王勇敢，郭 萍，劉滿春

近年來(lái)，血細(xì)胞分析儀在我國(guó)廣泛應(yīng)用于臨床，由于其具有檢測(cè)快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，明顯降低了血常規(guī)檢測(cè)中由于各種人為因素引起的誤差，最大限度地提高了血常規(guī)檢測(cè)的工作效率及準(zhǔn)確率。雖然門診患者從采集血液標(biāo)本到送檢并最終能即刻進(jìn)行測(cè)定，但大部分醫(yī)院對(duì)于住院患者的血檢標(biāo)本送檢不是很及時(shí)。目前，對(duì)即刻測(cè)定、常溫下放置幾小時(shí)和冷藏保存幾小時(shí)的血常規(guī)測(cè)定是否存在結(jié)果差異，反映患者的實(shí)際狀況是否準(zhǔn)確等問(wèn)題越來(lái)越受到關(guān)注，對(duì)此筆者觀察探討靜脈血樣本在不同的保存環(huán)境下對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1．1 儀器及試劑 BC－5800血液分析儀及其配套試劑、配套質(zhì)量控制物，海爾FYL－YS－98L冰箱，乙二胺四乙酸（EDTA）K2抗凝劑真空采血管、采血針。

1．2 方法 隨機(jī)抽取某體系部隊(duì)門診健康體檢人員30名，男18名，女12名。按儀器保養(yǎng)要求對(duì)儀器進(jìn)行全面維護(hù)并用質(zhì)量控制物進(jìn)行質(zhì)量控制，其結(jié)果均在質(zhì)量控制范圍內(nèi)。標(biāo)本采集與處理：在室溫使用2 ml EDTA K2抗凝真空采血管采集靜脈血，采集2份／人，立即測(cè)定后分別儲(chǔ)存于25℃室溫和 4 ℃冰箱內(nèi)，分別于 1、2、4、6、8、12、24、48、72 h 進(jìn)行測(cè)定并進(jìn)行手工推片鏡檢，以立即測(cè)定結(jié)果為對(duì)照組（低溫保存標(biāo)本，測(cè)定前均恢復(fù)至室溫測(cè)定）。

1．3 檢測(cè)指標(biāo) 本儀器檢測(cè)報(bào)告中紅細(xì)胞（RBC），血紅蛋白含量（HGB），血小板（PLT），白細(xì)胞（WBC）計(jì)數(shù)及分類，中性粒細(xì)胞（Neu%）、淋巴細(xì)胞（Lym%）、單核細(xì)胞（Mon%）、嗜酸細(xì)胞（Eos%）、嗜堿性細(xì)胞（Bas%）為儀器直接測(cè)出，以上9項(xiàng)結(jié)果為本文討論的重點(diǎn)。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 18．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。分別采用t和χ2檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與討論

2．1 血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果 對(duì)照組（0 h）數(shù)據(jù)與常溫?cái)?shù)據(jù)組、低溫?cái)?shù)據(jù)組比較：RBC對(duì)照組數(shù)據(jù)分別與常溫24、48、72 h 比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．01）；LYM%對(duì)照組數(shù)據(jù)分別與常溫24、48、72 h及低溫72 h比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．01）；NETU%對(duì)照組數(shù)據(jù)與常溫 72 h 比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0．01）； 其余數(shù)據(jù)組對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0．05）。對(duì)比數(shù)據(jù)結(jié)果差異均在允許范圍，但隨著時(shí)間的推移低溫組數(shù)據(jù)較常溫?cái)?shù)據(jù)更為接近即刻數(shù)據(jù)。見(jiàn)表1。

2．2 對(duì)WBC總數(shù)及形態(tài)分類的影響 不同保存方式72 h內(nèi)WBC總數(shù)變化不明顯，是因計(jì)數(shù)時(shí)采用溶血?jiǎng)┩耆芙釸BC和PLT，WBC膜僅部分溶解，胞質(zhì)大部分溢出，整個(gè)細(xì)胞體積縮小，僅留下核和部分顆粒［1］。所以只要標(biāo)本的細(xì)胞核和顆粒不發(fā)生明顯變性，則對(duì)縮小后的細(xì)胞體積影響不大。而對(duì)于WBC形態(tài)分類，無(wú)論何種保存方式，結(jié)果均會(huì)發(fā)生很小的變化；特別是常溫下，隨著時(shí)間的推移細(xì)胞形態(tài)改變?cè)酱蟆５珜?duì)白細(xì)胞DIFF散點(diǎn)圖研究見(jiàn)圖1～4。

表1 不同時(shí)間和溫度血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果（±s）

表1 不同時(shí)間和溫度血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果（±s）

注：與 0 h 比較，△P＜0．05

保存時(shí)間 WBC（×109／L） NETU% LYM% MONO% EO% BASO% RBC（×1012／L） HGB（g／L） PLT（×109／L）0 h 5．43±1．16 55．38±3．30 34．15±1．82 7．85±1．07 2．15±1．41 0．48±0．25 5．03±0．11 148±9．42 211±44．23常溫 1 h 5．64±1．15 55．63±3．21 34．75±2．22 7．13±0．81 2．13±0．99 0．38±0．21 4．92±0．10 147±10．49 209±40．00常溫 2 h 5．59±1．21 55．68±3．38 34．40±2．41 7．20±0．99 2．20±1．22 0．53±0．26 4．90±0．11 147±9．72 207±47．56常溫 4 h 5．58±1．19 54．98±3．96 34．80±2．08 7．30±1．35 2．33±0．83 0．60±0．42 4．89±0．15 145±10．49 222±53．20常溫 6 h 5．77±1．32 55．70±3．47 34．08±2．46 7．48±1．17 2．28±0．87 0．48±0．28 4．92±0．10 146±9．42 219±47．70常溫 8 h 5．62±1．19 55．73±2．98 34．30±1．87 7．25±1．11 2．13±0．97 0．60±0．18 4．82±0．19 145±10．66 217±47．17常溫 12 h 5．66±1．16 58．03±2．29 31．95±0．87 7．35±0．72 2．13±1．08 0．55±0．26 4．94±0．09 147±9．60 209±47．88常溫 24 h 5．72±1．29 59．13±2．94 30．80±1．55△ 7．50±1．10 2．18±1．03 0．40±0．18 4．87±0．07△ 146±8．70 197±40．07常溫 48 h 5．67±1．25 59．80±2．59 30．23±1．59△ 7．68±0．90 1．75±0．90 0．55±0．17 4．82±0．05△ 145±8．64 195±43．34常溫 72 h 5．58±1．27 60．88±2．75△ 29．45±1．68△ 7．33±0．95 1．88±0．99 0．48±0．22 4．79±0．09△ 145±10．08 190±42．40低溫 1 h 5．46±1．19 55．58±3．30 33．70±1．44 7．70±0．91 2．53±1．72 0．50±0．20 5．01±0．09 148±8．96 209±43．92低溫 2 h 5．44±1．14 55．75±3．05 34．25±1．66 7．35±1．06 2．05±1．07 0．60±0．08 4．97±0．07 146±8．02 207±42．71低溫 4 h 5．45±1．13 56．00±3．19 34．00±1．82 7．25±0．87 2．18±1．01 0．58±0．22 4．95±0．08 147±8．89 206±42．02低溫 6 h 5．44±1．17 55．80±2．86 34．50±1．76 7．25±0．66 1．78±0．56 0．68±0．15 4．94±0．11 147±9．42 203±41．69低溫 8 h 5．49±1．21 55．60±3．50 34．13±2．19 7．45±0．66 2．10±0．97 0．73±0．15 4．94±0．12 147±8．58 202±42．79低溫 12 h 5．48±1．18 55．15±3．85 34．20±1．75 7．55±0．66 2．48±1．67 0．63±0．15 4．97±0．09 147±9．06 198±45．90低溫 24 h 5．51±1．20 57．20±3．45 32．50±1．31 7．45±0．75 2．33±1．63 0．53±0．15 4．92±0．05 146±8．35 193±46．43低溫 48 h 5．56±1．22 57．68±2．65 31．78±1．50 7．85±0．75 2．03±0．52 0．68±0．13 4．90±0．07 146±8．35 191±46．58低溫 72 h 5．53±1．21 58．25±2．89 31．33±0．69△ 7．50±1．22 2．30±1．21 0．63±0．05 4．88±0．09 146±9．33 184±45．71

圖1 室溫保存12 h，DIFF散點(diǎn)圖

圖2 室溫保存24 h，DIFF散點(diǎn)圖

圖3 低溫保存24 h，DIFF散點(diǎn)圖

圖4 低溫保存48 h，DIFF散點(diǎn)圖

2．3 對(duì)PLT計(jì)數(shù)的影響 從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)看：標(biāo)本室溫保存4 h，PLT出現(xiàn)一個(gè)上升趨勢(shì)，但隨后12 h，PLT總數(shù)即出現(xiàn)明顯下降。然而低溫環(huán)境下，PLT的穩(wěn)定性不及室溫保存?？赡苡捎赑LT離開機(jī)體內(nèi)環(huán)境后由于滲透壓、溫度、抗凝劑及試管壁等影響，形態(tài)結(jié)構(gòu)快速發(fā)生改變。隨著保存時(shí)間延長(zhǎng)，一些標(biāo)本出現(xiàn)巨大PLT和PLT聚集，還有一些PLT破壞，最終引起PLT總數(shù)減少［2］。但本文PLT減少仍在允許范圍內(nèi)。

2．4 對(duì)HGB及RBC計(jì)數(shù)的影響 室溫和低溫保存標(biāo)本HGB的影響很小。不過(guò)隨著時(shí)間的推移，在手工鏡檢中，室溫標(biāo)本比低溫較早出現(xiàn)紅細(xì)胞皺縮成呈棘形或影形（對(duì)照組RBC與常溫24、48、72 h計(jì)數(shù)存在差異的原因）。

根據(jù)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［3］，用血球分析儀計(jì)數(shù)血細(xì)胞時(shí)，采集血液后在室溫中貯存不應(yīng)超過(guò)4 h。但是筆者認(rèn)為，還是要即刻抽血，即刻檢測(cè)才能真實(shí)反映患者機(jī)體中真實(shí)情況。特別對(duì)于需要手工鏡檢的患者，不能低溫保存標(biāo)本［3］，更是要求檢測(cè)時(shí)間越早越好。如因不可抗拒的因素不能及時(shí)檢測(cè)，應(yīng)根據(jù)臨床需要及時(shí)分類處理、保存。周云仙等［4，5］建議標(biāo)本保存時(shí)間超過(guò)1 d后，應(yīng)根據(jù)實(shí)際保存情況注明：“標(biāo)本放置幾天，可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果有影響”。

［1］劉成玉，羅春麗．臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，2012．97－100．

［2］李勝發(fā)，程大林．血小板可逆聚集在全血細(xì)胞分析中的影響［J］．臨床檢驗(yàn)雜志，2003，3（01）：34．

［3］葉應(yīng)嫵，王毓三．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］．南京：東南大學(xué)出版社，2006．142．

［4］周云仙，楊大千，李雪芬，等．全血標(biāo)本冰箱長(zhǎng)時(shí)間保存對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類結(jié)果的影響［J］．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2005，5（3）：195－197．

［5］李建芬．臨床檢驗(yàn)中不合格血液標(biāo)本的原因分析［J］．中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2012，19（27）：88．