汪 旭，蔡小平，李宏喜

（甘肅省清水縣畜牧獸醫(yī)局，甘肅 清水 741400）

禽流感（AI）是由A型流感病毒引起多種家禽及野鳥(niǎo)的一種高度接觸性傳染病，雞體免疫抗體監(jiān)測(cè)是了解疫苗免疫狀況的最有效方法。通過(guò)分析檢測(cè)結(jié)果，可以適時(shí)指導(dǎo)防疫工作。我們應(yīng)用血清學(xué)方法對(duì)清水縣18 鄉(xiāng)鎮(zhèn)健康雞血清進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)資料進(jìn)行分析，以供清水縣防疫工作參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源 清水縣18 鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)采集的健康雞血清樣品255 份（在-20 ℃儲(chǔ)存）。

1.2 試劑 等滲PBS緩沖液（0.1 mol/L，pH 值7.0～7.2）；阿氏（Alsevr′s）液；禽流感H5 HI 血清以及陰性血清；禽流感H5 HI 抗原；3 只SPF 雞的紅細(xì)胞（1%RBC）。

1.3 試驗(yàn)方法 首先，對(duì)255 份雞血清樣品進(jìn)行滅活，然后制備成雞紅細(xì)胞懸液。接著，以高致病性禽流感診斷技術(shù)為依據(jù)進(jìn)行抗原標(biāo)定。最后，進(jìn)行血凝抑制（HI）試驗(yàn)，以《高致病性禽流感診斷技術(shù)》為依據(jù)進(jìn)行操作[2]（見(jiàn)表1）。

表1 血凝抑制試驗(yàn)操作術(shù)式 單位：μL

2 結(jié)果

H5 亞型抗原標(biāo)定的血凝價(jià)為210，應(yīng)用于血凝抑制（HI）試驗(yàn)的4 個(gè)血凝單位抗原的稀釋倍數(shù)為28。清水縣18 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)雞禽流感抗體的血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果如表2。

在檢測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果中，清水縣雞禽流感H5 亞型HI 最高抗體滴度為28；HI 最低抗體滴度為23。全縣總體血清抗體陽(yáng)性率為79.8%，其中血清抗體陽(yáng)性率最高是紅堡、白沙兩鎮(zhèn)，陽(yáng)性率高達(dá)100%；陽(yáng)性率較低的是松樹(shù)鄉(xiāng)和豐望鄉(xiāng)，陽(yáng)性率分別是66.67%和68.42%；根據(jù)農(nóng)業(yè)部《高致病性禽流感和口蹄疫等重大動(dòng)物疫病免疫方案》的相關(guān)規(guī)定，HI 抗體效價(jià)≥25，且存欄禽群免疫抗體合格率必須≥70%判定為合格[5]，清水縣18 鄉(xiāng)鎮(zhèn)中有16 個(gè)其雞禽流感H5 亞型疫苗的免疫合格，有豐旺、松樹(shù)等2 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，清水縣禽流感血清抗體陽(yáng)性率具體分布見(jiàn)圖1。

表2 2013年清水縣18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)禽流感抗體血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

圖1 清水縣18鄉(xiāng)鎮(zhèn)血凝抑制試驗(yàn)（H I）血清抗體陽(yáng)性率分布

3 分析與討論

3.1 抗體效價(jià) 從總體監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)看，清水縣的禽流感免疫抗體效價(jià)及抗體水平總體較高，保持在70%～100%左右，基本達(dá)到農(nóng)業(yè)部《高致病性禽流感和口蹄疫等重大動(dòng)物疫病免疫方案》中規(guī)定的禽流感HI 抗體效價(jià)≥25判定為合格的，且合格率大于等于70%的總體要求[5]。說(shuō)明清水縣家禽禽流感強(qiáng)制免疫密度大，效果較好。2012 年以來(lái)，雖然清水縣周邊省市曾暴發(fā)禽流感疫情，而本地家禽飼養(yǎng)量大、交易頻繁，又是候鳥(niǎo)遷徙之地[6]，但發(fā)生禽流感疫情的幾率少之又少，更說(shuō)明了免疫工作對(duì)于預(yù)防禽流感疫情的極端重要性。

3.2 季節(jié)對(duì)禽流感免疫抗體水平的影響 不同季節(jié)的家禽流感免疫抗體水平存在規(guī)律性的波動(dòng)，總體合格率在冬春季節(jié)較高。這是因?yàn)槎杭竟?jié)是禽流感的高發(fā)期，但在此期間，清水廣大養(yǎng)禽戶的免疫意識(shí)普遍增強(qiáng)，進(jìn)行了密度大、覆蓋面廣的免疫工作，有力的防范了疫病的流行。

3.3 養(yǎng)殖管理水平對(duì)禽流感免疫抗體水平的影響 散養(yǎng)場(chǎng)的抗體檢測(cè)合格率普遍低于規(guī)模場(chǎng)。這是由于散養(yǎng)戶防疫意識(shí)相對(duì)較差，又容易受市場(chǎng)波動(dòng)的影響，一旦獸醫(yī)管理部門督促不到位，在免疫注射、防疫消毒等工作就會(huì)存在漏洞。因此，一方面需要養(yǎng)殖戶進(jìn)一步認(rèn)識(shí)，另一方面需要獸醫(yī)管理部門加大監(jiān)管和督促工作力度。

對(duì)清水縣18 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)255 份雞血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)（HI），H5 亞型禽流感病毒總體陽(yáng)性率較高，抗體滴度也較高，且各鄉(xiāng)鎮(zhèn)春季動(dòng)物關(guān)于禽流感的防疫工作都搞得比較扎實(shí)?？沙醪酵茢嘣摰貐^(qū)大多數(shù)家禽對(duì)禽流感H5 亞型病毒可以產(chǎn)生較強(qiáng)的保護(hù)抗體。但是仍然有部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)抗體陽(yáng)性率較低，其原因可能是由于抽樣的雞中有補(bǔ)欄禽，還未進(jìn)行禽流感疫苗的免疫，或禽流感疫苗首免過(guò)程中沒(méi)有及時(shí)形成抗體，這對(duì)禽流感的防治存在很大的隱患。因此，對(duì)補(bǔ)欄禽的補(bǔ)針免疫工作要盡快進(jìn)行，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)政府和鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站以及村防疫員要有高度的責(zé)任心，及時(shí)做好補(bǔ)欄禽的補(bǔ)針免疫工作。

[1]蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M].4 版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006：169-173，304-310.

[2]趙榮樂(lè)，鄭光宇.禽流感病毒研究進(jìn)展[J].生物學(xué)通報(bào)，2004，4:1-2.

[3]GB/T 18936-2003《高致病性禽流感診斷技術(shù)》[S].

[4]蔡劍平，肖堯，周曉陽(yáng)，等.禽流感病毒的生物學(xué)特性及其實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（3）：232-234.

[5]李秀英，禽流感疫苗HI 抗體的免疫力監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2006，42（2）：32-33.

[6]馬洪雨，徐玲，邵明旭.禽流感及其防治[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2004（03）：197-200.