王 齊,王 建,李慶華,龐天翔(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院,實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100032)
沉默CIAPIN1基因?qū)562細(xì)胞增殖能力的影響*
王齊,王建,李慶華△,龐天翔△
(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院,實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100032)
目的:探討靶向干擾CIAPIN1基因表達(dá)對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病(CML)細(xì)胞系K562細(xì)胞增殖能力的影響。方法:針對(duì)CIAPIN1基因構(gòu)建shRNA真核表達(dá)載體并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染K562細(xì)胞系。Real-time PCR及Western blotting技術(shù)鑒定干擾效率; CIAP-IN1基因沉默之后,改良MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力的變化;甲基纖維素集落形成實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞集落形成大小和數(shù)量的變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期的改變;將K562細(xì)胞接種到裸鼠體內(nèi)皮下,觀察細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤能力的變化。結(jié)果: CIAPIN1基因表達(dá)下調(diào)后,K562細(xì)胞的活力下降;集落形成數(shù)量減少和集落減小; G1期細(xì)胞數(shù)量增加;小鼠體內(nèi)成瘤能力明顯降低。結(jié)論:下調(diào)CIAPIN1基因表達(dá)能夠抑制K562細(xì)胞在體外及體內(nèi)的增殖能力。
國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.14JCZDJC34900)
△E-mail: pang@ihcams.ac.cn