吳冬霞 蕭 鯤 許浦生

(1清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院防控科，廣東 清遠(yuǎn) 511500；2廣州惠愛醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房，廣東 廣州 510000；3廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院呼吸科, 廣東 廣州 510000)

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·論著·

HMGB1和sRAGE在肺功能正常吸煙者中的表達(dá)及其臨床意義

吳冬霞1蕭 鯤2許浦生3*

(1清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院防控科，廣東 清遠(yuǎn) 511500；2廣州惠愛醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房，廣東 廣州 510000；3廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院呼吸科, 廣東 廣州 510000)

目的:觀察肺功能正常吸煙者血清HMGB1和sRAGE的表達(dá)及個(gè)體差異性對(duì)其表達(dá)的影響，初步探討其臨床意義。方法：選取2013年2月- 2014年2月在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院體檢中心體檢后證實(shí)為健康者40人，其中吸煙組20人，非吸煙組20人，收集40例研究對(duì)象的一般人口學(xué)資料、肺功能狀況和血清HMGB1、sRAGE的表達(dá)水平，根據(jù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：吸煙組血清sRAGE水平低于非吸煙組；血清HMGB1與肺功能水平顯著相關(guān)，但這種相關(guān)性僅見于吸煙者；結(jié)論：吸煙者在尚無(wú)呼吸道癥狀和肺功能改變時(shí)便已出現(xiàn)血清sRAGE水平的下降；在吸煙者出現(xiàn)COPD之前，其血清HMGB1和sRAGE的表達(dá)水平可能作為肺功能評(píng)估的指標(biāo)。

HMGB1；sRAGE；肺功能正常吸煙者；臨床意義

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)是一種常見的以持續(xù)氣流受限為特征的可以預(yù)防和治療的疾病，氣流受限呈進(jìn)行性發(fā)展，與氣道和肺臟對(duì)有毒顆?；驓怏w的慢性炎性反應(yīng)增強(qiáng)有關(guān)[1]。

高遷移率族蛋白1(high mobility group protein box 1，HMGB1)是一種重要的炎癥介質(zhì)，可觸發(fā)和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，介導(dǎo)器官組織的炎癥損傷。晚期糖基化終產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation end- products，RAGE)是HMGB1的主要受體之一，而RAGE的內(nèi)源分泌型，即可溶性RAGE(soluble RAGE，sRAGE)能通過與RAGE競(jìng)爭(zhēng)同RAGE配體的結(jié)合、阻斷RAGE信號(hào)而在炎癥性疾病中起保護(hù)作用[2-4]。研究證實(shí)，吸煙COPD患者的血清HMGB1水平高于非吸煙COPD患者和非吸煙者[5]，且COPD患者血清sRAGE的表達(dá)要低于正常吸煙人群[6-7]，但尚未見肺功能正常吸煙者HMGB1和sRAGE表達(dá)水平的報(bào)道。本研究希望通過觀察、分析肺功能正常吸煙者血清HMGB1和sRAGE的表達(dá)，初步探討其臨床意義，為COPD的早期診治提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

挑選2013年2月至2014年2月在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院體檢中心體檢后證實(shí)為健康者40人，年齡在26～79歲，依據(jù)研究對(duì)象的一般生活資料調(diào)查結(jié)果，將其分為吸煙組及非吸煙組，其中吸煙組20人，男性10人，女性10人，非吸煙組20人，男性10人，女性10人。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他可影響系統(tǒng)性炎癥的疾?。喝绺腥?、冠心病、糖尿病、精神疾病、風(fēng)濕免疫性疾病、腫瘤、腎功能不全、血液系統(tǒng)疾病等；②其他可能影響肺功能和局部炎癥的疾病：如肺炎、慢性阻塞性肺疾病、支氣管哮喘、纖維增殖型肺結(jié)核、支氣管擴(kuò)張癥、近8周內(nèi)的上呼吸道感染等；③既往吸煙但現(xiàn)已戒煙者。

1.2 方法

1.2.1 一般資料收集 收集研究對(duì)象一般資料，包括年齡、性別、聯(lián)系方式、個(gè)人吸煙狀況、身高、體重等。

1.2.2 肺功能檢查 分別進(jìn)行常規(guī)肺通氣功能檢查和支氣管激發(fā)試驗(yàn)檢查，確認(rèn)研究對(duì)象肺功能正常及支氣管激發(fā)試驗(yàn)陰性后，根據(jù)研究對(duì)象的吸煙史分別將其納入“吸煙組”或“非吸煙組”。

1.2.3 血清HMGB1、sRAGE表達(dá)水平的檢測(cè) 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( ELISA )進(jìn)行測(cè)定。每個(gè)樣本取全血2 mL以3 000×g離心10min，吸出上層血清置于-20℃冰箱保存，集中檢測(cè)。操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié) 果

2.1 吸煙組與非吸煙組的對(duì)比分析

2.1.1 吸煙組與非吸煙組一般人口學(xué)資料的比較 吸煙組與非吸煙組之間在性別、年齡和BMI指數(shù)上的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 吸煙組和非吸煙組一般人口學(xué)資料的比較

2.1.2 吸煙組與非吸煙組肺功能的比較 經(jīng)正態(tài)分布檢驗(yàn)后采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，吸煙組與非吸煙組在各項(xiàng)肺功能相關(guān)指標(biāo)上的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 吸煙組和非吸煙組肺功能的比較

2.1.3 吸煙組與非吸煙組血清HMGB1、sRAGE的比較 吸煙組血清sRAGE水平低于非吸煙組(P=0.044)，吸煙組與非吸煙組在血清HMGB1水平上的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 吸煙組與非吸煙組血清HMGB1、sRAGE的比較

2.2 HMGB1、sRAGE與健康人群肺功能的相關(guān)性分析

2.2.1 HMGB1、sRAGE與健康人群肺功能的相關(guān)性分析 在控制性別、年齡、身高和體重后，健康人群血清HMGB1、sRAGE水平與肺功能相關(guān)性分析顯示，見表4：血清HMGB1水平與FEV1/FVC(r=-0.354，P=0.034)、FEF50%pre(r=-0.354，P=0.042)、FEF75%pre(r=-0.362，P=0.030)和MMEF%pre(r=-0.465，P=0.004)呈負(fù)相關(guān)；血清sRAGE水平與肺功能無(wú)明顯相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表4 HMGB1、sRAGE與健康人群肺功能的相關(guān)性分析

2.2.2 HMGB1、sRAGE與健康人群吸煙亞組肺功能的相關(guān)性分析 因吸煙人群與非吸煙人群在血清sRAGE水平上存在差異，推測(cè)其與肺功能的相關(guān)性上也可能存在差異，故分別針對(duì)吸煙組與非吸煙組進(jìn)行亞組分析。

在控制性別、年齡、身高和體重后，健康人群吸煙亞組血清HMGB1、sRAGE水平與肺功能相關(guān)性分析顯示，見表5：血清HMGB1水平與FEV1%pre(r=0.511，P=0.043)、FEV1/FVC(r=-0.616，P=0.011)、FEF25%pre(r=-0.758，P=0.001)、FEF50%pre(r=-0.692，P=0.003)、FEF75%pre(r=-0.515，P=0.041)和MMEF%pre(r=-0.758，P=0.001)呈負(fù)相關(guān)；血清sRAGE水平與肺功能無(wú)明顯相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表5 HMGB1、sRAGE與健康人群吸煙亞組肺功能的相關(guān)性分析

2.2.3 HMGB1、sRAGE與健康人群非吸煙亞組肺功能的相關(guān)性分析 在控制性別、年齡、身高和體重后，非吸煙亞組血清HMGB1與sRAGE水平均與肺功能無(wú)明顯相關(guān)性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表6。

表6 HMGB1、sRAGE與健康人群非吸煙亞組肺功能的相關(guān)性分析

3 討 論

本組前期研究[8]發(fā)現(xiàn)，對(duì)于肺功能正常的人群，可按照其肺功能特點(diǎn)將其分類，并推測(cè)機(jī)體可能存在AGEs-sRAGE等多種保護(hù)機(jī)制。因此，本研究希望分別從血清HMGB1、sRAGE在肺功能正常吸煙者與非吸煙者中表達(dá)的差異，血清HMGB1、sRAGE與肺功能的相關(guān)性此兩方面，初步探討其臨床意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，雖然吸煙組與非吸煙組在一般人口學(xué)資料、各項(xiàng)肺功能指標(biāo)和血清HMGB1水平上的對(duì)比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但吸煙組血清sRAGE水平低于非吸煙組，因此提示：①吸煙者在尚無(wú)呼吸道癥狀和肺功能改變時(shí)便可出現(xiàn)血清sRAGE水平的下降；②吸煙已證實(shí)可導(dǎo)致血清HMGB1的升高，但吸煙者sRAGE的下降可能更早于HMGB1的升高。那么，為什么本研究中吸煙組的各項(xiàng)肺功能指標(biāo)均屬正常，且與非吸煙組對(duì)比未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,筆者考慮可能原因：①煙草依賴對(duì)吸煙組的損害尚屬初期的階段，損害程度尚較輕微；②人體存在保護(hù)機(jī)制對(duì)抗損害；③血清HMGB1和血清sRAGE的水平可能并不能完全反映氣道炎癥水平，而本研究未對(duì)誘導(dǎo)痰HMGB1和誘導(dǎo)痰sRAGE的進(jìn)行觀察；④尼古丁依賴程度、吸煙指數(shù)、體育鍛煉強(qiáng)度、飲用綠茶習(xí)慣及情緒狀態(tài)等均可能影響炎癥介質(zhì)的表達(dá)；⑤人種和個(gè)體差異；⑥研究對(duì)象較少。

本研究也發(fā)現(xiàn)：吸煙者血清HMGB1與大氣道功能、小氣道功能均呈負(fù)相關(guān)，血清sRAGE水平與肺功能無(wú)明顯相關(guān)性，證實(shí)吸煙者早期即出現(xiàn)肺功能受損，而且這種肺功能的受損并未能被目前的肺功能檢查發(fā)現(xiàn)，提示吸煙者的血清HMGB1和sRAGE的表達(dá)水平對(duì)其COPD的早期診斷有獨(dú)特的意義，可能更優(yōu)于常規(guī)的肺功能檢查，可能作為評(píng)估肺功能早期受損的指標(biāo)。

然而，本研究尚存在一定的不足，如：對(duì)于研究對(duì)象的誘導(dǎo)痰HMGB1和sRAGE的水平未進(jìn)行觀察；而且，有學(xué)者提出sRAGE不能反應(yīng)COPD的嚴(yán)重程度的觀點(diǎn)，但也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)sRAGE與COPD患者的FEV1和FEV1/FVC相關(guān)[9]；為何會(huì)有相反的觀點(diǎn)，本組認(rèn)為這與研究對(duì)象的個(gè)體差異有關(guān)，即不同的人群對(duì)吸煙的反應(yīng)性不一，這需要本組進(jìn)一步探索。本組將沿著本研究的方向繼續(xù)深化，以期為COPD的早期診治提供科學(xué)依據(jù)。

[1] Vestbo J, Hurd SS, Agustí AG, et al. Global strategy for the diagnosis, management, and prevention of chronic obstructivepulmonary disease:GOLD executive summary[J]. Am J Respir Crit Care Med,2013,187(4):347-365.

[2] 紀(jì)子梅,梅曉冬.慢性阻塞性肺疾病患者血清高遷移率族蛋白B1和纖維蛋白原的檢測(cè)及意義[J]. 廣東醫(yī)學(xué), 2012,33(7):990-991.

[3] Klune JR, Dhupar R, Cardinal J, et al. HMGB1:Endogenous danger signaling[J]. J Mol Med, 2008,14(6):476-484.

[4] Yonekura H, Yamamoto Y, Sakurai S, et a1. Novel splice variants of the receptor for advanced glycation end-products expressed in human vascular endothelial cells and pericytes，and their putative roles in diabetes-induced vascular injury[J]. Biochem J, 2003,370 (Pt 3):1097-1109.

[5] Upham JW, Smith DJ, Yerkovich ST. Does RAGE protect smokers from COPD [J]. Eur Respir J, 2011,38(3):743-748.

[6] Park L, Raman K G, Lee K J, et al. Suppression of accelerated diabetic atherosclerosis by the soluble receptor for advanced glycation endproducts[J]. Nature medicine, 1998, 4(9):1025-1031.

[7] Goova MT, Li J, Kislinger T, et al. Blockade of receptor for advanced glycation end-products restores effective wound healing in diabetic mice[J]. The American journal of pathology, 2001, 159(2):513-525.

[8] 蕭 鯤, 許浦生. 肺功能正常人群吸煙狀況和氣道炎性因子表達(dá)譜的探索[J]. 廣州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2014,42(5):46-53.

[9] Iwamoto H, Gao J, Pulkkinen V, et al. Soluble receptor for advanced glycation end-products and progression of airway disease[J]. BMC Pulmonary Medicine, 2014, 14(4):1-7.

(本文編輯:歐陽(yáng)菁)

Expression and clinical significance of HMGB1 and sRAGE in smokers with normal lung function

WuDongxia1,XiaoKun2,XuPusheng3

(1DepartmentofDiseaseControlandPrevention,QingyuanMunicipalPeople′sHospital,Qingyuan,Guangdong511500;2ICU,GuangzhouHuiaiHospital,Guangzhou510000;3DepartmentofRespiratoryMedicine,SecondAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou510000,China)

Objective:To observe the expression levels of serum HMGB1 and sRAGE in smokers with normal lung function and the influence of individual differences in the expression levels, and to investigate its clinical significance.Methods:Forty healthy subjects who received workup in the Health Examination Center, Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University between February 2013 and February 2014 were included in the study, and divided into the smoking group and non-smoking group (n=20 each). The general demographic data, pulmonary function, and serum HMGB1 and sRAGE expression levels in the 40 subjects were collected and statistically analyzed.Results: The serum sRAGE expression level in the smoking group was lower than that in the non-smoking group; the serum HMGB1 expression level was significantly correlated with lung function, but this correlation was only found in smokers.Conclusion:Serum sRAGE expression level decreases in patients with no respiratory symptoms and lung function changes. Before development of COPD, serum HMGB1 and sRAGE expression levels may be used as indicators of lung function assessment in smokers.

HMGB1; sRAGE; smokers with normal lung function; clinical significance

10.3969/j.issn.2095-9664.2015.05.004

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.00666930170696095)

吳冬霞(1982-)，女，主治醫(yī)師，碩士 。

R563.9

2095-9664(2015)05-0016-04

2014-11-09)

研究方向：慢性阻塞性肺疾病。

*通訊作者：E-mail：13802525927@139.com