鄧楠　李婭

【摘 要】 目的：分析常見(jiàn)呼吸道感染的病原體及其感染特點(diǎn)。方法：回顧性分析昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年1～12月住院患者中進(jìn)行過(guò)呼吸道九項(xiàng)病原體IgM抗體檢測(cè)的1821例患者。采用間接免疫熒光法檢測(cè)患者血清中的嗜肺軍團(tuán)菌（LPN-1）、肺炎支原體（MP）、Q熱立克次體（COX）、肺炎衣原體（CP）、腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）和副流感病毒1、2和3型（PIV）等9種呼吸道感染病原體的IgM抗體。分析在不同性別、年齡段、季度情況下呼吸道病原體感染情況。結(jié)果：1821例標(biāo)本中，男性患者1102例，女性患者719例。共檢出IgM抗體陽(yáng)性843例（46.29%），其中，檢出單一病原體感染陽(yáng)性標(biāo)本433例，病原體混合感染陽(yáng)性標(biāo)本410例。住院科室中，兒科受檢例數(shù)最高，為1291例，其中檢出IgM抗體陽(yáng)性例數(shù)為674例，陽(yáng)性率為52.21%。14歲以下兒童中，≤1歲組病原體檢出率為25.93%，1～14歲組病原體檢出率為67.41%；14歲以上人群中，14～20歲組病原體檢出率為35.71%，20～60歲組病原體檢出率為39.26%，≥60歲組病原體檢出率為19.31%。不同季度呼吸道病原體感染情況不同。第一季度病原體檢出率較高（59.34%），第二季度病原體檢出率較低（34.15%）。結(jié)論：呼吸道病原體感染率與年齡、性別、季節(jié)有關(guān)；兒童是呼吸道病原體的主要易感人群，肺炎支原體的感染是其急性呼吸道感染中的主要病原體之一；采用間接免疫熒光法快速檢測(cè)人血清中9種呼吸道感染主要病原體的IgM抗體，可為臨床的診斷和治療提供重要的參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 呼吸道感染；病原體；熒光抗體技術(shù)

【中圖分類號(hào)】R373.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2015）07-0127-03

Abstract：Objective To understand the common respiratory infection in the population of infection of pathogens and their characteristics.Methods retrospective analysis of first affiliated hospital of Kunming Medical University 2013 in-patients respiratory pathogens in 1821 of the nine test cases. Used indirect immune fluorescent law detection patients serum in the of addicted to lung Regiment bacteria （LPN-1）， and pneumonia support original body （MP）， and Q hot rickettsia （COX）， and pneumonia clothing original body （CP）， and glands virus （ADV）， and respiratory collection cell virus （RSV）， and swine influenza virus （FluA）， and b type influenza virus （FluB） and Deputy influenza virus 1， and 2 and 3 type （PIV）， 9 species respiratory infection disease original body of IgM antibody. Analysis in different sections， sex， age， season case infection of human pathogens.Results 1821 in specimens from patients， male 1102 patients， 719 cases of female patients. Total of 843 cases of positive detection of IgM antibody （46.29%）， of which， checking out a single positive specimens 433 cases of pathogen infections， infection with pathogens positive specimens in 410 cases. Inpatient， pediatric pathogens highest tested， 1291 cases， of which 674 cases of detection of IgM antibody positive cases， the positive rate for 52.21%. In children under the age of 14， pathogenic examination rate ≤ 1 year old group is 25.93%， 1～14sui group of pathogenic examination rate is 67.41%； among people over the age of 16， pathogenic examination rate for 35.71% the 14～20sui group， 20～60sui group of pathogenic examination rate for pathogenic examination 39.26%，>60 age group rate for 19.31%. Respiratory tract pathogens infection in different seasons on a regular basis. Pathogenic examination rate for the first quarter was higher （57%） in the fourth quarter， lower rates of pathogenic examination （7.6%）. Conclusionspopulation respiratory tract pathogens infection associated with age， sex， season. children is the main respiratory pathogens susceptible populations， Mycoplasma pneumonia infection in pediatric patients with acute upper respiratory tract infection is the important one of the pathogens. indirect immuno-fluorescence assay for rapid detection of 9 kinds of main pathogens of respiratory tract in human serum IgM antibodies for clinical diagnosis and treatment provide an important frame of reference.

Keywords：respiratory tract infection； pathogens； fluorescent antibody technology

呼吸道感染是臨床常見(jiàn)疾病，可以由多種病原體引起。呼吸道病毒習(xí)慣上是指侵犯呼吸道的病毒，至少涉及8個(gè)科，200多個(gè)型。目前已證明，急性上呼吸道感染90%以上是由病毒引起[1]。急性呼吸道感染是兒童最常見(jiàn)的疾病，據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）資料，全世界每年約有400萬(wàn)5歲以下兒童死于急性呼吸道感染[2]。為了解昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年度住院患者呼吸道感染的病原體種類及其感染特點(diǎn)，本研究回顧性分析了本院疑似呼吸道感染的患者1821例，采用間接免疫熒光法進(jìn)行呼吸道九項(xiàng)病原體檢測(cè)，對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析和探討，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 標(biāo)本來(lái)源于2013年1月～12月昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院患者共1821例。其中男性1102例，女性719例；年齡≤1歲482例，1～14歲850例，14～20歲14例，20～60歲242例，≥60歲233例。所有患者均存在呼吸道感染的情況，包括：發(fā)熱待查、肺炎、支氣管哮喘、急性氣管支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、扁桃體炎等。

[JP4]1.2 標(biāo)本采集 用無(wú)抗凝劑真空采血試管抽取患者靜脈血2ml，2h內(nèi)分離血清。采用間接免疫熒光法檢測(cè)血清中嗜肺軍團(tuán)菌（LPN-1）、肺炎支原體（MP）、Q熱立克次體（COX）、肺炎衣原體（CP）、腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）和副流感病毒1、2和3型（PIV）等9種呼吸道感染病原體的IgM抗體。

1.3 儀器與試劑 采用日本奧林巴斯正置熒光顯微鏡BX-50和西班牙VIRCELL公司生產(chǎn)的間接免疫熒光分析試劑盒，試劑在有效期內(nèi)使用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。各組陽(yáng)性率的比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)和多個(gè)樣本率的多重比較，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原體檢出情況 在1821例標(biāo)本中，共檢出IgM抗體陽(yáng)性843例（46.29%）。檢出單一病原體感染陽(yáng)性標(biāo)本433例，主要為肺炎支原體（300例）、乙型流感病毒（103例）；病原體混合感染陽(yáng)性標(biāo)本410例，主要為肺炎支原體合并乙型流感病毒感染（259例）；未檢出Q熱立克次體、肺炎衣原體。1821例標(biāo)本中具體病原體檢出情況見(jiàn)表1及表2。

2.2 各年齡段呼吸道病原體感染情況 1821例標(biāo)本呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)中，以1～14歲患者例數(shù)最多（573例），陽(yáng)性率最高（67.41%），單一病原體感染中以肺炎支原體為主177例（20.82%），混合病原體感染以肺炎支原體合并乙型流感病毒感染為主（24.94%），其次為肺炎支原體合并腺病毒、乙型流感病毒感染（6.55%）；≥60歲患者陽(yáng)性率最低（19.31%）。不同年齡階段呼吸道病原體陽(yáng)性檢出率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。其中1～14歲與其他年齡段相比存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ21～14/≤1=212.160，P<0.05；χ21～14/14～20=6.249，P=0.012<0.05；χ21～14/20～60=62.870，P<0.05；χ21～14/≥60=172.673，P<0.05）。1821例標(biāo)本中各年齡段呼吸道病原體感染情況見(jiàn)表3。

2.3 不同性別呼吸道病原體感染情況 1821例患者中，共有男性患者1102例，女性患者719 例。其中，男性患者呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)為470例，陽(yáng)性率為42.65%；女性患者呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)為373例，陽(yáng)性率為51.88%。不同性別人群呼吸道病原體陽(yáng)性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），女性較男性更易感染，考慮可能與男、女性氣道的生理解剖結(jié)構(gòu)存在差異，女性氣道較男性而言，長(zhǎng)度略短，氣管分叉處角度略陡，致使異物不易從呼吸道排出而較易發(fā)生呼吸道感染。1821例標(biāo)本中不同性別患者呼吸道病原體的檢出感染見(jiàn)表4。

2.4 不同季度呼吸道病原體感染情況 1821例就診患者中，第一季度接診患者632例，檢出IgM抗體陽(yáng)性375例（59.34%）；第二季度接診患者363例，檢出IgM抗體陽(yáng)性153例（34.15%）；第三季度接診患者448例，檢出IgM抗體陽(yáng)性144例（39.67%）；第四季度接診患者378例，檢出IgM抗體陽(yáng)性171例（45.24%）。不同季度之間呼吸道病原體的陽(yáng)性率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。第一季度較其他季度存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ21/2=66.540，P<0.05；χ21/3=35.736，P<0.05；χ21/4=18.928，P<0.05；χ22/3=2.630，P=0.105>0.05；χ22/4=10.570，P=0.001<0.05；χ23/4=2.350，P=0.125>0.05）。四個(gè)季度中以第一季度呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)陽(yáng)性率最高（59.34%）。肺炎支原體、呼吸道合胞病毒、乙型流感病毒在春季陽(yáng)性率偏高；呼吸道合胞病毒、腺病毒、乙型流感病毒、副流感病毒1、2和3型在秋、冬季陽(yáng)性率偏高。其他病原體因檢測(cè)率低，無(wú)明顯季節(jié)性。1821例標(biāo)本中不同季度呼吸道病原體感染情況，見(jiàn)表5。

3 討論

經(jīng)過(guò)對(duì)1821例患者從性別、年齡、季度方面研究分析，2013年度昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院的呼吸道病原體感染特征如下。1821例患者中，男性1102例，女性719例，男女比例為1∶1.53，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，女性更易感染呼吸道病原體。所有住院科室中，以兒科接診病例最多（1291例）；所有年齡段人群中以1～14歲兒童感染例數(shù)最多（573例），陽(yáng)性率最高（67.41%）。呼吸道感染是臨床常見(jiàn)疾病，更是兒科的常見(jiàn)多發(fā)病，在兒童發(fā)病率中居首位，兒童呼吸道感染國(guó)內(nèi)占67.9%，國(guó)外達(dá)62%[3]，因此近年來(lái)呼吸道病原學(xué)的研究在兒科得到廣泛重視。該年齡段的兒童免疫機(jī)制還不夠健全，可采用接種流感疫苗等方法對(duì)其加強(qiáng)保護(hù)。

昆明地處云貴高原中部，屬低緯亞熱帶高原山地季風(fēng)氣候，獨(dú)特的地理位置形成了四季如春的宜人氣候，雖然昆明地區(qū)四季不夠分明，但呼吸道病原體的檢出率卻有明顯的季節(jié)分布，大部分是在第一、四季度檢出，說(shuō)明春、冬季節(jié)易感。與文獻(xiàn)報(bào)道的其他地區(qū)病毒感染的季節(jié)性分布規(guī)律[4]有差異，筆者認(rèn)為可能與春、冬季正處云南旱季，氣候干燥，有利于呼吸道病毒傳播有關(guān)。

體液免疫是機(jī)體感染病毒后的主要免疫方式，而初次感染和再次感染過(guò)程中，IgG、IgM抗體有著不同的出現(xiàn)形式。初次感染時(shí)，IgG、IgM抗體均出現(xiàn)，但I(xiàn)gM的出現(xiàn)早于IgG；而再次感染時(shí)，可能不出現(xiàn)IgM，主要以IgG的形式來(lái)發(fā)揮免疫效應(yīng)。在許多疾病中，患者一生都可能存在著高滴度的IgG，而IgM一般僅在感染后2～3個(gè)月內(nèi)存在于血清中。由于IgM抗體是機(jī)體受抗原刺激后體液免疫應(yīng)答過(guò)程中最早產(chǎn)生的抗體，所以血清中特異性IgM抗體含量增高提示近期感染，有助于臨床早期診斷[5]。本研究中，肺炎支原體、乙型流感病毒、腺病毒刺激機(jī)體產(chǎn)生的IgM抗體陽(yáng)性率較高，與國(guó)內(nèi)有些文獻(xiàn)報(bào)道的以呼吸道合胞病毒、副流感病毒感染為主的情況不一致[6]。造成這一差異的可能原因有：① 本研究屬于回顧性分析，僅選擇了一個(gè)年度就診于昆醫(yī)附一院的患者，樣本量有限。②隨著時(shí)間、季節(jié)、地域、人群的變化，呼吸道病毒的流行趨勢(shì)也在發(fā)生變化，需進(jìn)一步研究。③可能與檢測(cè)方法敏感性及檢測(cè)的病毒種類有關(guān)。國(guó)內(nèi)多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道采用的是PCR法對(duì)呼吸道病毒及其亞型進(jìn)行檢測(cè)。PCR法雖可直接檢測(cè)病原體核酸，但一次只能從標(biāo)本中檢驗(yàn)出一種核酸，靈敏度高，陽(yáng)性率低，對(duì)尚不明確的病毒更是無(wú)從下手。與抗原檢測(cè)不同，血清抗體標(biāo)本的檢測(cè)一般不受操作技術(shù)水平差異的影響[7]，靈敏度高、特異度好，明晰的熒光形態(tài)使檢測(cè)結(jié)果容易準(zhǔn)確判讀，更易于臨床的廣泛應(yīng)用。

隨著環(huán)境污染和抗生素的濫用，人群免疫力下降，兒童因其免疫機(jī)制的不完善更容易感染各類病原微生物，除了常見(jiàn)的細(xì)菌、病毒感染以外，還可感染非典型病原體，包括嗜肺軍團(tuán)菌（LPN-1）、肺炎支原體（MP）、Q熱立克次體（COX）、肺炎衣原體（CP）等[8-9]。采用間接免疫熒光法同時(shí)檢測(cè)血清中9種呼吸道感染主要病原體的IgM抗體，檢測(cè)靈敏度高、特異度好，明晰的熒光形態(tài)使檢測(cè)結(jié)果容易準(zhǔn)確判讀，快速方便的檢測(cè)手段可大大縮短檢測(cè)周期，為臨床醫(yī)生診療提供有效依據(jù)，同時(shí)也為本院對(duì)于急性呼吸道疾病的防控提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1]陸學(xué)東.臨床常見(jiàn)呼吸道病毒及其實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)[J].中國(guó)病毒學(xué)雜志，2013，37（10）：82-86.

[2]倪安平.呼吸道病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，32（8）：850

[3]陸敏，曾玫，陸權(quán)，等.上海地區(qū)小兒急性病毒性呼吸道感染臨床流行病學(xué)特征[J].中國(guó)抗感染化療雜志，2005，5（3）：152-154.

[4]季偉，陳正榮，郭紅波，等.蘇州兒童醫(yī)院住院兒童呼吸道病毒的流行特點(diǎn)及氣候因素的相關(guān)性研究[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2011，45（3）： 205-209.

[5]沈曉明，王衛(wèi)平.兒科學(xué)[M].7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：348.

[6]樊茂，吳茜，倪林仙，等.昆明地區(qū)小兒急性下呼吸道感染病原譜的分析[J].中國(guó)兒童保健雜志，2008，16（6）：724-726.

[7]宋秦偉，朱汝南.血清特異性抗體檢測(cè)在兒童呼吸道感染病原體診斷中應(yīng)用的探討[J].中華兒科雜志，2012，50（6）：440-444.

[8]田愛(ài)麗，周麗音.兒童呼吸道病毒感染的流行病研究[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床，2011，22（6）：66-67.

[9]馬紅玲，王和平，鄭躍杰，等.門診和住院患兒呼吸道病毒感染的比較研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（12）：1509-1510.

（收稿日期：2015.01.05）