趙亞娜 馮小歡 馮 芹 劉雅莉 封昱辰 張 煦

(1蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；2蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，蘭州 730000)

·調(diào)查·

骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告現(xiàn)狀研究

趙亞娜1馮小歡2馮 芹2劉雅莉1封昱辰2張 煦1

(1蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；2蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，蘭州 730000)

目的 評(píng)價(jià)有關(guān)骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的報(bào)告質(zhì)量。方法 計(jì)算機(jī)檢索中國(guó)知網(wǎng)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)、維普及萬(wàn)方數(shù)據(jù)4大中文數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索時(shí)限均從2010年1月至2012年12月，檢索文獻(xiàn)語(yǔ)言為中文，納入關(guān)于骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究文獻(xiàn)，再根據(jù)ARRIVE指南評(píng)估每一篇文獻(xiàn)，最后用SPSS軟件對(duì)評(píng)估所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 最終納入符合標(biāo)準(zhǔn)的骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)有71篇，每一篇文獻(xiàn)的平均得分為(21.08±2.12)分，納入文獻(xiàn)報(bào)告質(zhì)量普遍中等偏低。結(jié)論 我國(guó)骨腫瘤的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量總體來(lái)說(shuō)很不理想，存在嚴(yán)重的潛在偏倚現(xiàn)象，未來(lái)的研究中應(yīng)重視規(guī)范動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)及報(bào)告，以確保研究質(zhì)量。

骨腫瘤；動(dòng)物研究；報(bào)告

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是連接基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)的重要橋梁[1]，動(dòng)物研究報(bào)告存在不充分和不完整現(xiàn)象，阻礙動(dòng)物實(shí)驗(yàn)被科學(xué)的利用[2]。有學(xué)者對(duì)胃癌、肺癌、神經(jīng)系統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估，提示報(bào)告存在諸多不規(guī)范。為了促進(jìn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量進(jìn)一步提高，國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3R中心(the national centre for the replacement，refinement and reduction of animals in research，NC3Rs)基于 CONSORT聲明[3]開(kāi)發(fā)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告指南(animal research：reporting：in vivo experiments guidelines，ARRIVE指南)，于2010年發(fā)表，包括題目、摘要、引言、方法、結(jié)果和討論6部分，共20個(gè)條目及其細(xì)則[4-8]。

骨腫瘤是發(fā)生于骨骼系統(tǒng)的腫瘤，分為原發(fā)性骨腫瘤和轉(zhuǎn)移性骨腫瘤，在我國(guó)原發(fā)性骨腫瘤的發(fā)生率為2～3人/10萬(wàn)人，大約占全部腫瘤的2%，男、女發(fā)病率之比為(1.5～2)∶1[9]。本研究旨在客觀分析國(guó)內(nèi)期刊發(fā)表骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告存在的問(wèn)題，提出解決思路。

1 資料與方法

1．1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 1)研究對(duì)象：鼠(包括大鼠，小鼠，裸鼠等)；2)研究疾病：骨腫瘤領(lǐng)域原始研究；3)研究類型：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 1)研究對(duì)象應(yīng)用的是處死動(dòng)物的組織；2)未涉及實(shí)驗(yàn)過(guò)程、技術(shù)和方法；3)綜述類研究；4)基因類研究；5)沒(méi)有報(bào)告任何研究方法信息的動(dòng)物研究；6)骨轉(zhuǎn)移癌類的研究。

1．2 文獻(xiàn)檢索

系統(tǒng)檢索中國(guó)知網(wǎng)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)、維普及萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)。檢索時(shí)間自2010年1月至2012年12月，檢索文獻(xiàn)語(yǔ)言為中文。主要檢索詞包括相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和研究領(lǐng)域的主要檢索詞：鼠、動(dòng)物、體內(nèi)，骨腫瘤、骨瘤、骨癌，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)試驗(yàn)、在體試驗(yàn)、基礎(chǔ)研究。

1.3 文獻(xiàn)篩選

2位評(píng)價(jià)員(馮芹和馮小歡)獨(dú)立閱讀所獲文獻(xiàn)文題和摘要，在排除明顯不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的研究后，對(duì)可能符合納入標(biāo)準(zhǔn)的研究閱讀全文，以確定是否真正符合納入標(biāo)準(zhǔn)，并交叉核對(duì)納入文獻(xiàn)，對(duì)有分歧者通過(guò)討論達(dá)成共識(shí)，必要時(shí)聽(tīng)取第3位研究者的意見(jiàn)。

1.4 資料提取

由2名評(píng)價(jià)員通過(guò)閱讀全文，采用Excel 2003軟件制定統(tǒng)一數(shù)據(jù)提取表提取數(shù)據(jù)，而后交叉核對(duì)，如遇分歧討論解決或聽(tīng)取第3位研究者的意見(jiàn)。提取資料主要為研究的基本情況(如發(fā)表期刊、發(fā)表年限、研究設(shè)計(jì)類型、基金支持等方面)。

1.5 質(zhì)量評(píng)價(jià)

2位評(píng)價(jià)員(馮芹和馮小歡)根據(jù)ARRIVE指南中各個(gè)條目獨(dú)立評(píng)價(jià)納入文獻(xiàn)質(zhì)量，包括題目、摘要、引言、方法、結(jié)果和討論6部分，共20個(gè)條目及其近40項(xiàng)細(xì)則，評(píng)估內(nèi)容涉及動(dòng)物的數(shù)量和特點(diǎn)(包括種類、品系、雌雄和遺傳背景)，飼養(yǎng)場(chǎng)所和飼養(yǎng)，所采用的實(shí)驗(yàn)方法，統(tǒng)計(jì)方法和分析方法(包括使用隨機(jī)和盲法來(lái)減少偏倚)等，并對(duì)每個(gè)條目?jī)?nèi)容進(jìn)行了簡(jiǎn)要解釋，每一條目回答“是”為1分，回答“否”為0分，滿分為39分。

1.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果

中國(guó)知網(wǎng)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)、維普、萬(wàn)方中最初共檢選出2750篇文章，通過(guò)EndNote軟件瀏覽題錄和摘要后排除重復(fù)的、不相關(guān)的文章2564篇，剩余186篇，通過(guò)閱讀全文進(jìn)行復(fù)篩，排除因數(shù)據(jù)不全，綜述類、基因類及轉(zhuǎn)移瘤類的文獻(xiàn)115篇，最終71篇文獻(xiàn)被納入。

2.2 納入研究基本信息(表1)

3年納入研究的篇數(shù)，研究是否為隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)(RCT)及是否有基金支持的情況如下。

表1 納入研究的基本信息(n，%)

2.3 納入研究的報(bào)告質(zhì)量評(píng)價(jià)(表2)

2.3.1 前言部分 背景內(nèi)容部分沒(méi)有一篇解釋所用動(dòng)物種類和模型的選擇依據(jù)，闡述科學(xué)目的、 適用范圍，該研究與人體生物學(xué)的關(guān)聯(lián)程度。

2.3.2 方法學(xué)部分 71篇研究中僅8篇(11.27%)提供了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查的相關(guān)證書(shū)及與研究相關(guān)的國(guó)家或機(jī)構(gòu)的動(dòng)物護(hù)理和使用指南；實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)部分，對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)，給出簡(jiǎn)明扼要的研究設(shè)計(jì)詳細(xì)信息。但沒(méi)有一篇研究用時(shí)線圖或流程圖來(lái)解釋復(fù)雜的研究設(shè)計(jì)是如何實(shí)施的；實(shí)驗(yàn)步驟部分，只有33篇(46.48%)交代了實(shí)驗(yàn)的具體地點(diǎn)(飼養(yǎng)籠，實(shí)驗(yàn)室，水迷宮)，沒(méi)有一篇說(shuō)明特定麻醉藥的選擇緣由及給藥途徑，藥物劑量的選擇原因；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部分，僅有2篇(2.82%)提及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的待遇，即實(shí)驗(yàn)前、中和后期相關(guān)動(dòng)物福利評(píng)估和干預(yù)；只有1篇提到了獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)(1.41%)；有15篇(21.13%)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行了隨機(jī)化分組，只有1篇(1.41%)在實(shí)驗(yàn)中使用了盲法；統(tǒng)計(jì)學(xué)處理部分，僅有5篇(7.04%)進(jìn)行了假設(shè)檢驗(yàn)，即描述用來(lái)評(píng)估數(shù)據(jù)是否符合統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所要求的分布，及所采用的任何方法。

2.3.3 結(jié)果部分 僅14篇(19.72%)提供了完整的基線數(shù)據(jù)，即對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)組，報(bào)告治療或測(cè)試前動(dòng)物的有關(guān)特征和健康狀況(如體重、微生物狀況和藥物測(cè)試)，以表格形式表示；有13篇(18.31%)對(duì)實(shí)驗(yàn)失訪動(dòng)物進(jìn)行了描述；沒(méi)有一篇文獻(xiàn)提到結(jié)果中的不良反應(yīng)。

表2 納入研究的ARRIVE評(píng)價(jià)報(bào)告信息

2.3.4 結(jié)論部分 只有12篇(16.9%)在結(jié)論中評(píng)價(jià)了研究的局限性，包括任何潛在的偏倚來(lái)源，動(dòng)物模型的局限性以及與結(jié)果相關(guān)的不精確性；沒(méi)有一篇描述該研究方法或研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于替代、優(yōu)化或減少動(dòng)物使用(3R原則)的意義；僅有15篇(21.13%)評(píng)論了是否或如何使本研究成果轉(zhuǎn)化到其他物種或系統(tǒng)，包括與人體生物學(xué)相關(guān)的研究。

3 討論

在我國(guó),原發(fā)性骨與軟組織腫瘤約占全身腫瘤的2%～3%,其中1/3是惡性骨腫瘤[10]，尤其骨肉瘤由于其惡性程度高,轉(zhuǎn)移發(fā)生早,因而其致殘率及死亡率位于骨腫瘤之首[11]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)仍是骨腫瘤研究能夠應(yīng)用于臨床的重要橋梁。

國(guó)外已有針對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量的評(píng)估報(bào)告[12-16]，結(jié)果提示：大多數(shù)生物期刊未能完整提供如何描述動(dòng)物研究的信息。ARRIVE指南基于CONSORT聲明[17]制定。本研究根據(jù)ARRIVE指南中各個(gè)條目獨(dú)立評(píng)價(jià)納入文獻(xiàn)質(zhì)量。本文共收集2010年1月至2012年12月中文期刊發(fā)表的骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究71篇。結(jié)果顯示：從發(fā)表時(shí)間看，3年間的ARRIVE評(píng)價(jià)得分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的報(bào)告質(zhì)量普遍中等偏低，尤其在方法學(xué)部分，進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作過(guò)程沒(méi)有具體詳細(xì)地說(shuō)明，如實(shí)驗(yàn)的隨機(jī)化分組及盲法的應(yīng)用是減少偏倚，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性的關(guān)鍵因素。本研究中只有15篇(21.13%)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行了隨機(jī)化分組，僅有1篇(1.41%)在實(shí)驗(yàn)中使用了盲法；還有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的失訪情況及不良反應(yīng)，對(duì)整篇研究的最終結(jié)果也會(huì)產(chǎn)生一定影響，而研究發(fā)現(xiàn)僅有13篇(18.31%)對(duì)實(shí)驗(yàn)失訪動(dòng)物進(jìn)行了描述；沒(méi)有一篇文獻(xiàn)提到結(jié)果中的不良反應(yīng)；同時(shí)我們還發(fā)現(xiàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析不夠嚴(yán)謹(jǐn)，僅有5篇(7.04%)進(jìn)行了假設(shè)檢驗(yàn)。

本研究存在以下幾點(diǎn)局限性，如樣本量不夠大，樣本來(lái)源范圍有限以及評(píng)價(jià)員進(jìn)行ARRIVE評(píng)價(jià)時(shí)存在一定的主觀偏倚等。

綜上所述，我國(guó)骨腫瘤的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告質(zhì)量總體中等偏低。研究者們應(yīng)遵循ARRIVE指南的標(biāo)準(zhǔn)，提高動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)、實(shí)施、報(bào)告質(zhì)量以及對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的鑒別能力，評(píng)估水平，這樣骨腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究成果才能有效地應(yīng)用于臨床，從而推動(dòng)骨腫瘤研究更進(jìn)一步地深入。

[1] 楊克虎．系統(tǒng)評(píng)價(jià)指導(dǎo)手冊(cè)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2010.

[2] Guidelines ARRIVE to improve reporting of animal experiments.[OL].http://www.nc3rs.org.uk/news.asp?id=1356.

[3] Begg C，Cho M，Eastwood S，et al．Improving the quality of reporting of randomized controlled trials． The CONSORT statement[J]．JAMA，1996，276(8)：637-639.

[4] Kilkenny C，Browne W J，Cuthill I C，et al． Improving bioscience research reporting： The ARRIVE guidelines for reporting animal research[J]．PLoS Biol，2010，8(6)：1000412.

[5] Kilkenny C,Browne W J,Cuthill I C,et al.Improving bioscience research reporting:the ARRIVE guidelines for reporting animal research[J].Steoarthritis Cartilage，2012，20(4):256-260.

[6] Kilkenny C,Browne W J,Cuthi I,et al.Improving bioscience research reporting:the ARRIVE guidelines for reporting animal research[J].Vet Clin Pathol，2012，41(1):27-31.

[7] Kilkenny C,Browne W J,Cuthill I C,et al.Improving bioscience research reporting:The ARRIVE guidelines for reporting animal research[J].J Pharmacol Pharmacother，2010，1(2):94-99.

[8] 梁陽(yáng)，焦鑫，丁睿，等.淺析骨腫瘤病人的術(shù)后護(hù)理[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2014,14(6):284.

[9] 劉雅莉,張鵬,賀萬(wàn)斌,等.提高動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量促進(jìn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評(píng)價(jià)發(fā)展[J].中國(guó)循證兒科雜志,2011,6(3):233-236.

[10] 王慶，徐榮明.骨與軟組織惡性腫瘤綜合治療進(jìn)展[J].中國(guó)骨傷,2005，18(8)：509-512.

[11] 鄧朝暉.骨肉瘤的細(xì)胞分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J].職業(yè)衛(wèi)生與病傷，2002，17(1)：43-44.

[12] Drummond G B.Reporting ethical matters in the Journal of Physiology:standards and advice[J].The Journal of physiology，2009,587(4):713-719.

[13] Osborne N J,Payne D,Newman M L.Journal editorial policies,animal welfare,and the 3Rs[J].The American Journal of Bioethics，2009,9(12):55-59.

[14] Wurbel H.Publications should include an animal-welfare section[J].Nature，2007,446(7133):257.

[15] Alfaro V.Specification of laboratory animal use in scientific articles:Current low detail in the journal’s instructions for authors and some proposals[J].Methods Find Exp Clin Pharmacol，2005,27(7):495-502.

[16] Kilkenny C,Parsons N,Kadyszewski E,et al.Survey of the quality of experimental design,statistical analysis and reporting of research using animals[J].PLoS One，2009,4(11):e7824.

[17] Schulz K F，Ahman D G，Moher D，et al．CONSORT 2010 statement：updated guidelines for reporting parallel group randomised trials[J]．BMJ，2010，340：332.

The Study of the Report about Bone Tumor in Animal Experiment

ZHAOYana，F(xiàn)ENGXiaohuan，F(xiàn)ENGQin,LIUYali,FENGYuchen,ZHANGXu

(Basic Medical College of Lanzhou University, Lanzhou 730000, China)

ObjectiveTo evaluate the quality of the report about bone tumors in animal experiments.MethodsThe articles were searched about bone tumors in animal experiments at the four largest Chinese Journal database: CBM, CNKI, CBM, Wanfang from Jan. 2010 to Dec. 2012, and the language was Chinese. Each article was evaluated with ARRIVE guideline. Finally, the data acquired in the evaluation was statistically analysed with SPSS.ResultsThere were 71 articles about bone tumors in animal experiments that met the criteria mentioned before. ARRIVE guideline was applied to evaluate those articles. Average score of the articles was 21.08±2.12. The qualities of the articles in the present work was generally middle or slightly low.ConclusionGenerally, the quality of the report about bone tumor in animal experiment is quite undesirable with severe potential bias. In further studies, more attention should be paid to the design and report of animal experiments in order to guarantee the quality of the study.

Bone tumor; Animal experiment; Report

10.3969/j.issn.1000-9760.2015.01.016

R73-31

A

1000-9760(2015)02-057-05

2015-01-16)