吳云軍

（遼寧省本溪市中心醫(yī)院放射科，遼寧 本溪 117000）

肝細(xì)胞癌含洛鉑化療方案療效及與血管內(nèi)皮生長因子和凝血酶蛋白表達(dá)水平的相關(guān)性

吳云軍

（遼寧省本溪市中心醫(yī)院放射科，遼寧 本溪 117000）

目的 分析血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、凝血酶（thrombin）蛋白表達(dá)水平與肝細(xì)胞癌（HCC）的相關(guān)性及含洛鉑化療方案的臨床療效。方法 收集HCC患者臨床資料共120例，按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為觀察組65例和對(duì)照組55例。對(duì)照組采用含順鉑化療方案治療，觀察組采用含洛鉑化療方案治療。所有患者均行CT平掃及三期增強(qiáng)掃描；所有臨床標(biāo)本組織均常規(guī)采用10%的福爾馬林液固定、石蠟包埋，采用免疫組化SP法測定各組VEGF及thrombin的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 觀察組65例患者中，根據(jù)CT圖像的血供特征，HCC可分為少供血型組（12例）、雙重供血型組（19例）及動(dòng)脈供血型組（34例）3組，各組間蛋白表達(dá)陽性率差異有顯著性(P＜0．05）；根據(jù)CT圖像的侵襲特征，HCC可分為低危組（30例）和高危組（35例），其相應(yīng)的 VEGF及 thrombin蛋白表達(dá)陽性率分別為 73．33%和88．57%，36．67%和85．71%，組間差異有顯著性（P＜0．05）；根據(jù)CT圖像是否明顯強(qiáng)化，HCC可分為明顯強(qiáng)化組（31例）和無明顯強(qiáng)化組（34例），組間蛋白表達(dá)陽性率差異有顯著性（P＜0．05）；根據(jù)CT圖像特征中邊界是否清晰，可分為清晰型組（21例）和欠清晰型組（44例），其相應(yīng)的VEGF及thrombin蛋白表達(dá)陽性率分別為71．43%和86．36%，47．62%和70．45%，組間差異有顯著性（P＜0．05）；根據(jù)CT圖像中瘤體大小，可分為瘤體直徑 5 cm組（29例）和瘤體直徑＞5 cm組（36例），其相應(yīng)的VEGF及thrombin蛋白表達(dá)陽性率分別為82．76%和80．56%，62．07%和63．89%，組間差異無顯著性（P＞0．05）。觀察組臨床總有效率為36．92%，顯著高于對(duì)照組的20．00%（P＜0．05）。結(jié)論 含洛鉑化療方案治療HCC的療效顯著。CT作為診斷HCC的一種無創(chuàng)性檢查手段，其表現(xiàn)特征與HCC組織中VEGF及thrombin蛋白表達(dá)水平有關(guān)，作用機(jī)制可能與VEGF及thrombin蛋白參與HCC的血管生成有關(guān)。

肝細(xì)胞癌；螺旋CT；血管內(nèi)皮生長因子；凝血酶；洛鉑

肝癌是常見的惡性腫瘤，發(fā)病率呈逐年上升趨勢。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）基因和凝血酶（thrombin）基因是與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因，目前對(duì)同時(shí)檢測兩者蛋白表達(dá)與腫瘤螺旋CT征象間的相關(guān)性鮮有研究[1-3]。目前，肝癌治療手段主要包括外科治療與局部治療。本研究中采用含洛鉑化療方案治療，通過對(duì)肝細(xì)胞癌（HCC）患者行CT平掃及增強(qiáng)掃描，并采用免疫組化SP法測定各組VEGF及thrombin的表達(dá)，同時(shí)統(tǒng)計(jì)螺旋CT征象與各指標(biāo)間的關(guān)系，試圖從HCC的VEGF及thrombin蛋白表達(dá)角度上分析螺旋CT征象，以評(píng)價(jià)腫瘤的生物學(xué)特性及腫瘤血管生成情況[4-5]，分析HCC影像改變及病理之間的關(guān)系，為HCC的影像學(xué)診斷、治療方案選擇和預(yù)后評(píng)估等提供幫助。

1 資料與方法

1．1 一般資料

收集醫(yī)院2009年3月至2013年3月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的HCC患者病理標(biāo)本 120例。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)影像學(xué)、病理學(xué)確診為肝癌；病史資料完整；骨髓功能正常；簽署知情同意書；均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：不符合上述納入標(biāo)準(zhǔn)；合并嚴(yán)重心、肝、腎等功能異常；藥物過敏；妊娠或哺乳期婦女。所有患者掃描前及手術(shù)前未進(jìn)行化學(xué)、介入等抗腫瘤治療，均行CT平掃及三期增強(qiáng)掃描，于CT檢查后2～28 d行手術(shù)治療。根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法將其隨機(jī)分為觀察組65例和對(duì)照組55例。觀察組中，男 42例，女23例；年齡38～75歲，平均（56．52±3．84）歲；腫瘤直徑最小1．52 cm，最大12．41 cm，平均（5．63±0．50）cm。對(duì)照組中，男36例，女19例；年齡 36～74歲，平均（57．16±3．25）歲；腫瘤直徑最小1．56 cm，最大11．89 cm，平均（5．58±0．62）cm。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），具有可比性。

1．2 方法

觀察組按照患者腫瘤大小以阿霉素（Antibioticos S．p．A，國藥準(zhǔn)字 X19990296）20～40 mg／m2+洛鉑（海南長安國際制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20050308）40～50 mg／m2與碘油乳化后行介入治療。對(duì)照組化療方案中將洛鉑換為順鉑（昆明貴研藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H53020409）40～50 mg／m2，方法同觀察組。

取觀察組65例患者肝組織標(biāo)本，均常規(guī)10%的福爾馬林液固定，石蠟包埋，操作嚴(yán)格按照試劑盒（上海拜力生物科技有限公司）說明書標(biāo)準(zhǔn)。陽性對(duì)照為抑制的陽性切片，而陰性對(duì)照為正常肝組織，空白對(duì)照組為磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗。

1．3 療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)與觀察指標(biāo)

參照文獻(xiàn)[6]標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定療效。完全緩解（CR）：患者所有目標(biāo)病灶消失或功能性消失；部分緩解（PR）：患者目標(biāo)病灶長徑總和縮小不低于30%；疾病穩(wěn)定（SD）：患者基線病灶總和有所縮小但未達(dá)PR；疾病進(jìn)展（PD）：患者肝內(nèi)新發(fā)病灶或原位新發(fā)病灶增長長徑總和超過20%。總有效（RR）=CR+PR。

CT平掃可顯示HCC病灶的部位、大小、形態(tài)和數(shù)目，并可了解肝臟的基礎(chǔ)情況。增強(qiáng)掃描動(dòng)脈期，絕大多數(shù)病灶都能見到強(qiáng)化表現(xiàn)；增強(qiáng)掃描門脈期，多數(shù)肝內(nèi)病灶密度下降，低于正常肝組織；也有呈等密度或高密度的，分析其原因，與肝動(dòng)脈和門脈參與腫瘤供血有關(guān)。因此，從以下5個(gè)方面進(jìn)行分組。根據(jù)血供類型分組：HCC血供的CT分型根據(jù)平掃、動(dòng)脈期、門脈期掃描CT表現(xiàn)，參考黃娟等[7]的方法，分為少供血型、肝動(dòng)脈和門靜脈雙重供血型（以下簡稱雙重供血型）、動(dòng)脈供血型3組。其中少供血型HCC CT平掃病灶呈低密度影，在動(dòng)脈期和門脈期掃描均無明顯強(qiáng)化；雙重供血型HCC CT平掃病灶呈高、等或低密度，動(dòng)脈期病灶可強(qiáng)化，門脈期病灶強(qiáng)化程度減低；動(dòng)脈供血型HCC CT平掃病灶呈高、等或低密度，動(dòng)脈期明顯強(qiáng)化，門脈期強(qiáng)化明顯減低或不強(qiáng)化，典型表現(xiàn)為“快進(jìn)快出”。根據(jù)侵襲危險(xiǎn)性分組：動(dòng)脈期圖像上出現(xiàn)肝門和（或）腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，門靜脈癌栓以及主癌灶周圍出現(xiàn)衛(wèi)星病灶者為高危組；未出現(xiàn)以上征象者為低危組。根據(jù)強(qiáng)化特征分組：腫瘤在平掃基礎(chǔ)上CT值增加幅度大于30 HU為明顯強(qiáng)化，不超過30 HU為不明顯強(qiáng)化。根據(jù)邊界情況分組：清晰型是指腫瘤邊緣顯示清晰、邊界完整；欠清晰型是指腫瘤與正常肝組織無明確分界線，邊緣形態(tài)不規(guī)則。根據(jù)癌灶大小分組：直徑不超過5 cm為結(jié)節(jié)型肝癌組，直徑大于5 cm為巨塊型肝癌組。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13．0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理。計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 臨床療效

結(jié)果見表1。觀察組總有效率顯著高于對(duì)照組（χ2=4．130，P＜0．05）。

表1 兩組患者臨床療效比較[例（%）]

2．2 HCC CT征象與VEGF及thrombin蛋白表達(dá)的關(guān)系

結(jié)果見表2。結(jié)果提示，VEGF及thrombin蛋白表達(dá)水平增高與HCC的CT表現(xiàn)血供分型顯著相關(guān)，雙重供血型組與動(dòng)脈供血型組陽性率均明顯高于少供血型組（P＜0．05）；VEGF及thrombin蛋白表達(dá)水平增高與HCC侵襲危險(xiǎn)性顯著相關(guān)，高危組陽性率明顯高于低危組（P＜0．05）；VEGF及 thrombin蛋白表達(dá)水平增高與HCC CT圖像強(qiáng)化特征顯著相關(guān)，明顯強(qiáng)化組陽性率明顯高于無明顯強(qiáng)化組（P＜0．05）；VEGF及 thrombin蛋白表達(dá)水平增高與HCC的CT表現(xiàn)邊界是否清晰顯著相關(guān)，邊界清晰型組陽性率明顯高于邊界欠清晰型組（P＜0．05）；VEGF及thrombin蛋白表達(dá)水平增高與HCC瘤體大小無顯著性相關(guān)，瘤體直徑≤5 cm組和直徑＞5 cm組陽性率差異無顯著性（P＞0．05）。

表2 HCC CT征象與VEGF及thrombin蛋白表達(dá)的關(guān)系[例（%）]

3 討論

許多研究表明，HCC的發(fā)病機(jī)制與眾多因素有關(guān)?？烧T發(fā)肝癌的因素包括黃曲霉毒素污染、乙型肝炎病毒（HBV）或丙型肝炎病毒（HCV）感染、飲酒和電離輻射、遺傳毒性的人類代謝物等，大多直接作用于肝細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，引起 DNA損傷，這是 HCC發(fā)生的一個(gè)重要的分子學(xué)基礎(chǔ)。深入研究HCC的機(jī)制，特別是從基因水平研究，可能在預(yù)防和診斷HCC上取得突破性進(jìn)展。介入治療作為治療HCC的一種新興方法，越來越受到臨床重視，同時(shí)腫瘤基因治療也正在成為研究熱點(diǎn)[8]。近年來，許多研究利用影像學(xué)手段探討腫瘤的CT表現(xiàn)與相關(guān)因子之間的關(guān)系，分析HCC螺旋CT增強(qiáng)征象和腫瘤血管生成及相關(guān)因子的表達(dá)關(guān)系，可進(jìn)一步認(rèn)識(shí)CT征象的意義[9]。腫瘤新生血管的形成決定HCC血供類型，血供類型又決定了 CT的強(qiáng)化表現(xiàn)，故 HCC的 VEGF及thrombin表達(dá)與 CT表現(xiàn)之間存在著必然的聯(lián)系[7，10]。因此，通過研究CT增強(qiáng)的特點(diǎn)可以間接推測腫瘤的血供特點(diǎn)。本研究中共收集HCC患者65例（男42例，女23例），根據(jù)血供多少和CT強(qiáng)化表現(xiàn)，將其分為少供血型、雙重供血型和動(dòng)脈供血型3類，患者數(shù)分別為12例（18．46%）、19例（29．23%）、34例（52．31%），可見，HCC的血供大都很豐富。但有些HCC的影像學(xué)表現(xiàn)不典型，僅靠影像學(xué)信息還不能滿足臨床需要，需要多方面的臨床信息來進(jìn)行綜合判斷。本研究結(jié)果顯示，VEGF及thrombin蛋白的表達(dá)與HCC CT表現(xiàn)的血供分型顯著相關(guān)（P＜0．05）。

肝癌的發(fā)生與晚期肝慢性疾病以及肝硬化關(guān)系密切，故通常預(yù)后較差，僅少數(shù)患者能得到根治治療，而大多數(shù)患者需接受經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞（TACE）治療。多種化療藥物聯(lián)用能明顯延長患者生存時(shí)間，但毒副作用也會(huì)相應(yīng)增多。洛鉑具有很好的溶解度，且在水中較穩(wěn)定，能確保腫瘤血管內(nèi)的高血藥濃度，從而延長了對(duì)腫瘤的滅活時(shí)間。本研究結(jié)果顯示，含洛鉑化療方案治療HCC的總有效率顯著高于含順鉑方案（P＜0．05），提示含洛鉑化療方案療效顯著。

綜上所述，含洛鉑化療方案治療 HCC療效顯著；VEGF及thrombin蛋白表達(dá)等多個(gè)因素會(huì)因影響 HCC的血管生成而影響HCC的CT表現(xiàn)，CT增強(qiáng)圖像特征對(duì)于HCC的臨床診療有重要的應(yīng)用價(jià)值。作者簡介:吳云軍（1971-），男，大學(xué)本科，副主任醫(yī)師，研究方向?yàn)镃T診斷（血管造影），（電子信箱）manlipu1221＠163．com。

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Efficacy of Lobaplatin Containing Chemotherapeutic Regimen in Hepatocellular Carcinoma and Correlation between Hepatocellular Carcinoma with VEGF,Thrombin Protein Expression Level

Wu Yunjun
(Department of Radiology,Benxi Municipal Central Hospital,Benxi,Liaoning,China 117000)

Objective To analyze the correlation between the VEGF and thrombin expression levels with hepatocellular carcinoma(HCC) and the clinical efficacy of lobaplatin containing chemotherapeutic regimen．M ethods The clinical data in 120 cases of HCC were collected and randomly divided into the observation group(65 cases)and the control group(55 cases)according to the random number table．The control group was treated by the cisplatin-containing regimen,while the observation group by the lobaplatin-containing chemotherapeutic regimens．All cases underwent CT plain scan and triple-phase enhanced scan;all tissue samples routinely adopted 10% formalin solution for conducting fixation and paraffin embedding;the VEGF and thrombin protein expression levels were measured by the immunohistochemical staining method．Results Among 65 cases in the observation group,HCC could be divided into the less blood supply group(12 cases), dual blood supply group(19 cases)and the arterial blood supply group(34 cases)according to the blood supply characteristics in CT imaging,the positive rate of protein expression had statistically significant differences among the various groups(P＜0．05)．According to the invasion characteristics in CT imaging,HCC could be divided into the low risk group(30 cases)and the high risk group(35 cases),the positive rates of VEGF and thrombin protein expression were 73．33%,88．57%and 36．67%,85．71%,respectively,the differences between the two groups were statistically significant(P＜0．05)．According to whether the CT imaging being obviously enhanced,HCC could be divided into the obvious enhancement group(31 cases)and the non-enhancement group(34 cases),the protein expression had statistical differences between the two groups(P＜0．05)．According to whether the tumor boundary being clear in the CT imaging,HCC could be divided into the clear boundary group(21 cases)and the less clear boundary group(44 cases),the positive rates of VEGF and thrombin protein expression were 71．43%,86．36% and 47．62%,70．45% respectively,the differences between the two groups had statistical significance (P＜0．05)．According to the tumor size in CT imaging,HCC could be divided into the tumor diameter≤5 cm group(29 cases)and the tumor diameter＞5 cm group(36 cases),the positive rate of VEGF and thrombin protein expression were 82．76%,80．56% and 62．07%, 63．89% respectively,the differences between the two groups had no statistical significance(P＞0．05)．The total effective rate in the observation group was 36．92%,which was significantly higher than 20．00% in the control group(P＜0．05)．Conclusion The lobaplatin-containing chemotherapeutic regimen has significant effect for treating HCC,the manifestation characteristics of CT as a noninvasive examination measure for diagnosing HCC are related with the VEGF and thrombin protein expression levels in HCC tissue,its mechanism may be related with VEGF and thrombin proteins participating in HCC angiogenesis．

hepatocellular carcinoma;spiral CT;vascular endothelial growth factor;thrombin;lobaplatin

R969.4；R979.1；R445

A

1006-4931(2015)05-0018-03

2014-10-27)