曹欣然 鄒宗峰 田明英

山東省煙臺市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心植保站·264008

寡雄腐霉防治蘋果樹腐爛病試驗

曹欣然 鄒宗峰 田明英

山東省煙臺市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心植保站·264008

蘋果樹腐爛病是果園的重要病害，危害主枝、主干，導(dǎo)致死枝、死樹，嚴重時導(dǎo)致毀園。防治腐爛病通常在早春將病斑刮除，然后涂抹藥劑，其中使用最多的是福美胂,其他有松焦油、腐植酸、腐植酸銅、過氧乙酸等。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)防治腐爛病的用藥比較混亂，一些常用藥劑在無公害果園生產(chǎn)中已被禁用。因此,迫切需要開發(fā)篩選出一種既能防治蘋果樹腐爛病,且安全、無毒、有效的新型農(nóng)藥來取代。

寡雄腐霉是一種廣譜微生物殺菌劑，和化學藥品、傳統(tǒng)生物制劑相比，無論對農(nóng)作物還是對人體、生態(tài)環(huán)境都相對安全，同時可作用于作物的不同生育期，不產(chǎn)生抗性。該殺菌劑是自然界中存在的一種攻擊性很強的寄生真菌，能在多種農(nóng)作物根圍定殖，不會對作物產(chǎn)生致病作用，能抑制或殺死其它致病真菌和土傳病原菌，同時可以誘導(dǎo)植物產(chǎn)生防衛(wèi)反應(yīng)，從而減少病原菌的入侵。

本研究選用不同濃度的寡雄腐霉藥液,對蘋果樹腐爛病的抑菌作用進行毒力測定，同時根據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果進行田間藥效試驗,旨在為大面積推廣使用該藥劑提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試藥劑

寡雄腐霉孢子粉（多里維生），北京比奧瑞生物科技有限公司；4.5%腐殖·硫酸銅水劑（腐迪），96.6%甲基硫菌靈原藥，煙臺綠云生物化學有限公司。

1.2 供試菌種

供試菌種由青島農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學與植保學院植病室分離自蘋果樹腐爛病的樹皮。

1.3 試驗地概況

試驗地位于煙臺招遠市金陵鎮(zhèn)大戶陳家村。樹齡20～25年，栽培密度為3 m×4 m，果園管理粗放，蘋果樹腐爛病發(fā)生較嚴重，所有試驗小區(qū)的栽培管理條件均勻一致。

1.4 試驗方法

1.4.1 室內(nèi)毒力測定采用生長速率法,用萬分之一電子天平分別稱取寡雄腐霉孢子粉50 mg,用10 mL滅菌水制備成5 000 μg/mL孢子懸浮液,分別按二倍法逐步進行稀釋,得到寡雄腐霉5 000 μg/mL、500 μg/mL、50 μg/mL和5 μg/mL的藥液；稱取96.6%甲基硫菌靈原藥51.7 mg和4.5%腐殖·硫酸銅水劑1.1 g,制備成5 000 μg/mL母液，二倍法稀釋后得到5 000 μg/mL和500 μg/mL的藥液。

在無菌操作條件下，把配置好寡雄腐霉母液用冷卻到30℃左右的PDA培養(yǎng)基稀釋成50 μg/mL、5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.05 μg/mL、0.025 μg/mL和0.01 μg/mL的系列濃度的含毒培養(yǎng)基平板；把配置好的甲基硫菌靈母液用PDA培養(yǎng)基稀釋成50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL和0.5 μg/mL的系列濃度的含毒培養(yǎng)基平板；把配置好的腐殖·硫酸銅母液用PDA培養(yǎng)基稀釋成50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2.5 μg/mL和1 μg/mL的系列濃度的含毒培養(yǎng)基平板。設(shè)不含藥劑處理的空白對照，各處理重復(fù)4次。

接種蘋果腐爛病菌,在26℃恒溫箱中培養(yǎng)36 h后,十字法交叉測量各皿菌落直徑,然后計算不同藥液對菌絲生長的抑制,求出每個藥劑的有效中量EC50的值。

1.4.2 田間藥效試驗試驗設(shè)計按照國家標準GB/T 17980.116和117制定，共設(shè)3個處理。寡雄腐霉2 000倍,4.5%腐殖·硫酸銅水劑200～300 mL/m2，清水為對照。采用樹干涂抹法用藥。施藥前將病部刮除,將藥液涂抹于其上。每個處理重復(fù)5次,分別在A、B、C、D和E 5個小區(qū)同時進行,用紅漆標記。采用隨機排列,寡雄腐霉分別于2013年6月18日、7月29日、8月29日和9月30日用藥涂抹；腐殖硫酸銅于3月份刮治腐爛病斑后進行涂抹，2013年11月18日進行調(diào)查,計算不同小區(qū)的復(fù)發(fā)率和新生病疤增長率,統(tǒng)計防效。

試驗數(shù)據(jù)計算方法：

病疤復(fù)發(fā)率（%）=病疤累計復(fù)發(fā)病塊數(shù)÷調(diào)查病疤總塊數(shù)×100

防治效果（%）=（空白對照區(qū)病疤復(fù)發(fā)率—藥劑處理區(qū)病疤復(fù)發(fā)率）÷空白對照區(qū)病疤復(fù)發(fā)率×100

平均每株新病塊數(shù)（塊/株）＝新病塊數(shù)÷調(diào)查總株數(shù)

新增病塊增長率（%）＝（藥后每株病塊數(shù)－藥前每株病塊數(shù)）÷藥前每株病塊數(shù)×100

防治效果（%）＝〔1－（對照區(qū)藥前新增病塊增長率×處理區(qū)藥后新增病塊增長率）÷（對照區(qū)藥后新增病塊增長率×處理區(qū)藥前新增病塊增長率）〕×100

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定

由表1可以看出，寡雄腐霉在50 μg/mL、5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.05 μg/mL、0.025 μg/mL和0.01 μg/mL的濃度時，抑菌率分別為86.31%、79.23%、64.32%、56.11%、53.32%和42.25%，其有效中量濃度EC50為0.02 μg/mL。甲基硫菌靈在50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL和0.5 μg/mL濃度時,其抑菌率分別為82.52%、65.77%、51.42%、44.17%、22.19%和10.21%，其有效中量濃度EC50為8.03 μg/mL。腐殖·硫酸銅水劑在50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2.5 μg/mL和1 μg/mL濃度時,其抑菌率分別為85.23%、69.65%、57.09%、36.16%、23.60%、11.05%，其有效中量濃度EC50為8.50 μg/mL。寡雄腐霉有效中量濃度EC50低于甲基硫菌靈的有效中量濃度EC50401倍,低于腐殖硫酸銅水劑有效中量濃度EC50425倍。

表1 不同藥劑防治蘋果樹腐爛病的毒力測定結(jié)果

2.2 田間藥效試驗

通過田間藥效對比試驗(表2、3)表明,寡雄腐霉涂治后的病疤復(fù)發(fā)率為10.14%，4.5%腐殖·硫酸銅水劑涂治后的病疤復(fù)發(fā)率為14.61%，空白對照為65%；寡雄腐霉病疤復(fù)發(fā)防效達到84.40%，4.5%腐殖·硫酸銅水劑防效77.53%，寡雄腐霉的病疤復(fù)發(fā)防效是4.5%腐殖·硫酸銅水劑的1.10倍，差異性顯著。寡雄腐霉處理后的新生病疤增長率較低,為5.92%,而4.5%腐殖·硫酸銅水劑為8.94%,清水對照為40.0%；寡雄腐霉防治新生病疤的防效為84.31%，4.5%腐殖·硫酸銅水劑防效為74.67%，寡雄腐霉的病疤復(fù)發(fā)防效是4.5%腐殖·硫酸銅水劑的1.13倍，差異性顯著。

表2 藥劑防治蘋果腐爛病病疤復(fù)發(fā)結(jié)果

表3 藥劑防治蘋果腐爛病新生病疤結(jié)果

3 結(jié)論與討論

通過初步研究表明,寡雄腐霉2 000倍防治蘋果樹腐爛病病疤復(fù)發(fā)防治效果為84.40%，明顯優(yōu)于對照藥劑4.5%的腐殖硫酸銅水劑(防治效果為77.53%)。同時，防治腐爛病新生病疤防效上，寡雄腐霉2 000倍的防效為84.31%，防效顯著。該藥劑是生物源農(nóng)藥，對環(huán)境無不良影響，符合綠色果品生產(chǎn)要求，在生產(chǎn)上普遍應(yīng)用后,對控制蘋果樹腐爛病的危害及進一步提高防治水平有重要意義。

煙臺市矮化蘋果園有害生物綜合防控關(guān)鍵技術(shù)集成與應(yīng)用2012NC233