朱秀高（武漢回盛生物科技有限公司，湖北武漢430042）

回盛“豬醫(yī)生”專欄

針對PEDV的運(yùn)輸車輛消毒方法效果比較

朱秀高
（武漢回盛生物科技有限公司，湖北武漢430042）

摘要：豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PDEV）引起的，其在豬群內(nèi)部和豬群之間的傳播往往由運(yùn)輸車輛的污染引起，本文用4個(gè)試驗(yàn)分別評估了時(shí)間和溫度、消毒劑Staloan F粉、Accel消毒劑、清洗+消毒+熱輔助干燥和凈化（TADD）對被PDEV污染的運(yùn)輸車輛的消毒效果，發(fā)現(xiàn)對運(yùn)輸車輛加熱至71℃持續(xù)10分鐘或于20℃（室溫）至少7天均可有效地殺滅PEDV；Stalosan F消毒粉不能有效地殺滅PDEV；Accel消毒劑在不同病毒含量下均可有效地殺滅PEDV；清洗+消毒+TADD也可有效地殺滅PDEV。

關(guān)鍵詞：豬流行性腹瀉病毒；運(yùn)輸車輛；消毒

1971年，豬流行性腹瀉（PED）在英格蘭的育肥豬群中被首次發(fā)現(xiàn)，豬流行性腹瀉病毒（PEDV）的病原在1978年被分離確認(rèn)。從20世紀(jì)70年代到80年代，該病毒在歐洲其他地區(qū)快速傳播，造成了豬只嚴(yán)重的腹瀉與養(yǎng)豬業(yè)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前PEDV是歐洲的一種地方性病原，但并未引起大范圍的發(fā)病。亞洲一些地區(qū)在1982年首次發(fā)現(xiàn)該病后，就一直沒有停止。2013年5月，美國首次在豬群中發(fā)現(xiàn)了PEDV，病毒導(dǎo)致母豬和仔豬出現(xiàn)了嚴(yán)重的腹瀉，并造成美國全境感染仔豬近乎100%的死亡?；蚍治鲲@示引起美國豬群發(fā)病的病毒與中國分離株的同源性接近99%，但目前還不能確定病毒是如何進(jìn)入美國的。

盡管病毒進(jìn)入美國的途徑還不明確，但目前已經(jīng)知道受PEDV污染的運(yùn)輸車輛往往是PED在豬群內(nèi)部和豬群之間傳播的源頭，具有極大的傳播風(fēng)險(xiǎn)，這與對其他病毒如高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）和豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）傳播途徑的認(rèn)識是一致的。過去，運(yùn)輸工具這一潛在傳播風(fēng)險(xiǎn)的消除需要通過一系列措施，包括清洗、消毒以及熱輔助干燥和凈化（TADD）等。根據(jù)對TGEV的控制效果，這些措施應(yīng)該對與其結(jié)構(gòu)相似的PEDV具有非常好的消毒效果，可以用于被PEDV污染車輛的消毒。

1　試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2013—2014年，共進(jìn)行了4次不同的試驗(yàn)，以分別評價(jià)不同的車輛消毒方法。試驗(yàn)一主要測定了殺滅糞便中PEDV所需要的時(shí)間和溫度；試驗(yàn)二對消毒劑Staloan F粉（施立安）殺滅糞便中PEDV的效果進(jìn)行了評估；試驗(yàn)三測定了Accel消毒劑殺滅糞便中PEDV的效果（為測定沒有進(jìn)行車輛清潔時(shí)消毒劑的消毒效果，在進(jìn)行試驗(yàn)一和試驗(yàn)三時(shí)沒有清除設(shè)備上的糞便）；試驗(yàn)四評估了多種車輛消毒方法，其中包括清洗、消毒和TADD。

1.1試驗(yàn)一

本試驗(yàn)設(shè)計(jì)了8對不同時(shí)間和溫度的處理組合。將5 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機(jī)散布在面積為15.24 cm×15.24 cm×2.54 cm的鋁盤底面（類似于運(yùn)輸車輛的底盤）。然后按照表1的設(shè)計(jì)進(jìn)行處理，處理后將糞便用10 mL生理鹽水稀釋并重新收集，再灌胃感染4周齡大小的PEDV陰性仔豬，灌服后觀察仔豬有無出現(xiàn)腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3～7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態(tài)，每個(gè)處理組內(nèi)含4個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1　試驗(yàn)一各組的處理方式及效果

1.2試驗(yàn)二

本試驗(yàn)中設(shè)置了三個(gè)不同的處理組：Stalosan F消毒粉（施立安）組、陽性對照組和陰性對照組。將5 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機(jī)散布在面積為15.24 cm×15.24 cm ×2.54 cm鋁盤底面（類似于運(yùn)輸車輛的底盤）。處理過程中，陰性對照組和陽性對照組用密閉的罩子覆蓋，以防止與Stalosan F消毒粉接觸。把撒布樣品后的鋁盤放在商業(yè)運(yùn)豬車的底面和兩側(cè)，將Stalosan F消毒粉用電動噴粉器按81 g/㎡的標(biāo)準(zhǔn)噴灑在整個(gè)車廂內(nèi)，1小時(shí)后將鋁盤從車廂內(nèi)取出置于20℃（室溫），然后用10 mL緩沖液沖洗稀釋糞便并收集，其中4 mL做他用，剩下約6～8 mL灌服給4周齡大小的PEDV陰性仔豬，每頭豬對應(yīng)一個(gè)鋁盤。灌服后觀察仔豬有無出現(xiàn)腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3～7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態(tài)，每個(gè)處理組內(nèi)含8個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2　試驗(yàn)二各組的處理方式及結(jié)果

1.3試驗(yàn)三

本試驗(yàn)根據(jù)糞便污染程度（輕Vs重）和消毒劑濃度（1∶16 vs 1∶32）不同設(shè)置了6個(gè)處理組。將5 mL或10 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機(jī)散布在面積為15.24 cm× 15.24 cm×2.54 cm鋁盤底面（類似于運(yùn)輸車輛的底盤）。然后按表3的設(shè)計(jì)對各處理組用Accel消毒劑進(jìn)行處理，再用10 mL緩沖液稀釋并回收糞便，給4周齡大小的PEDV陰性仔豬灌服。灌服后觀察仔豬有無出現(xiàn)腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3—7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態(tài)，每個(gè)處理組內(nèi)含4個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)果見表3。

1.4試驗(yàn)四

本試驗(yàn)中設(shè)置了9個(gè)不同的處理組。每個(gè)處理組中均用10 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機(jī)散布在面積為15.24 cm×15.24 cm× 2.54 cm鋁盤底面（類似于運(yùn)輸車輛的底盤）。然后將鋁盤按不同組合的TADD程序進(jìn)行處理。再用10 mL緩沖液稀釋并回收糞便，給4周齡大小的PEDV陰性仔豬灌服。灌服后觀察仔豬有無出現(xiàn)腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3～7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態(tài)，每個(gè)處理組內(nèi)含4個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)果見表4。

表3　試驗(yàn)三各組的處理方式及結(jié)果

表4　試驗(yàn)4內(nèi)各組的處理方式及結(jié)果

1.5試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)一中，71C-10M和20C-7D組均能100%殺滅PEDV病毒，與陽性對照組相比差異顯著；試驗(yàn)二中，Stalosan F處理組與陽性對照組相比沒有顯著性差異；試驗(yàn)三和試驗(yàn)四中，所有處理組均能100%殺滅PEDV，與陽性對照組相比差異顯著。

2　討論

根據(jù)上述結(jié)果，對運(yùn)輸車輛加熱至71℃持續(xù)10分鐘或于20℃（室溫）至少7天均可有效殺滅PEDV。

此外，消毒劑Accel在不同病毒含量下均可有效殺滅PEDV；而Stalosan F消毒粉不能完全殺死糞便中的PEDV。這提示我們針對不同的環(huán)境條件，需要選擇合適的消毒劑。消毒劑的廣譜性不僅體現(xiàn)在它們的抗菌譜廣，更為重要的是它們的理化特性復(fù)雜，這些特性包括液體、粉劑和不同的泡沫質(zhì)量等。對消毒劑來說抗菌譜活性非常重要，但這些理化特性更重要，因?yàn)檫@些特性能夠影響它們的應(yīng)用范圍和在不同條件下的消毒效果。試驗(yàn)四的結(jié)果顯示出一個(gè)完整的車輛消毒措施的重要性，它包括沖洗、消毒和最后的烘干（干燥），在這一試驗(yàn)中，所有處理組均能有效殺滅PEDV。此外，值得注意的是，一般來說，溫度在車輛進(jìn)行沖洗和消毒后對殺滅病毒非常重要，而在試驗(yàn)一中，溫度的作用并不十分明顯。

中圖分類號：S851.34+7.6

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4645(2015)03-0073-03

收稿時(shí)間：2015-03-09