陳 馨，陳 杰，蔣 冰，徐升強(qiáng)

（武漢市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430022）

冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas6水平檢測及意義

陳 馨，陳 杰，蔣 冰，徐升強(qiáng)＊

（武漢市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430022）

目的 探討生長停滯特異性基因產(chǎn)物6（Gas 6）與冠心病伴2型糖尿病患者血清中的變化及其臨床意義。方法 選擇心血管內(nèi)科120例冠心病患者（CHD）作為冠心病組，120例冠心病伴2型糖尿病患者（CHD＋T2DM）組，同時選擇健康體檢者80例作為對照組。ELISA法對三組血清進(jìn)行Gas 6的濃度檢測，并檢測其空腹血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbAlc）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、hs－CRP、同型半胱氨酸（Hcy）含量，并對結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果 ELISE法檢測健康對照組Gas 6的含量為227.61±7.28pg／ml，冠心病患者組血清中Gas 6含量為278.57±6.61pg／ml，冠心病伴2型糖尿病患者血清中Gas 6含量為285.66±6.37pg／ml。冠心病患者組和冠心病伴2型糖尿病患者組較健康對照組明顯升高，冠心病伴2型糖尿病患者組明顯高于冠心病患者組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。冠脈狹窄支數(shù)越多，血清Gas 6水平越高（P＜0.05）。結(jié)論 生長停滯特異性基因產(chǎn)物6（Gas 6）在冠心病伴2型糖尿病患者血清中濃度明顯升高，且隨冠脈狹窄支數(shù)增多而增高，提示Gas 6參與冠心病伴2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展。

生長停滯特異性基因產(chǎn)物6；冠心?。?型糖尿病；炎癥因子

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0896）

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（冠心病，CHD）是一種嚴(yán)重威脅中老年人的心血管疾病，近年來認(rèn)為冠心病是一種炎癥反應(yīng)性疾?。?，2］。中國心臟調(diào)查組研究表明我國住院患者中有超過六成的冠心病患者合并糖代謝異常，糖尿病是冠心病的主要危險因素之一［3］，2型糖尿病和動脈粥樣硬化同屬一種慢性、亞臨床炎性反應(yīng)性疾病，兩者發(fā)病機(jī)制存在一定的相似性。研究血清中生長停滯特異性基因產(chǎn)物6（Gas 6）在健康人群、冠心病患者、冠心病合并糖尿病患者三組人群中濃度水平的變化，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象

收集2012年11月至2014年5月武漢市第一醫(yī)院心血管內(nèi)科冠心?。–HD）患者血清標(biāo)本120例，其中男性59例，女性61例，平均年齡為45－65歲。冠心病伴2型糖尿?。–HD＋T2DM）患者血清標(biāo)本120例，其中男性55例，女性65例，平均年齡為45－65歲?；颊呔?jīng)過彩超、CT、冠脈造影等檢查，冠脈造影采用Judkins法經(jīng)橈動脈做選擇性冠脈造影，由兩位臨床經(jīng)驗(yàn)豐富的心內(nèi)科醫(yī)師判定評價冠脈造影結(jié)果，冠心病判斷標(biāo)準(zhǔn)為冠脈造影結(jié)果至少有1支冠狀動脈病變狹窄程度≥50%，均符合1997年世界衛(wèi)生組織制定的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)。糖尿病診斷符合1999年WHO的糖尿病分型診斷標(biāo)準(zhǔn)。對照組為武漢市第一醫(yī)院體檢中心健康對照者80例，平均年齡為45－60歲。經(jīng)體檢及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查，無心、腦、肝、腎、等疾病，無糖尿病，無急性感染，無血液系統(tǒng)疾病。根據(jù)冠心病伴2型糖尿病患者組冠脈造影結(jié)果分組，按狹窄累及左冠狀動脈前降支，左回旋支，右冠狀動脈的支數(shù)，病變分為單支病變、雙支病變、三支病變，如病變累及左主干計雙支病變。

1.2 研究方法

患者于入院時記錄年齡性別、身高、體重，記錄收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP），并計算體質(zhì)指數(shù)（bodymass index，BMI）。次日晨起空腹采集靜脈血，一管置于EDTA－K2真空采血管中，用來檢測糖化血紅蛋白（HbAlc）。另一管置于分離膠真空采血管中，迅速分離血清，用來檢測其空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、hs－CRP、同型半胱氨酸（Hcy）含量，生長停滯特異性基因產(chǎn)物6（Gas6）濃度。

FBG、TG、HDL、LDL、hs－CRP、HCY使用OLYMPUS 2700全自動生化分析儀及其配套試劑進(jìn)行檢測。FBG、TG、HCY采用酶法檢測、HDL、LDL采用直接一步法檢測、hs－CRP采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法。HbAlc使用BIO－RAD VIRANT II糖化血紅蛋白分析儀及其配套試劑檢測，采用高效液相色譜法。Gas 6檢測試劑盒由R＆D公司提供，ELISA法按照試劑盒說明書操作，用Thermo multiskan MK3酶標(biāo)儀檢測其濃度水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，計量資料以±s來表示，行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，兩組間比較用t檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析。以P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組相關(guān)臨床資料分析

冠心病伴2型糖尿病組FBG、HbAlc含量較健康對照組和冠心病組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。冠心病組和冠心病伴2型糖尿病組TG、LDL、hs－CRP、HCY含量均較健康對照組增高（P＜0.05），HDL含量較健康對照組降低（P＜0.05）。見表1。

表1 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組臨床資料比較（±s）

表1 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組臨床資料比較（±s）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.05；與冠心病組比較，＃P＜0.05

健康對照組（n＝80）冠心病組（n＝120）冠心病伴2型糖尿病組（n＝120）50±0.86 57±0.67 60±1.33性別（男／女）37／43 59／61 55／65 SBP（mmHg）125.1±10.2 137.1±17.9 147.7±13.75 DBP（mmHg）78.7±6.9 84.6±11.5 87.9±13.8 BMI（kg／m2）23.8±13.5 25.9±1.9 27.1±2.11 FBG（mmol／L）4.22±1.12 5.36±0.69 9.34±1.38＊＃HbAlc（%）5.01±0.87 6.23±1.33 9.72±1.57＊＃TG（mmol／L）1.68±0.12 2.35±0.09＊2.45±0.12＊HDL（mmol／L）1.43±0.03 0.82±0.17＊0.79±0.13＊LDL（mmol／L）2.55±0.07 3.45±0.07＊3.77±0.08＊hs－CRP（mg／L）3.14±0.25 10.53±0.19＊13.66±1.51＊HCY（μmol／L）7.86±0.31 18.87±0.07＊20.92±0.11年齡＊

2.2 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組Gas6濃度水平比較

80例健康對照組Gas6的含量為227.61±7.28 pg／ml，120例冠心病組含量為278.57±6.61pg／ml，120例冠心病伴2型糖尿病組含量為285.66± 6.37pg／ml。冠心病組和冠心病伴2型糖尿病組的血清Gas6濃度顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。冠心病伴2型糖尿病組較冠心病組Gas6水平升高（P＜0.05）。見表2。

表2 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組Gas6濃度水平比較（±s）

表2 健康對照組、冠心病組、冠心病伴2型糖尿病組三組Gas6濃度水平比較（±s）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.01；與冠心病組比較，＃P＜0.05

健康對照組冠心病組冠心病伴2型（n＝80）（n＝120）糖尿病組（n＝120）Gas6（pg／ml）227.61±7.28 278.57±6.61＊285.66±6.37＊＃

2.3 冠心病伴2型糖尿病患者冠脈造影分組后Gas6濃度水平結(jié)果比較

按狹窄累及左冠狀動脈前降支，左回旋支，右冠狀動脈的支數(shù)，病變分為單支病變、雙支病變、三支病變，如病變累及左主干計雙支病變。根據(jù)冠脈病變支數(shù)，將冠心病伴2型糖尿病組120例患者分成3組研究其血清中Gas6濃度水平。冠脈單支病變患者35例，冠脈雙支病變患者56例，冠脈三支病變患者29例，各組Gas6濃度見表3。冠脈雙支病變和三支病變患者組血清Gas6濃度高于單支病變組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；冠脈三支病變較雙支病變患者組血清Gas6濃度升高（P＜0.05）。

表3 冠心病伴2型糖尿病組Gas6按冠脈病變支數(shù)分組比較（±s）

表3 冠心病伴2型糖尿病組Gas6按冠脈病變支數(shù)分組比較（±s）

注：與冠脈單支病變組比較，aP＜0.05；與冠脈雙支病變組比較，bP＜0.05

單支病變雙支病變?nèi)Р∽兝龜?shù)（n＝120）35 56 29 Gas6（pg／ml）277.57±5.63 284.66±7.97a289.66±7.11ab

3 討論

對冠心病發(fā)病機(jī)制的研究，近年來偏向于炎癥介質(zhì)學(xué)說［1，2］，其病理表現(xiàn)具有炎癥病理的基本表現(xiàn)形式：變質(zhì)、滲出和增生。糖尿病可能是一種由免疫功能紊亂參與的、細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥性疾?。?，5］，炎癥反應(yīng)在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中的作用日益受到關(guān)注。大量實(shí)驗(yàn)證明炎癥因子在冠心病、冠心病伴2型糖尿病患者中表達(dá)增強(qiáng)［6－8］，如：hs－CRP、HCY等。我們的研究也證明了這一點(diǎn)，冠心病、冠心病伴2型糖尿病患者中的hs－CRP、HCY水平均較健康組增高（P＜0.05）。

臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室結(jié)果病理資料表明冠心病伴2型糖尿病患者動脈粥樣病變嚴(yán)重程度都比非糖尿病患者嚴(yán)重［9］。其中的機(jī)制可能為：①糖尿病患者長期高血糖，致使高級糖基化終產(chǎn)物（advanced glycosylation end product，AGE）增多，聚集損傷血管內(nèi)膜，促進(jìn)單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞向受損內(nèi)皮趨化，加重內(nèi)皮細(xì)胞損傷，促進(jìn)血管收縮，血液當(dāng)中的有害物質(zhì)如血脂、血小板等沉積在血管內(nèi)壁上，導(dǎo)致管腔變窄［10］。②糖尿病患者血糖增加導(dǎo)致細(xì)胞能量代謝紊亂，破壞內(nèi)皮細(xì)胞，血小板在受損內(nèi)皮上黏附，聚集增加［11］，血栓形成，結(jié)果導(dǎo)致冠狀動脈粥樣硬化發(fā)生和發(fā)展加速。③冠心病的獨(dú)立危險因素如高血壓、高TG血癥、低HDL等，也導(dǎo)致冠心病的發(fā)生發(fā)展。

Gas6屬于維生素K依賴蛋白家族成員，參與炎癥反應(yīng)，動脈粥樣硬化和糖尿病的發(fā)生發(fā)展［12，13］。亦有學(xué)者認(rèn)為Gas6同CRP一樣也可能是一種急性時相反應(yīng)蛋白，在腦梗死、腦出血和AMI急性期反應(yīng)性增高［14］。Saller等［15］研究指出Gas 6在人及小鼠動脈粥樣硬化斑塊中的內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中表達(dá)，Gas6參與凋亡細(xì)胞的吞噬作用，在細(xì)胞凋亡增加時表達(dá)有所上調(diào)，在炎癥發(fā)生時Gas6合成可明顯增加［16，17］，這些機(jī)制都可能與Gas6參與炎癥反應(yīng)進(jìn)而導(dǎo)致動脈粥樣硬化和糖尿病有關(guān)。有研究表明Gas6還參與了泡沫細(xì)胞的形成及增殖，泡沫細(xì)胞形成是動脈粥樣硬化形成和發(fā)展中的早期變化［18］，大量泡沫細(xì)胞聚集形成動脈粥樣硬化斑塊。

我們用ELISE法檢測冠心病患者和冠心病合并2型糖尿病患者血清中Gas6的含量，發(fā)現(xiàn)其濃度較健康體檢者明顯增高，冠心病患者含量為278.57 ±6.61pg／ml，冠心病伴2型糖尿病組含量為285.66±6.37pg／ml，健康對照組Gas6的含量為227.61±7.28pg／ml，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。冠心病伴2型糖尿病組較冠心病組Gas6水平升高（P＜0.05）。

國內(nèi)關(guān)于Gas6與動脈粥樣硬化的報道很少，國外亦有類似報道。我們的研究發(fā)現(xiàn)在冠心病患者中Gas6水平較正常對照是升高的，這點(diǎn)與唐開放［14］的研究是一致的。

在選取的120例冠心病伴2型糖尿病組中，對其冠脈造影結(jié)果進(jìn)行分組后比較Gas6濃度水平，得出的結(jié)論是病變支數(shù)越多，其Gas6水平越高（P＜0.05）。其原因可能如前所述，冠心病伴2型糖尿病患者動脈內(nèi)皮損傷嚴(yán)重，管腔狹窄，病變支數(shù)多，炎癥程度加重。

本研究顯示，Gas6在冠心病伴2型糖尿病發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用，檢測冠心病伴2型糖尿病患者Gas6水平對病情的發(fā)生發(fā)展及治療效果監(jiān)測有著重要臨床意義，可作為臨床冠心病伴2型糖尿病組常規(guī)檢測項(xiàng)目來應(yīng)用于臨床。

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The clinical significance of Gas6 in conronary heart disease complicated with type 2 diabetes mellitus

CHEN Xin，CHEN Jie，JIANG Bing，et al.（Department of Clinical Laboratory，Wuhan NO.1 Hospital，Wuhan 430022，China）

Objective To study the change of growth arrest－specific gene 6（Gas 6）in serum of coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus，and clinical significance.Methods We have selected 120cases of patients with coronary heartdisease（CHD）out of the in－part patients in cardiovascular department as the coronary heart disease group，and 120cases of patients with coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus（CHD＋T2DM）as

Gas 6；coronary heart disease；type 2diabetes mellitus；inflammatory factor

R541.4；R587.1

Acoronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus group，80healthy people were selected as controls.Serum levels of Gas6were determined by an enzyme－linked immunosorbent assay（ELISA）kit，F(xiàn)BG，HbAlc，triglyceride（TG），high density lipoprotein（HDL），low density lipoprotein（LDL），hs－CRP，homocysteine（Hcy）were detected and the data were statistically analyzed.Results ELISA adopted to detect the content of Gas 6in the healthy group was 227.61±3.28pg／ml，in CHD group was 278.57±1.61pg／ml and in CHD＋T2DM group was 285.66±2.37pg／ml，in CHD group and CHD＋T2DM group are significantly higher than the control group，CHD＋T2DM group are significantly higher than the CHD group，and the data has statistically significant（P＜0.05）.The more the amount of coronary stenosis is，the higher level of Gas 6is（P＜0.05）.Conclusion The concentraction of growth arrest－specific gene 6（Gas 6）in serum of coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus increased evidently and rise with the increase in the number of coronary stenosis，Gas 6reaction was closely associated with coronary heart disease combined with type 2diabetes mellitus.

陳馨（1983－），女，檢驗(yàn)醫(yī)師，研究方向：臨床分子檢驗(yàn)。

2014－10－14）

1007－4287（2015）06－0896－04

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81170035）；武漢市衛(wèi)生局科研課題（WX12C29）；武漢市衛(wèi)生局科研課題（WX14D02）

＊通訊作者