付曉政，史彬林

，李倜宇，田麗新，趙啟龍，張鵬飛，岳遠(yuǎn)西(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

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飼喂復(fù)合益生菌對(duì)奶牛糞便中氨氣產(chǎn)生及微生物含量的影響

付曉政，史彬林*

，李倜宇，田麗新，趙啟龍，張鵬飛，岳遠(yuǎn)西(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

試驗(yàn)旨在研究飼喂復(fù)合益生菌對(duì)奶牛糞便中氨氣產(chǎn)生及微生物含量的影響。試驗(yàn)選用18頭胎次、體重、泌乳階段及產(chǎn)奶量相近的澳洲荷斯坦奶牛，采用完全隨機(jī)分組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分為對(duì)照組、低劑量益生菌組和高劑量益生菌組。對(duì)照組不飼喂益生菌，2個(gè)益生菌處理組分別飼喂50和100 mL/d的益生菌液。試驗(yàn)期為60 d，分為試驗(yàn)前期和試驗(yàn)后期，各30 d。結(jié)果表明，在整個(gè)試驗(yàn)期，益生菌處理組顯著降低了牛糞中氨氣產(chǎn)量(P<0.05)。此外，30 d時(shí)，低劑量組和高劑量組乳酸菌含量均極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)；60 d時(shí)，低劑量組乳酸菌含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。試驗(yàn)結(jié)果提示，飼喂復(fù)合益生菌能調(diào)節(jié)奶牛腸道微生態(tài)環(huán)境，降低牛糞中氨氣的產(chǎn)生，改善環(huán)境空氣質(zhì)量。

益生菌；氨；微生物；牛糞

隨著規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，由奶牛養(yǎng)殖帶來(lái)的環(huán)境污染、生態(tài)破壞等現(xiàn)象也越來(lái)越嚴(yán)重。養(yǎng)殖場(chǎng)產(chǎn)生的有害氣體不僅污染周?chē)h(huán)境，而且嚴(yán)重影響動(dòng)物的生長(zhǎng)水平與健康狀況。近年來(lái)的研究表明，飼喂益生菌可調(diào)節(jié)畜禽腸道微生態(tài)環(huán)境，減少糞便中氨氣的產(chǎn)生。有益微生物進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，能有效增強(qiáng)胃腸道活動(dòng)，提高飼料轉(zhuǎn)化效率，減少糞便中蛋白含量。同時(shí)協(xié)同腸道內(nèi)有益菌群大量增殖，抑制腐敗菌的活動(dòng)，減少含氮物質(zhì)向氨或胺的轉(zhuǎn)化，從而起到除臭的效果[1-3]。劉鑫等[4]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加適量微生態(tài)制劑能顯著提高肉雞飼料利用效率，降低雞舍內(nèi)氨氣濃度。吳亨進(jìn)等[5]研究報(bào)道，飼喂EM制劑可顯著降低雞舍內(nèi)氨氣和硫化氫含量。黃興國(guó)等[6]報(bào)道，復(fù)合微生態(tài)制劑提高了生長(zhǎng)豬糞便中乳酸菌和雙歧桿菌含量，顯著降低了大腸桿菌含量。

目前，有關(guān)微生態(tài)制劑對(duì)糞便中氨氣產(chǎn)生及微生物含量影響的研究主要集中在雞和豬上，對(duì)奶牛等反芻動(dòng)物的研究則較少。本試驗(yàn)即通過(guò)在奶牛飼糧中添加復(fù)合益生菌制劑探討益生菌對(duì)奶牛糞便的影響，為益生菌在反芻動(dòng)物上的合理應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)合益生菌主要由乳酸菌、酵母菌和芽孢桿菌等組成，有效微生物含量不低于2×109CFU/mL，由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)環(huán)境衛(wèi)生學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用18頭澳洲荷斯坦奶牛，根據(jù)胎次、體重、泌乳階段及產(chǎn)奶量相近(P>0.05)的原則，采用隨機(jī)分組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分為對(duì)照組、低劑量益生菌組和高劑量益生菌組，每組6個(gè)重復(fù)。對(duì)照組不添加益生菌，低劑量組和高劑量組分別在飼糧中添加50和100 mL/d的益生菌液。各處理組基礎(chǔ)飼糧相同(飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1)，試驗(yàn)期為60 d，分為試驗(yàn)前期和試驗(yàn)后期，各30 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)牛在同一牛舍，散放式管理，每天08∶00將益生菌液與少量飼糧混勻后逐一飼喂，確保牛只完全采食。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與方法

正試期第30天和第60天時(shí)，采集奶牛糞便，精確稱取1 kg迅速分裝于潔凈塑料箱中，于24、48和72 h時(shí)，使用大氣采樣器均勻采集箱內(nèi)氣體10 L，采用靛酚藍(lán)比色法(HJ 534-2009)測(cè)定箱內(nèi)氨氣含量。塑料箱長(zhǎng)44 cm，寬21 cm，高33 cm；箱口直徑10 cm，位于箱體一側(cè)下方，裝樣后用兩層紗布封口，以防蠅蟲(chóng)進(jìn)入并確保空氣流通。分別于試驗(yàn)期第30天和第60天時(shí)，對(duì)每頭牛取1 g新鮮牛糞，采用平板菌落計(jì)數(shù)法(GB4789.2-94)測(cè)定乳酸菌、大腸桿菌和總需氧菌含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Microsoft Excel 2007整理后，利用SAS 9.0軟件的ANOVA過(guò)程進(jìn)行單因子方差分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平 (風(fēng)干基礎(chǔ))

注：①每千克預(yù)混料提供: 鐵5 000 mg; 銅3 500 mg; 錳3 500 mg; 鋅19 000 mg; 硒20 mg; 碘200 mg; 鈷50 mg; 維生素A 400 000 IU; 維生素D 200 000 IU; 維生素E 12 000 IU：②產(chǎn)奶凈能為計(jì)算值，其他營(yíng)養(yǎng)水平為實(shí)測(cè)值。

Note：①One kilogram of premix provided: Fe 5 000 mg; Cu 3 500 mg; Mn 3 500 mg; Zn 19 000 mg; Se 20 mg; I 200 mg; Co 50 mg; vitamin A 400 000 IU; vitamin D 200 000 IU; vitamin E 12 000 IU；②NEL is calculated value, and other nutrient levels are measured values.

2 結(jié)果與分析

2.1 飼喂益生菌對(duì)牛糞中氨氣含量的影響

由表2可知，各益生菌處理組的氨氣產(chǎn)量均低于對(duì)照組。在試驗(yàn)中期(30 d)，24 h高劑量益生菌組氨氣濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；48 h高劑量益生菌組氨氣濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；72 h低劑量組和高劑量組氨氣濃度均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

在試驗(yàn)后期(60 d)，發(fā)酵24 h、48 h和72 h，低劑量益生菌組和高劑量益生菌組氨氣濃度均極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，但兩個(gè)益生菌飼喂組之間差異不顯著。

2.2 飼喂益生菌對(duì)牛糞中微生物含量的影響

由表3可知，在整個(gè)試驗(yàn)期，益生菌處理組的乳酸菌含量均高于對(duì)照組。30 d時(shí)，低劑量益生菌組和高劑量益生菌組乳酸菌含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；60 d時(shí)，低劑量組乳酸菌含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；添加益生菌對(duì)大腸桿菌和總需氧菌則無(wú)顯著的影響。

3 討 論

3.1 飼喂益生菌對(duì)牛糞中氨氣含量的影響

氨氣是畜禽舍危害最大的有害氣體，其主要由糞尿中含氮有機(jī)物分解而來(lái)。飼喂微生態(tài)制劑能通過(guò)調(diào)節(jié)畜禽胃腸道的菌群平衡，提高飼料轉(zhuǎn)化效率，降低糞便中含氮物質(zhì)的含量，從而降低糞便中氨氣產(chǎn)生?；粲谰玫萚7]研究報(bào)道，飼喂芽孢桿菌可提高育肥豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，同時(shí)減少糞便中氨氣產(chǎn)生。王軍等[8]報(bào)道添加EM制劑則可明顯減少雞糞中氨的形成從而降低雞舍中氨氣含量。朱振等[9]報(bào)道，微生態(tài)制劑能顯著降低鴨舍氨氣濃度，減少環(huán)境污染。從本試驗(yàn)結(jié)果看，添加益生菌顯著降低了奶牛糞便中氨氣產(chǎn)量，這可能與益生菌提高了蛋白利用率，減少了腸內(nèi)含氮物質(zhì)向氨的轉(zhuǎn)化有關(guān)。

表2 飼喂益生菌對(duì)牛糞中氨氣產(chǎn)量的影響

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同字母表示差異不顯著(P>0.05)。下同。

Notes： In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), values with different capital letter superscripts mean highly significant difference (P<0.01), and valueswith same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3 飼喂益生菌對(duì)牛糞中微生物含量的影響

Table 3 Effect of probiotics on microorganisms in cattle manure lg cfu/g

項(xiàng)目Items益生菌飼喂量Probioticslevel/(mL/d)05010030d乳酸菌7.03a±0.287.86b±0.618.00b±0.40大腸桿菌7.50±0.517.55±0.227.47±0.32總需氧菌8.55±0.598.71±0.268.44±0.4460d乳酸菌7.35a±0.748.55b±0.067.88ab±0.56大腸桿菌7.85±0.907.85±0.447.65±0.34總需氧菌8.77±0.178.67±0.168.72±0.12

3.2 飼喂益生菌對(duì)牛糞中微生物含量的影響

乳酸菌和大腸桿菌均為動(dòng)物體內(nèi)的正常菌群，當(dāng)大腸桿菌成為優(yōu)勢(shì)菌群時(shí)會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體疾病的發(fā)生，而乳酸菌對(duì)動(dòng)物機(jī)體則有明顯的防御和保護(hù)作用，它能通過(guò)產(chǎn)生乳酸降低腸道pH值，阻止病原菌在腸道上的定殖，還可以產(chǎn)生天然抗生素，對(duì)腸道致病菌有明顯的抑制和殺滅作用[10]。李維炯等[11]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加EM能顯著降低生長(zhǎng)育肥豬糞便中pH及沙門(mén)氏菌含量，提高乳酸菌含量，但對(duì)大腸桿菌并無(wú)顯著影響。元娜等[12]研究報(bào)道，添加復(fù)合微生態(tài)制劑能顯著提高蛋種雞盲腸乳酸菌含量，降低大腸桿菌含量和雞舍氨氣濃度。從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，飼喂益生菌并未對(duì)奶牛腸道中大腸桿菌及總需氧菌含量產(chǎn)生明顯影響，但卻顯著地提高了乳酸菌含量，其原因可能是飼喂益生菌能激活奶牛瘤胃微生物的活性，增強(qiáng)有益微生物的繁殖速度，使得瘤胃菌群發(fā)生變化，從而提高了流入腸道的有益菌數(shù)量，進(jìn)而對(duì)動(dòng)物腸道微生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生一定的調(diào)節(jié)作用[13]。同時(shí)，乳酸菌大量增殖導(dǎo)致排泄物中pH的降低也會(huì)對(duì)氨氣釋放產(chǎn)生抑制作用。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂復(fù)合益生菌能顯著降低牛糞中氨氣的產(chǎn)生，提高乳酸菌含量，說(shuō)明益生菌可改善空氣環(huán)境質(zhì)量，調(diào)節(jié)奶牛腸道微生態(tài)環(huán)境。

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Effect of Complex Probiotics on Ammonia Production and Microorganisms in Cattle Manure

FU Xiao-zheng, SHI Bin-lin*, LI Ti-yu, TIAN Li-xin, ZHAO Qi-long, ZHANG Peng-fei, YUE Yuan-xi

(CollegeofAnimalScience，InnerMongoliaAgriculturalUniversity，Hohhot，InnerMongolia010018，China)

To research the impact of complex probiotics feeding on ammonia production and microorganisms in cattle manure，18 Holstein cows with similar parity, weight, stage of lactation and milk yield were chosen for a 60d matched-paris design and divided into the control group, groups with low daily dose of 50 mL probiotics and higher daily dose of100 mL probiotics. The results showed that probiotics treatment groups significantly reduced the ammonia production in the manure during the whole experiment period (P<0.05). In addition, lactobacillus content in low dose group and higher dose group were higher than the control group on day 30 (P<0.01), and lactobacillus content in low dose group was significantly higher than the control group when experiment ended (P<0.05). The results suggested that complex probiotics can adjust the intestinal micro ecologic environment of cows, and reduce the ammonia production in cow manure and improve the air quality.

probiotics; ammonia; microorganism; cattle manure

2014-04-23，

2014-11-26

農(nóng)牧交錯(cuò)區(qū)生態(tài)型現(xiàn)代奶業(yè)生產(chǎn)模式研究與示范(2012BAD12B09-3)

付曉政(1988-)，男，山東昌邑人，碩士研究生，研究方向：動(dòng)物環(huán)境與營(yíng)養(yǎng)。E-mail: fuxiaozheng168@163.com

*[通訊作者] 史彬林(1964-)，男，內(nèi)蒙古和林格爾人，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：動(dòng)物環(huán)境與營(yíng)養(yǎng)。E-mail: shibinlin@aliyun.com

S811.6

A

1005-5228(2015)01-0046-04