李 楊,王 麗,劉慧榮(山西醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生理學系,山西太原03000;首都醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病生教研室,北京00069)
β1-腎上腺素受體自身抗體誘導的自噬和凋亡之間關系的研究
李楊1,王麗1,劉慧榮2△
(1山西醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生理學系,山西太原030001;2首都醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病生教研室,北京100069)
目的:通過使用自噬激動劑、自噬抑制劑、凋亡抑制劑以及蛋白阻滯劑處理或預處理已由β1-腎上腺素受體自身抗體(β1-AA)造模的H9c2細胞,探討能否通過人為因素調控細胞自噬從而下調心肌細胞凋亡,改善心功能受損。方法:采用不含EDTA的0. 25%胰蛋白酶消化傳代H9c2心肌細胞,用含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng),主動免疫Wistar大鼠獲得的β1-AA對細胞進行24 h造模處理,或用自噬激動劑雷帕霉素、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、自噬抑制劑氯喹、凋亡抑制劑、蛋白阻滯劑分別單獨給予或者聯(lián)合處理細胞,采用Western blot以及RT-PCR對自噬的變化進行檢測;對自噬變化組采用流式細胞術以及線粒體跨膜電位檢測法對凋亡進行檢測。結果: H9c2細胞約90%滿時可傳代并每隔約2天傳代一次;β1-AA可誘導H9c2細胞發(fā)生自噬和凋亡;自噬和凋亡在一定范圍內彼此影響,協(xié)同決定細胞死亡的發(fā)生。結論:β1-腎上腺素受體自身抗體誘導的自噬和凋亡在一定范圍內彼此之間相互調節(jié)。
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