敖道夫 巴達(dá)拉胡

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

蒙藥材花錨蒙古名為西依熱地格達(dá)、庫日迪克、都莫迪克、達(dá)格木-札德朱爾、章古圖-地格達(dá)。為龍膽科植物花錨(Halenia sibirica Borkh.)的干燥全草。氣微，味甘、苦，性平、柔、膩。平息“協(xié)日”，清熱，愈傷。用于目黃，口苦，高燒，頭痛，尿黃，“協(xié)日”熱，傷熱，脈熱［1］。是蒙醫(yī)常用藥材，也是傳統(tǒng)方劑旺拉嘎-3 湯的主要組成成分。在我國除華南和華東地區(qū)外，廣布在其他地區(qū)以及蒙古、西伯利亞、遠(yuǎn)東、歐洲等國家，生長于山溝、林緣、林下、水邊濕草地［3］。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，目前已從花錨中分離得到了口山酮、口山酮苷、黃酮、黃酮苷、裂環(huán)烯醚萜、三萜類和生物堿等類型成分［4］?，F(xiàn)將對蒙藥材花錨中總黃酮類成分提取工藝進(jìn)行研究，以期為該民族藥資源的開發(fā)研究及臨床應(yīng)用提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器：ZDHW 型調(diào)溫電熱套(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)，752 -紫外分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)HH-W600 數(shù)顯三用恒溫水箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)TG328B 電光天平(福州天平儀器廠)。

1.2 材料：蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(由中國藥品生物制品鑒定所提供)，花錨藥材采自五岔溝林業(yè)局浩森溝林場;其他試劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 提取工藝條件的正交安排：對影響花錨提取物收率的溶劑量、提取時間、乙醇濃度、提取次數(shù)4 個因素，分別取3 個水平進(jìn)行考察。因素水平見表1。

表1 因素水平

2.2 考察指標(biāo)的確定和測定

2.2.1 考察指標(biāo)的確定：黃酮為花錨的主要有效成分，易溶于乙醇，故采用乙醇回流法提取花錨，并將蘆丁作為考察指標(biāo)，同時結(jié)合提取率優(yōu)選最佳工藝。

2.2.2 浸膏得率的測定：按L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)，取花錨約5.0g 在平行操作條件下加熱回流、提取、過濾，濾液水浴濃縮、蒸干，稱其質(zhì)量。按浸膏得率(%)= 浸膏質(zhì)量/樣品質(zhì)量100%［4］計(jì)算.其見表2。

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果

2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱取蘆標(biāo)準(zhǔn)20mg，放入100mL 容量瓶中，加無水乙醇90mL，在水浴鍋上加熱溶解，冷卻后，再用無水乙醇定容(0.2mg/mL)，備用。然后精密吸取蘆丁對照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0 、5.0、6.0mL 分別置25mL 容量瓶中，分別加水至6.0mL ，加5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的硝酸鋁溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的氫氧化鈉溶液10mL，再加水至刻度，搖勻，放置15min，依據(jù)分光光度法在500nm 波長處測定其吸收度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出回歸方程。結(jié)果得到花錨濃度Y 與吸光度X 關(guān)系曲線的回歸方程為Y =0.608X-0.0023，相關(guān)系數(shù)r =0.9998，所以本實(shí)驗(yàn)花錨濃度與吸光度有良好的相關(guān)性。

2.2.4 樣品含量測定：精密稱取正交實(shí)驗(yàn)號花錨各約5.0g，加熱回流、提取、過濾、濾液水浴濃縮、蒸干，殘?jiān)脽o水乙醇定溶至5mL，作為供試品溶液。然后精密吸取上述提取液各1mL，分別加水至6.0mL ，加5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的硝酸鋁溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的氫氧化鈉溶液10mL，再加水至刻度，搖勻，放置15min，依據(jù)分光光度法在500nm 波長處測定其吸收度，計(jì)算黃酮含量，見表2。

2.3 方差分析：將正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，分析結(jié)果見表3。

表3 方差分析表

綜合2 個考察指標(biāo)工藝條件，確定花錨最佳提取工藝條件為A2B2C3D1.

3 結(jié) 果

通過以上的L9(34)正交實(shí)驗(yàn)，最終確定提取花錨中黃酮類成分的最佳工藝條件為A2B2C3D1。即70%乙醇，12倍量，提取3 次，提取時間0.5h。

本研究建立的分光光度法用于測定黃酮類含量，方法簡便，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，最佳條件適合批量生產(chǎn)該藥材的提取。

［1］中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn) 蒙藥分冊［M］.1998：45.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［3］邰巴達(dá)拉胡，拉喜那木吉拉，桂榮，等.蒙藥材花錨的化學(xué)成分研究進(jìn)展［J］.中成藥，2015，5(37).

［4］包保全，孫啟時，包巴根那，等.花錨屬植物化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展［J］.中藥材，2003，5(26).