王芳，周長(zhǎng)文，郭曉慧

(菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校，山東菏澤274000)

魯西南地區(qū)早期自然流產(chǎn)患者遺傳因素的分析

王芳，周長(zhǎng)文，郭曉慧

(菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校，山東菏澤274000)

目的探討染色體核型異常與反復(fù)自然流產(chǎn)病癥的關(guān)系。方法采集患者肘靜脈血液，常規(guī)外周血細(xì)胞培養(yǎng)和染色體G顯帶標(biāo)本制備,對(duì)58對(duì)反復(fù)自然流產(chǎn)的夫婦進(jìn)行了染色體核型分析并遺傳學(xué)診斷。結(jié)果共檢出染色體異常7例，占11.6%。其中易位2例，羅伯遜易位1例，倒位2例，重復(fù)1位，染色質(zhì)多態(tài)性1例。結(jié)論多數(shù)染色體異常的患者并非完全不可以產(chǎn)生正常的配子，結(jié)合產(chǎn)前診斷可以生產(chǎn)出健康的后代，從而達(dá)到優(yōu)生優(yōu)育，提高人口質(zhì)量。對(duì)于正常配子比例低的患者，建議采用優(yōu)生學(xué)技術(shù)輔助生育。

自然流產(chǎn)；染色體；核型分析；遺傳咨詢

隨著魯西南地區(qū)工業(yè)化的跟進(jìn)，大量的制藥廠和化工廠落地。帶來(lái)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的同時(shí)，不良企業(yè)廢氣、廢水的隨便排放，加重了環(huán)境污染。使用受到污染的制藥廠和化工廠附近的水源灌溉后，造成農(nóng)作物的非正常死亡。農(nóng)民飼養(yǎng)的豬，受廢氣廢水的影響，出現(xiàn)非正常流產(chǎn)。長(zhǎng)此以往，人類的遺傳物質(zhì)勢(shì)必受到影響而發(fā)生高于自然頻率的基因突變及染色體畸形，使遺傳病的群體發(fā)生率大大提高。從而降低人口素質(zhì)，對(duì)家庭社會(huì)帶來(lái)不必要的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)。因此，對(duì)非外傷引起的反復(fù)流產(chǎn)患者進(jìn)行染色體檢查非常有必要。為此，我們對(duì)2012年12月—2014年3月來(lái)診的58對(duì)反復(fù)自然流產(chǎn)的夫婦進(jìn)行了染色體核型分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 環(huán)境調(diào)查

近10年來(lái)，隨著大中城市環(huán)保執(zhí)法力度的加大，一些重度污染的企業(yè)為了減少排污成本，紛紛往欠發(fā)達(dá)地區(qū)遷移。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，某市有近30家遷住，個(gè)別企業(yè)為了躲避環(huán)保部門的處罰極少污染治理的成本，白天煙囪里出的是白煙，到了晚上就會(huì)釋放出一些彩色的廢氣，附近的居民反應(yīng)在有風(fēng)的傍晚和清晨總能聞到刺鼻的氣味，只好關(guān)閉門窗。同時(shí)居民反應(yīng)，一些家庭自打的淺水井的水質(zhì)嚴(yán)重惡化，用肉眼就可以看出上邊明顯浮著一層類似油膜的物質(zhì)，再不敢飲用。

工業(yè)園河溝水質(zhì)變化，污染情況：采樣地點(diǎn)：工業(yè)園5處河溝地表水及10眼家庭自打淺水井。

實(shí)驗(yàn)方法：把0.1 mL水樣,在37℃條件下，用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h所生長(zhǎng)的菌落數(shù)。同時(shí)測(cè)量河溝地表水，家庭自打淺井水。見圖1、圖2。

圖1 家用淺井水的菌落生長(zhǎng)情況

圖2 河溝地表水的菌落生長(zhǎng)情況

如圖所示，家用淺井水用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h所生長(zhǎng)的菌落數(shù)明顯少于河流地表水。菌落直徑明顯小。此結(jié)果水樣為0.1 mL，表明河溝地表水生物污染程度極其嚴(yán)重，不適合人及家畜飲用。家庭自打淺井水的水質(zhì)問題應(yīng)該引起重視，不適于生水直接飲用。

2 試驗(yàn)對(duì)象與方法

采用VideoTesT-Karyo 3.1&Ideogram Analytics Software最新3.1版本染色體全自動(dòng)核型分析軟件。RPMI 1640培養(yǎng)基購(gòu)于萊佛生物工程研究所，吉姆薩染液購(gòu)于GIBCO公司（美國(guó)）。反復(fù)自然流產(chǎn)的夫婦58對(duì)。排除外傷，內(nèi)分泌失調(diào)，免疫和宮內(nèi)感染因素，生殖系統(tǒng)解剖異常，培養(yǎng)失敗2例，共檢出染色體異常7例，占患者總數(shù)的12.06%。其中易位2例，羅伯遜易位1例，倒位2例，重復(fù)1位，染色質(zhì)多態(tài)性1例。見表1。

表1 染色體異常核型

3 病例分析與遺傳咨詢

以第4對(duì)就診患者為例：女,28,表型及智力正常，反復(fù)流產(chǎn)2次,均在妊娠45天左右自然流產(chǎn)。男，28，表型及智力正常。夫妻二人均未從事高輻射及高污染工作。其丈夫核型正常，46，XY。女患者核型為羅伯遜易位，45,XX,rob(13;21)。其本身表型正常，產(chǎn)生的后代可能有以下類型，見圖3。分析：羅伯遜易位(Robertsonian translocation)，又稱著絲粒融合（centric fusion）。這是發(fā)生于近端著絲粒染色體的一種易位形式。當(dāng)兩個(gè)近端著絲粒染色體在著絲粒部位或著絲粒附近部位發(fā)生斷裂后，二者的長(zhǎng)臂在著絲粒處接合在一起，形成一條由長(zhǎng)臂構(gòu)成的衍生染色體；兩個(gè)短臂則構(gòu)成一個(gè)小染色體，小染色體往往在第二次分裂時(shí)丟失，這可能由于其缺乏著絲粒或者是由于其完全由異染色質(zhì)構(gòu)成所致。羅伯遜易位攜帶者雖然只有45條染色體，但表型一般正常，只在形成配子的時(shí)候會(huì)出現(xiàn)異常，造成胚胎死亡而流產(chǎn)或出生先天畸形等患兒。如圖3所示，羅伯遜易位母本與正常父本婚配后代，可以產(chǎn)生6種不同基因型的后代，13單體和21單體無(wú)法存活，造成自然流產(chǎn)或者死胎；13三體存活率低，患兒嚴(yán)重智力低下，伴隨特殊的握拳姿勢(shì)，搖椅形足，通貫掌等。21三體綜合征為常見先天性愚型。只有1/6的后代正常，1/6的后代雖然表型正常，其本身是羅伯遜易位攜帶者，婚配后后代遺傳規(guī)律同圖3。

圖3 羅伯遜易位母本與正常父本婚配后代的遺傳分析

4 討論

遺傳病就是遺傳物質(zhì)的改變而引起的疾病。這種改變?nèi)绻l(fā)生在生殖細(xì)胞即卵子或精子上，就會(huì)傳遞給下一代。子代發(fā)病或者本身表型正常但攜帶者致病基因又會(huì)傳給自己的后代，所以我們會(huì)看到隔代遺傳的現(xiàn)象。這種改變?nèi)绻l(fā)生在體細(xì)胞上，不會(huì)傳遞給后代，往往與一些先天性畸形和腫瘤有關(guān)。

對(duì)于人類，遺傳物質(zhì)的改變就是DNA的改變，有遺傳效應(yīng)的DNA片段就是常說(shuō)的基因。引起遺傳物質(zhì)改變的化學(xué)因素種類眾多，大量實(shí)驗(yàn)證明：環(huán)境污染可引起機(jī)體細(xì)胞遺傳物質(zhì)受到損傷，即基因突變?；蛲蛔兊念愋秃驼T變因素很多，包括物理、化學(xué)、生物因素。引起堿基改變從而導(dǎo)致基因突變，甚至染色體的畸變。本實(shí)驗(yàn)中細(xì)菌總數(shù)反映了水體生物性污染的程度，總數(shù)增多，說(shuō)明水體污染狀況惡化。今后應(yīng)該對(duì)淺表水中可以引起遺傳物質(zhì)改變的重金屬含量進(jìn)行密切監(jiān)測(cè)。

染色體的畸變包括數(shù)量的改變和結(jié)構(gòu)的改變兩大類型。除了大家比較熟悉的21三體綜合征是由染色體的數(shù)量畸變引起的，還有13三體綜合征，18三體綜合征。5號(hào)染色體短臂缺失引發(fā)的貓叫綜合征等。以13三體綜合征為例，因?yàn)?3號(hào)染色體較長(zhǎng)，攜帶基因較多，從而13號(hào)三體造成的基因不平衡問題較大，能夠出生并存活的個(gè)體很少，大部分都自然流產(chǎn)或者死胎。相關(guān)知識(shí)的知曉率與經(jīng)濟(jì)發(fā)展不平衡。當(dāng)發(fā)生自然流產(chǎn)時(shí)，不能引起足夠的重視。加之女性受教育的年限逐年延長(zhǎng)，事業(yè)心加重，晚婚晚育已成趨勢(shì)。而大齡孕產(chǎn)婦，是造成畸形、自然流產(chǎn)率升高的原因之一。因此，我們要進(jìn)一步加大優(yōu)生優(yōu)育宣傳的同時(shí)，做好遺傳咨詢和產(chǎn)前篩查工作。

人類的疾病、性格、行為等都是由基因決定的?？梢钥吹饺旧w核型異常是造成流產(chǎn)、死胎的重要因素之一,核型異常患者占總?cè)藬?shù)的12.06%。一個(gè)健康的孩子，既可以給美滿幸福的家庭帶來(lái)歡樂，又有利于國(guó)家民族的興旺繁榮。做好染色體的核型分析工作，為患者提供科學(xué)的生育指導(dǎo)；降低患兒的出生率，最終達(dá)到提高人口素質(zhì)的目的。遺傳學(xué)工作者可以就某病的病因、遺傳方式、診斷、治療、預(yù)后和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)等問題給予科學(xué)的答復(fù)，并提出建議或指導(dǎo)性意見。一般可以結(jié)合產(chǎn)前診斷和采用優(yōu)生學(xué)先進(jìn)技術(shù)輔助生殖。產(chǎn)前診斷在我國(guó)起步較晚，2002年衛(wèi)生部制定了《產(chǎn)前診斷技術(shù)管理辦法》。目前比較成熟的技術(shù)有：羊膜穿刺術(shù)、胎兒鏡檢查、絨毛取樣法、臍帶穿刺術(shù)、孕婦外周血分離胎兒細(xì)胞等。

科教及經(jīng)濟(jì)發(fā)展相對(duì)落后的區(qū)域。接受發(fā)達(dá)地區(qū)的重污染企業(yè)。該市屬于平原產(chǎn)糧區(qū)，群眾多從事農(nóng)業(yè)及小型手工業(yè)。基礎(chǔ)教育在農(nóng)村地區(qū)尤其薄弱。雖然流產(chǎn)及死胎的病情發(fā)生率較高，但重視程度不夠，再加上本身文化程度的限制，所以本實(shí)驗(yàn)接受病例數(shù)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于實(shí)際發(fā)病人數(shù)。令人遺憾的是，即使有患者來(lái)醫(yī)院就診，也因?yàn)闆]有開展染色體的核型分析檢查和缺少專門的遺傳咨詢?nèi)藛T，要么不了了之，要么建議去上級(jí)醫(yī)院。

目前主要任務(wù)是抓緊時(shí)間建立相應(yīng)的服務(wù)機(jī)構(gòu)，開展相關(guān)檢查、咨詢、指導(dǎo)和宣傳工作。

[1]張濤，馬愛民.醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)[M].北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2010：65-68.

[2]李芬，王和.優(yōu)生學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2014：40-45.

[3]劉杰，林麗婭，顧茂勝，等.徐州地區(qū)習(xí)慣性流產(chǎn)夫婦的細(xì)胞遺傳學(xué)分析[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2006，（7）：40-41.

[4]毛雄英，顧志芬，金之瑾.寧波地區(qū)265對(duì)反復(fù)自然流產(chǎn)夫婦的染色體核型分析[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2009，（5）：54-55.

[5]費(fèi)鴻君，劉曉佳，王玉玨，等.自然流產(chǎn)夫婦的染色體畸變及其分析[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，（9）：32-33.

The Study of Genetic Factors in Patients with Early Abortion in South-west Shandong Province

Wang Fang,Zhou Changwen,Guo Xiaohui
（Heze Medical College,heze,shandong 274000）

ObjectiveTo Explore the relationship between the implication of Karyotype and recurrent spontaneous abortion.MethodsCollect the patient's elbow vein blood,normal peripheral blood cell culture and chromosome G-band?ing specimen preparation,provide karyotype analysis and genetic diagnosis to 58 of repeated spontaneous abortion couples.Results7 chromosomal abnormalities cases were detected,it accounts for 11.6%of patients.2 translocation,1 robertso?nian translocation1,inversion1,Chromatin polymorphism.ConclusionsThe results of genetic analysis showed most of the patients with chromosome abnormality can bring normal gametes.In combination with prenatal diagnosis,they can bring healthy offspring.For low proportion of normal gametes,we can provide eugenics technology to help reproduction.

Spontaneous abortion;Chromosome;Karyotype analysis;Genetic counseling

R714.21

A

1008-4118（2015）04-0003-04

10.3969/j.issn.1008-4118.2015.04.002

2015-07-26

王芳，女（，1976-），碩士研究生，現(xiàn)從事醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教學(xué)及研究工作。

山東省教育廳2013年計(jì)劃課題，課題編號(hào)：J13LL57。