陸小元

(江蘇省泰州市姜堰中醫(yī)院，江蘇 泰州 225500)

姜黃抗癌、抗氧化等活性成分鑒定分析

陸小元

(江蘇省泰州市姜堰中醫(yī)院，江蘇 泰州 225500)

目的對姜黃的抗癌、抗氧化等活性成分進行鑒定分析。方法采用微波提取、蒸餾法、醇提水沉法、柱層析等方法對姜黃中的抗癌、抗氧化的活性成分進行分析和鑒定。結(jié)果在姜黃中，CUR-1、CUR-2以及CUR-3的含量比較均明顯不同(P均<0.05)。姜黃素、脫甲氧基姜黃素素、雙脫甲氧基姜黃素在100μg/mL的條件下，其3種物質(zhì)對于脂質(zhì)過氧化的抑制率含量均明顯不同(P均<0.05)。并且在姜黃中發(fā)現(xiàn)許多抗氧化、抗癌的活性成分，如α-姜黃烯、α-姜烯、芳姜黃酮、α-姜黃酮等。結(jié)論姜黃諸多的抗癌和抗氧化等活性成分在醫(yī)療界有著重大的作用，在臨床上有較為重要的意義，在臨床上得到應(yīng)用和推廣。

姜黃；抗癌；抗氧化；活性成分；鑒定分析

姜黃又被稱為郁金、黃姜，為姜科黃屬類植物，主要在云南、貴州、江南等省份有所栽培，我國姜黃資源十分豐富，在市場上明顯處于供大于求的狀態(tài)。該藥能通經(jīng)止血，能夠治療胸悶腹脹以及跌打損傷等諸多問題[1]。姜黃的根莖為不規(guī)則的卵圓形或圓形，大部分的姜黃根部呈現(xiàn)黃色，表面粗糙有皺紋，質(zhì)地比較堅硬，在大多數(shù)情況下不容易被折斷，有苦味，香氣濃郁[2]。其主要的藥理價值為能夠降低血脂濃度、抗腫瘤、抗炎、抗氧化、抗微生物病原體等，并且對風(fēng)濕肩膀手臂疼痛等相應(yīng)癥狀有緩解作用[3]。為更好地探討姜黃抗癌、抗氧化作用的活性有效成分，我院特對姜黃進行系列的分析和檢測，現(xiàn)報道如下。

1 研究資料

1.1藥材選取 本研究所用姜黃是從我國南方統(tǒng)一調(diào)配，均出于同一產(chǎn)地，無病態(tài)或破損狀況。

1.2方法分別采用微波提取、蒸餾法、醇提水沉法、柱層析等方法對姜黃中的抗癌、抗氧化的活性成分進行分析和鑒定，再利用質(zhì)譜分析、光譜分析等多種方法對姜黃中的各種活性成分進行研究。姜黃成分提取方法:利用藥物的流動性和傳質(zhì)性,并有效利用被提取成分的擴散和傳播功能，進一步加強姜黃中各成分的溶解度，促進實驗操作的有效性。與此同時要將姜黃成分保持在其溶解臨界值附近，從而利用經(jīng)過臨床實踐與資料得到的流體密度與其溫度和壓力的關(guān)系，進一步改變這些成分在提取過程中的濃度，提高提取效果。微波提取法的具體操作步驟與之不同，可概括如下：①將姜黃風(fēng)干，去除水分。②將其粉碎。③進一步篩選。④應(yīng)用超臨界提取操作，得到姜黃油,將其放于圓底燒瓶中,并放入相應(yīng)計量乙醇溶劑,控制好提取溫度后，用微波法進行提取。⑤進行離心分離提純操作,用2mL的上清液存放在棕色容量瓶中,然后應(yīng)用無水乙醇進行容量測定,而后采取紫外線法進行溶液分光光度與吸光度的檢測，最后應(yīng)用標準曲線計算樣品中姜黃色素的成分計量即可。

1.3觀察項目 觀察醇提物中姜黃色素的含量以及某些活性物質(zhì)對脂質(zhì)過氧化的抑制率等以及姜黃中抗癌抗氧化的活性成分的種類。

2 結(jié) 果

2.1醇提物中姜黃素含量的比較 在姜黃中，CUR-1含量為54.8%，CUR-2含量為18.4%，CUR-3含量為14.7%，3種物質(zhì)含量比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。

2.2活性物質(zhì)對脂質(zhì)過氧化的抑制率比較 在100μg/mL的條件下，對脂質(zhì)過氧化的抑制率姜黃素為60%，脫甲氧基姜黃素為45%，雙脫甲氧基姜黃素為27%，3者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。

2.3姜黃中抗癌抗氧化的活性成分 在姜黃中發(fā)現(xiàn)許多抗氧化抗癌的活性成分，包括α-姜黃烯、α-姜烯、芳姜黃酮、α-姜黃酮等。

3 討 論

姜黃是芭蕉目和姜科類植物，根莖部分生長極為良好，且末端呈現(xiàn)膨大狀，葉片較其他植物略顯圓形，呈淡黃色。姜黃在我國南方地區(qū)如云南、廣東、西藏等地產(chǎn)量豐富，多喜歡在氣候溫暖、陽光充足、雨水足夠的環(huán)境中生長。姜黃又被稱為郁金和寶鼎香，其根莖較發(fā)達，能夠?qū)θ梭w的經(jīng)期腹痛有抑制作用，并且有治療跌打損傷的作用，在臨床上常用于降血脂、抗腫瘤、抗炎、利膽等，擁有較大的臨床應(yīng)用價值[4]。作為具有藥用和食用兩種價值的傳統(tǒng)藥材，在生活中一直被廣泛應(yīng)用[5]。目前臨床上最常用的姜黃成分提取分離以及分離提純方式為微波提取、蒸餾法、醇提水沉法、柱層析等方法，這些方法具有吸附容量大、再生簡單、效果可靠等優(yōu)勢。本研究發(fā)現(xiàn)，能夠全面體現(xiàn)這些方法優(yōu)點的原因在于吸附劑選擇恰當(dāng)，本實驗選用樹脂作為吸附劑，樹脂具有非同一般的穩(wěn)定性，在吸附過程中充分發(fā)揮其穩(wěn)定性，使得實驗提取的成分質(zhì)量更好，進一步促進了實驗操作中姜黃提取成分的純度，從而為實驗完成起到了不可小覷的作用。除了操作方法與應(yīng)用藥劑的正確選擇外，提取溫度、提取液以及提取時間的控制也是至關(guān)重要。因為提取時間的差異會對姜黃中的色素成分造成不同程度的影響，甚至?xí)p傷這些成分。經(jīng)過實踐發(fā)現(xiàn)，提取時間控制在0.5～1h即可，最長不能超過1.5h，否則姜黃的色素成分提取率會有所降低，使實驗造成一定的偏差。另外，對提取溫度的控制也不容忽視，溫度控制在65℃最合適，否則姜黃色素成分會隨著時間的增加而使利用率下降，同時也會妨礙提取工作的進行。同時，提取過程中應(yīng)用料液的選擇也會有一定的影響，現(xiàn)今常用的提取液比例有1∶8，1∶9，1∶10。研究發(fā)現(xiàn)，隨提取液濃度增加姜黃色度的提取率也會隨之增加，可知料液的配比比例越大實驗效果越有效，所以目前根據(jù)臨床情況，本次試驗選用1∶10進行試驗提純。在提取過程中要注意：①維持提取溫度適宜，避免由于溫度過高對提取成分造成破壞，所以本次試驗根據(jù)臨床情況選用65℃作為提取溫度。②隔離氧氣,避免于氧氣接觸時提取所需成分發(fā)生氧化，給實驗帶來誤差。提取后要進一步行提純分離操作，具體實施步驟：①應(yīng)用大孔樹脂的吸附作用和在水溶性姜黃色素中的高效分離作用對提取后的成分進行進一步的分離提純(而經(jīng)過實驗與資料記載得知吸附劑中應(yīng)用樹脂效果最好)，而后在提純過程中分別進行1min、2min、3min等依次遞增的時間順序進行提純操作，因為實驗表明提純概率會在操作維持2min以后不斷提高。同時應(yīng)用適當(dāng)?shù)牧弦号浔?本次實驗為1∶10)在適當(dāng)?shù)臏囟认?、安排好的提純時間段進行提純操作，爭取將姜黃成分的提純率控制在最佳，從而提高實驗效果。當(dāng)這一系列操作完成后應(yīng)用75%的乙醇溶液作為提純劑，對提純后的成分進行沖洗、凈化操作即可，提高其利用率，加強實驗的高效性。

本試驗發(fā)現(xiàn)，在姜黃中CUR-1、CUR-2及CUR-3的含量均明顯不同，姜黃素、脫甲氧基姜黃素素、雙脫甲氧基姜黃素在100μg/mL的條件下，對于脂質(zhì)過氧化的抑制率分別為60%,45%,27%。本研究還發(fā)現(xiàn)了許多抗氧化抗癌的活性成分，比如α-姜黃烯、α-姜烯、芳姜黃酮、α-姜黃酮等諸多成分。在姜黃中，由于酚羥基和β-二酮中的亞甲基可以提供質(zhì)子阻斷自由基反應(yīng),所以對于姜黃藥用價值來說，是主要的抗氧化的活性成分[6]。姜黃作為我國較為常見且應(yīng)用最為廣泛的中藥，相關(guān)資料曾記載姜黃中的成分具有舒筋活血、行筋通氣、治療跌打腫痛以及風(fēng)濕性疾病等相關(guān)作用。其在抗癌、抗氧化等方面的活性成分最為主要，隨著目前臨床上癌性疾病發(fā)病率的升高，該類藥物的利用率也隨之增高，所以有關(guān)姜黃的抗癌、抗氧化成分相關(guān)研究也得到發(fā)展。

有研究顯示，姜黃素和其余四種過氧化的自由基發(fā)生了結(jié)合，產(chǎn)生了抗氧化作用，并發(fā)現(xiàn)有多個氧化耦合反應(yīng)發(fā)生，其中香蘭醛、阿魏酸和一種姜黃素的二聚體,此二聚體為穩(wěn)定的二氫呋喃結(jié)構(gòu)，因此在抗氧化過程中，屬于終止自由基階段的初期產(chǎn)物，抗氧化作用較強[7]。自由基對于生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類等均能夠造成氧化傷害，可使人體迅速老化，并且出現(xiàn)各類炎癥與疾病，給人們的生活帶來了諸多煩惱。經(jīng)過成分提取后，姜黃素的抗氧化成分還能夠有效并全面地將患者體內(nèi)的自由基徹底清除，而這種抗氧化活性成分主要為姜黃素內(nèi)的蛋白成分，該蛋白熱穩(wěn)定性較高，能夠發(fā)揮高效的心肌耐氧能力，從而避免或減少氧化作用造成的不良影響，并進一步提高患者體內(nèi)細胞膜的穩(wěn)定性，加強患者體內(nèi)抗氧化酶類的活性，將抗氧化作用體現(xiàn)得淋漓盡致。而姜黃色中的各類活性物質(zhì)卻能夠很好地清除自由基，并且能夠增強抗氧化物酶的生物活性，從而使得人體內(nèi)的抗氧化酶活性極大提高，減緩人體的衰老速度[8-9]。并且能夠很好地抑制脂質(zhì)過氧化，姜黃素、脫甲氧基姜黃素、雙脫甲氧基姜黃素等均對脂質(zhì)的過氧化功勞較大，性能突出；而且姜黃對患者的呼吸道還具有一定的藥物作用，在抗癌、抗氧化治療的同時對呼吸道局部也能夠發(fā)揮一定的作用，并且姜黃素還可抑制吸煙患者由于尼古丁而造成的脂質(zhì)過氧化的嚴重傷害，對預(yù)防吸煙引起的各類疾病也有著很大的作用[10]。

綜上所述，姜黃中含有大量抗腫瘤、抗氧化以及抗癌成分，其抗氧化性尤為突出，且安全可靠，不會引起不良并發(fā)癥，其資源在我國也比較豐富，值得開發(fā)與利用，在臨床上還可用于制備各類穩(wěn)定劑，為患者減輕痛苦，具有較大的臨床意義，可以在臨床上應(yīng)用和推廣。

[1]SelvamC,JachakSM,ThilagavathiR,etal.Researchadvanceonbioactiveapplication,extractionandseperationofcurcumin[J].JCentralSouthUniversityofForestry&Technology，2009，29(3)：190-194

[2] 張志琴,郭向群,宿軼冬.姜黃素提取工藝及活性研究進展[J].海峽藥學(xué)，2011，23(7):8-11

[3] 吳斌,李湘洲,楊國恩,等.姜黃色素的抗氧化性能和抗氧化機理研究進展[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，21(1)：121-123

[4] 肖長坤.姜黃屬植物的化學(xué)成分研究進展[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18(21)：339-347

[5] 成樂琴，劉治剛，孫成鵬.乳酸催化水解人參總皂苷制備抗癌活性物質(zhì)人參皂苷Rg3工藝優(yōu)化[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2013，9(7)：45-47

[6] 趙新淮，張強，王竹君.類黃酮化合物抗癌活性研究與進展[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，41(4)：134-137

[7] 郭文，蔣繼志.利用稻瘟霉模型初級篩選抗腫瘤物質(zhì)研究進展[J].生物學(xué)通報，2010，45(4)：1-3

[8] 周玉付，沈媛媛,周志欽,等.柑橘類檸檬苦素抗癌活性研究進展[J].中國細胞生物學(xué)學(xué)報，2011，33(5)：548-553

[9] 胡梁斌，趙旭娜，王淼焱，等.綠豆湯中水溶性色素的抗氧化活性與抗癌活性研究[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報，2010，22(2)：104-106

[10] 葛蓓蕾，徐霞，陳小讓.銅(Ⅱ)配合物抗癌活性研究進展[J].中國醫(yī)藥科學(xué)，2013，3(16)：31-32；72

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.18.037

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2014-04-30