王威威
【摘要】本文對糖及其一些代謝物的測定進(jìn)行論述。
【關(guān)鍵詞】糖;代謝物;測定
【中圖分類號】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1671-8801(2015)03-0270-01
一、空腹葡萄糖檢測
臨床上所稱的血糖專指血液中的葡萄糖而言。每個個體全天血糖含量隨進(jìn)食、活動等情況會有被動。一般在空腹時的血糖水平較為恒定。臨床檢測時采用葡萄糖氧化酶的方法可以特異地測出真實的血糖濃度。
(一)方法和原理
1.葡萄糖氧化酶法 葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫:
葡萄糖+2H20→葡萄糖酸+2H20
在色原性氧受體的存在下,過氧化物酶催化過氧化氫氧化色素原,生成有色化合物。
2.已糖激酶法 在已糖激酶催化下,葡萄糖和三磷腺苷發(fā)生磷酸化反應(yīng),生成葡萄糖-6-磷酸與二磷酸腺苷。前者在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶催化下脫氫,生成6-磷酸葡萄糖酸,同時使氧化型輔酶還原成還原型輔酶。
3.鄰中苯胺法 葡萄糖與鄰甲苯胺在強酸溶液中加熱,葡萄糖的醛基與鄰甲苯胺縮合成葡萄糖基胺,后者脫水生成席夫堿,再經(jīng)結(jié)構(gòu)重排,生成有色化合物,吸收峰630nm。
(二)參考值
葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法(HK)、鄰甲苯胺法:3.9—6.4mmol/L。
(三)臨床意義
血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和激素的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定。當(dāng)這些調(diào)節(jié)失去原有的相對平衡時,則出現(xiàn)高血糖或低血糖。
1.生理性高血糖 見于飯后1—2小時;攝入高糖食物;也可由運動、情緒緊張等因素引起。
2.病理性南血糖
(1)糖尿病是造成高血糖最常見的原因之一;(2)顱內(nèi)壓力宿,如顱內(nèi)出血、顱外傷等;(3)由于脫水引起的高血糖,如嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度升高。
3.生理性低血糖 如饑餓或劇烈運動。
4.病理性低血糖
(1)胰島β細(xì)胞增生或癌瘤等,使贖島素分泌過多。(2)對抗胰島素的激素分泌不足,如垂體前葉機能減退、腎上腺皮質(zhì)機能減遲等(3)嚴(yán)重肝病患者,肝臟不能有效地調(diào)節(jié)血糖。
二、口服葡萄糖耐量試驗
(一)方法和原理
葡萄糖耐量試驗是檢查人體血糖調(diào)節(jié)機能的一種方法。正常人在服用一定量葡萄糖后,血糖濃度暫時升高(一般不超過8.88mmol/L或160mg/d1),但在2小時內(nèi)又恢復(fù)到空腹水平,稱為耐糖現(xiàn)象。在服用一定量葡萄糖后,間隔一定時間測定血糖和尿糖,觀察血糖水平及有無尿船出現(xiàn),稱為糖耐量試驗。若因內(nèi)分泌失調(diào)等因素引起糖代謝失常時,食入大量糖后,血糖濃度可急劇升高或升高極不明顯,短時間內(nèi)不能恢復(fù)原值者即稱為耐糖現(xiàn)象失常。臨床上常對癥狀不明顯的患者采用糖耐量試驗來診斷有無糖代謝異常。
(二)實驗步驟
(1)檢測前3天患者可正常飲食(每天進(jìn)食糖類不得不少于150g,且維持正?;顒?,停用胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素等藥物治療,不抽煙,不喝咖啡和茶,試驗前一天晚餐后即不再進(jìn)食。
(2)次晨空腹抽靜脈血2mI,抗凝或否,并同時收集尿液標(biāo)本,測定血液與尿液中的葡萄糖含量。
(3)將75g葡萄糖溶于250ml溫開水中,令受檢者5分鐘內(nèi)服下,服后每隔60分鐘各取血1次,共4次,每隔lh留尿液,測定血糖及尿糖。若疑為反應(yīng)性低血糖病例,可適當(dāng)延長標(biāo)本收集時間。
(4)將各次測得的血糖和尿糖數(shù)值,以數(shù)字或曲線報告。
(四)臨床意義
1.糖尿病 空腹的血糖常超過正常值,服糠后血糖更高.而且維持高血糖時間較長,尿中可檢測到尿糖。 、
2.肝病患者 服糖后半小時或一個半小時之間血糖急劇升高,一個半小時到三小時之間血糖迅速下降至正?;虻陀诳崭寡恰Q巧邥r可以現(xiàn)尿糖。
3.腎病患者 糖耐量曲線正常,服糖后尿內(nèi)可出現(xiàn)尿糖。
4.某些內(nèi)分泌疾病 如垂體前葉機能亢進(jìn),腎上腺皮質(zhì)、腎上腺髓質(zhì)腫瘤低于正常人,進(jìn)食大量糠后,血糖升高不明顯,糖耐量減低。
三、糖化血紅蛋白檢測
糖化血紅蛋白是血紅蛋白與領(lǐng)萄糖經(jīng)非酶促反應(yīng)結(jié)合而成的,其含量的多少取決于血糖濃度以及血糖與血紅蛋白接觸時間的長短。
(一)方法和原理
糖化血紅蛋白檢測方法很多,常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。
離子交換層析,分手工和儀器兩種。手工微柱有Bio—BaD和西班牙BIOSYSYEMS
等多家公司產(chǎn)品,手工微柱操作受到人工因素影響,可能會洗脫不完全或過度洗脫,并受外界環(huán)境溫度的影響,而某些紅蛋白如HbF異常增加時,也會與糖化血紅蛋白同時洗脫而使結(jié)果產(chǎn)生偏差。采用微柱法離子交換層析和梯度洗脫技術(shù)可全自動分離血紅蛋白的變異體與亞型,除可測定糖化血紅蛋白外,還可同時檢測出HbS與HbC的存在與否,在計算糖化血紅蛋白值時會自動扣除變異體產(chǎn)生的影響,從而使結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠,CV值小于2%。
親和層法是目前糖化血紅蛋白檢測的新方法,該方法特異性強,不受異常血紅蛋白的干擾。DS1糖化血紅蛋白分析儀已經(jīng)獲得美國儀器藥品管理署(FDA)的認(rèn)可獲準(zhǔn)上市,作為目前世界唯一的快速床邊糖化血紅蛋白儀,它采用硼酸親和層析法,只需10?1全血即可在4分鐘內(nèi)快速分離檢測糖果化血紅蛋白,為臨床提供即時的化驗結(jié)果,從而使醫(yī)生在患者就診的第一時間明確診斷并制定相應(yīng)的治療方案,特別適合于臨床科室使用,尤其對小兒患者而言更有優(yōu)勢。其檢測結(jié)果也完全達(dá)到并超過臨床要求,CV值5%以內(nèi)。
離子捕獲法亦是新近發(fā)展起來的新方法,其原現(xiàn)是糖化血紅蛋白與相應(yīng)抗體結(jié)合后,聯(lián)以熒光標(biāo)記物,而在IMX反應(yīng)孔中的玻璃纖維預(yù)先包被了高分子的四膠合物,使纖維表面帶正電,使前述的反應(yīng)復(fù)合物吸附在纖維表面,經(jīng)過一系列的清洗后測定其熒光強度,從而得到糖化血紅蛋白的濃度,該方法適用于成批糖化血紅蛋白標(biāo)本的檢測。
電泳方法如毛細(xì)管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質(zhì)的變異體,但目前尚無商品化、具有批量樣本通過能力的儀器面世,相當(dāng)程度地限制了該方法的臨床應(yīng)用。
綜上所述,糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一項良好的指標(biāo),糖尿病患者應(yīng)定期檢測糖化血紅蛋白,并據(jù)此制定,修正相關(guān)治療方案。
(二)臨床意義
CHb升高主要見于糖尿病及其他高血糖患者的血液中,由于糖化過程比較緩慢、一
旦形成后不再解離、并持續(xù)于紅細(xì)胞生命周期中,故測定糖化血紅蛋白所占的百分比率能反映測定前1—2月內(nèi)的血糖水平。對血糖和尿糖波動較大的糖尿病患者;進(jìn)行CHb測定不但可用于診斷,。而且是監(jiān)測病情的良好指標(biāo)。
參考文獻(xiàn):
[1]唐躍年 張菀陵. 阿糖胞苷及其代謝物在血液中的HPLC測定方法[J]. 中國藥學(xué)雜志, 1994(06).
[2]安富榮,費艷秋,袁靜,祝德秋,孫黎,王平全,曹惠明;HPLC法測定白血病患者血漿中阿糖胞苷及其代謝物濃度[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;2001年03期