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中藥黃芪抗病毒作用

2015-06-09 19:50周麗紅周麗周莉微
科學(xué)中國(guó)人 2015年14期
關(guān)鍵詞:生物制品效價(jià)培養(yǎng)液

周麗紅,周麗,周莉微

長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司

中藥黃芪抗病毒作用

周麗紅,周麗,周莉微

長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司

中藥黃芪能抑制水泡性口炎病毒(VSV)和單純皰疹I(lǐng)型病毒(HSV-1)。實(shí)驗(yàn)證明不同濃度的黃芪對(duì)不同的病毒作用結(jié)果不同,VSV病毒的抑制效價(jià)高于HSV-1病毒的抑制效價(jià),黃芪的濃度越高,對(duì)病毒的抑制效果越好。

中藥黃芪;病毒(VSV,HSV-1);w ish細(xì)胞;微量細(xì)胞病變法

黃芪可使冠狀血管,腎臟血管擴(kuò)張,有強(qiáng)心利尿和降血壓作用,能改善皮膚血液循環(huán)及營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),使死細(xì)胞恢復(fù)活力,可用于治療慢性潰瘍,有興奮中樞神經(jīng)作用,能保護(hù)肝臟,防止肝糖原減少,對(duì)消除尿蛋白有一定療效。對(duì)葡萄球菌,肺炎雙球菌,溶血性鏈球菌志賀氏痢疾桿菌,炭疽桿菌,白喉?xiàng)U菌等有抗菌作用。本文是研究黃芪對(duì)病毒的抑制作用。

1 材料

黃芪提取液(長(zhǎng)春中藥廠提供);水皰性口炎病毒(VSV)(北京病毒所提供);單純皰疹I(lǐng)型病毒(HSV-1)(北京病毒所提供);人羊膜細(xì)胞(WISH細(xì)胞)(長(zhǎng)春生物制品所細(xì)胞因子室提供);MEM完全培養(yǎng)液(10%牛血清)(長(zhǎng)春生物制品所細(xì)胞因子室提供);MEM攻毒培養(yǎng)液(3%牛血清)(長(zhǎng)春生物制品所細(xì)胞因子室提供);PBS(長(zhǎng)春生物制品所細(xì)胞因子室提供);消化液(長(zhǎng)春生物制品所細(xì)胞因子室提供)

2 試驗(yàn)方法(微量細(xì)胞病變發(fā))

2.1 將黃芪液用M E M攻毒培養(yǎng)液分別稀釋為100%80% 40%20%四個(gè)濃度的樣品,做倍比稀釋?zhuān)瑐溆谩?/p>

2.2 細(xì)胞制備

將wish細(xì)胞用完全培養(yǎng)液配制成濃度為每1 m l含2.5 X 105-3.5 X 105個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種于9 6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔加100ul,于37℃5%二氧化碳條件下培養(yǎng)2 4小時(shí)形成單層細(xì)胞。

2.3 攻毒

48小時(shí),把所有液體倒掉,除細(xì)胞對(duì)照組每孔加100ul攻毒液,其他各孔加100ul病毒(100CCID50),放35℃5%二氧化碳培養(yǎng)箱,待病毒對(duì)照組病變?yōu)?++-++++時(shí),細(xì)胞對(duì)照組為陰性,判定其結(jié)果,計(jì)算效價(jià)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果(2次試驗(yàn)的平均值)

從表一可見(jiàn),黃芪的濃度越高抑制病毒(VSV)效價(jià)越高,濃度為100%的黃芪對(duì)VSV病毒試驗(yàn)的平均效價(jià)為64 IU∕m l,濃度為80%的黃芪對(duì)VSV病毒試驗(yàn)的平均效價(jià)為44IU∕ml,濃度40%的黃芪對(duì)VSV病毒試驗(yàn)的平均效價(jià)為36IU∕m l,濃度為20%的黃芪對(duì)VSV病毒試驗(yàn)的平均效價(jià)為16IU∕ml,濃度越高抑制效價(jià)越高,2次實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本無(wú)區(qū)別,試驗(yàn)重復(fù)性很好,結(jié)果可靠。

從表二可見(jiàn),濃度為100%的黃芪對(duì)(HSV-1)病毒的抑制效價(jià)為36 IU∕m l,濃度為80%的黃芪對(duì)病毒的抑制效價(jià)為30IU∕m l,濃度40%的黃芪對(duì)(HSV-1)病毒試驗(yàn)的平均效價(jià)為16IU∕ml,濃度為20%的黃芪對(duì)(HSV-1)病毒試驗(yàn)的平均效價(jià)為6IU∕ml,結(jié)果明顯。實(shí)驗(yàn)證明黃芪對(duì)HSV-1型病毒抑制作用明顯,說(shuō)明黃芪對(duì)病毒有抑制作用。

4 討論

綜上所訴,黃芪有明顯的抗病毒(VSV,HSV-1)作用。實(shí)驗(yàn)證明不同濃度的黃芪對(duì)不同的病毒結(jié)果不同,VSV病毒的抑制效價(jià)高于HSV-1病毒的抑制效價(jià),可能和病毒的毒力有關(guān),黃芪的濃度越高,對(duì)病毒的抑制效果越好。本實(shí)驗(yàn)證明中藥黃芪對(duì)V S V病毒及HSV-1病毒具有抑制作用,試驗(yàn)為預(yù)防和治療疾病提供依據(jù)。

表二不同濃度黃芪對(duì)H S V-1病毒的抑制作用

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