surface electrical property were investigated by contact angle measurement and Zeta potential measurement. The results show that single 9K medium has no significant effect on the surface wettability of bornite, while the contact angles of bornite continue to decrease in the presence of bacteria, which can be attributed to the formation of intermediates of hydrophilic Cu-Fe-S compounds and sulphates. The Zeta potential of bornite and bacteria decreases with the increase of solution pH, the Zeta potential and isoelectric point of bornite shift toward the Zeta potential and isoelectric point of bacteria, indicating that bacteria can effectively adsorb on bornite surface. The Zeta potential and isoelectric point of bornite in the presence of mixed bacteria are between those ofand, revealing that the two bacteria can effectively adsorb on bornite at the same time.

bacteria; bornite; surface physicochemical properties; Zeta potential; contact angle

TD982

A

1672?7207(2015)01?0001?05

2014?01?20；

2014?03?25

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(51374248)；教育部博士點(diǎn)新教師基金資助項(xiàng)目(20120162120010)；教育部新世紀(jì)人才計(jì)劃項(xiàng)目(NCET-13-0595)；博士后特別資助基金資助項(xiàng)目(2014T70692) (Project(51374248) supported by the National Natural Science Foundation of China; Project(20120162120010) supported by the Doctoral Discipline Foundation for Young Teachers in the Higher Education Institutions of Ministry of Education; Project(NCET-13-0595) supported by Program for New Century Excellent Talents in University; Project(2014T70692) supported by China Postdoctoral Science Foundation)

王軍，博士，副教授，從事礦物加工研究；E-mail: wjwq2000@126.com

10.11817/j.issn.1672?7207.2015.01.001

(編輯 陳燦華)