鄒 琦 劉菊妍 吳燕梅 周 杰

(1廣州白云山中一藥業(yè)有限公司，廣州，510530;2廣州醫(yī)藥集團(tuán)有限公司，廣州，510530)

消渴丸為口服降糖藥，具有益氣養(yǎng)陰、清熱生津的功效，臨床主要用于2型糖尿病，大量研究表明消渴丸對(duì)糖尿病具有良好的控制作用[1－3]。消渴丸由格列本脲和中藥組分組成，格列本脲為磺脲類降糖藥，降糖作用已被研究證實(shí)，然而中藥組分在組方中發(fā)揮著何種作用卻未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道，為此，筆者選用自發(fā)性2型糖尿病大鼠－GK大鼠為研究對(duì)象進(jìn)行了系列的研究，旨在發(fā)現(xiàn)消渴丸中藥組分在消渴丸組方中發(fā)揮的作用。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠:13只，SPF級(jí)，雄性，180～220 g，GK 大鼠:90 只，SPF 級(jí)，雄性，180 ～220 g，均從上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司購(gòu)入，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):0066092、0066093。

1.2 受試品 消渴丸、消渴丸中藥組分、格列本脲，廣州白云山中一藥業(yè)有限公司提供，批號(hào)M01084，消渴丸由葛根、地黃、黃芪、天花粉、玉米須、南五味子、山藥、格列本脲組成，每10丸含格列本脲2.5 mg。消渴丸中藥組分由葛根、地黃、黃芪、天花粉、玉米須、南五味子、山藥組成，不含格列本脲。

1.3 試劑 血脂測(cè)定試劑盒(購(gòu)自北京利得曼生化技術(shù)有限公司904281HY);血糖試紙(日本 ARKRAY Factory Inc生產(chǎn))。

1.4 主要儀器 GT－1640型血糖儀(日本京都);ASP 300全密封自動(dòng)脫水機(jī)(Leica公司);石蠟包埋機(jī)(Leica公司);Microm HM400平推式切片機(jī)(德國(guó)MICROM)。JVC TK－C1381攝像儀(日本 JVC);電鏡(日立HITACHI電子顯微鏡)。

2 方法

2.1 劑量設(shè)計(jì) 消渴丸高、中、低劑量分別設(shè)定為2.8、1.4、0.7 g(11.2、5.6、2.8 丸)/kg，相當(dāng)于成人臨床使用量[7.5 g/(人·d)]的4、2、1倍。消渴丸中藥組分高、中劑量組分別設(shè)定為2.8、1.4 g(11.2、5.6、2.8丸)/kg、格列本脲高、中劑量組分別設(shè)定為2.8、1.4 mg/kg，相當(dāng)于成人臨床使用量[7.5 mg/(人·d)]的4、2倍。為便于表述消渴丸中藥組分在以下敘述中稱之為“消渴丸A”。

2.2 分組、實(shí)驗(yàn) 選取檢疫合格的Wistar大鼠13只，GK大鼠90只，8～10周齡。GK大鼠先用高脂飼料飼養(yǎng)2周誘發(fā)高血糖，挑選隨機(jī)血糖高于11.1 mmol/L的GK大鼠80只用于本實(shí)驗(yàn)，剩余10只GK大鼠淘汰;Wistar大鼠常規(guī)飼養(yǎng)。2周后選取Wistar大鼠為空白組，GK大鼠根據(jù)隨機(jī)血糖濃度分為8組，即模型組、消渴丸高、中、低劑量組，消渴丸A高、中劑量組、格列本脲高、中劑量組，每組10只GK大鼠。分組后各試驗(yàn)組按設(shè)定劑量每天灌胃給藥1次，連續(xù)24周，給藥容積10 mL/kg，空白組、模型組按相同條件灌服等容積的0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC－Na)。于給藥第24周末所有大鼠處死后取大鼠心臟、腎臟，取出的心臟、腎臟用于組織形態(tài)學(xué)檢查和電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察[4－6]。

3 結(jié)果

3.1 消渴丸、消渴丸A、格列本脲對(duì)GK大鼠心臟、腎臟組織形態(tài)學(xué)的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明:1)空白組及模型組各動(dòng)物心肌纖維排列整齊，結(jié)構(gòu)清晰完整，染色均勻，閏盤和橫紋清晰可見(jiàn)，核呈卵圓形居中，間質(zhì)血管未見(jiàn)擴(kuò)張，亦未見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)及間質(zhì)纖維組織增生。各藥物組心肌結(jié)構(gòu)與空白組、模型組相比均未見(jiàn)明顯異常。2)空白組各動(dòng)物腎臟被膜完整，腎小球未見(jiàn)增大或縮小及滲出等變化，腎小管上皮細(xì)胞未見(jiàn)水腫性變化，管腔內(nèi)未見(jiàn)滲出物及管型。腎間質(zhì)血管未見(jiàn)擴(kuò)張及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。模型組各動(dòng)物腎臟被膜稍增厚，被膜下疏松，腎小球體積略增大，腎小囊未見(jiàn)明顯擴(kuò)張或萎縮;其他各組動(dòng)物腎臟均有不同程度的改變，主要表現(xiàn)為透明管型的形成、被膜增厚，個(gè)別動(dòng)物腎小球及腎小管間少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)等變化。與模型組比較，除格列本脲組外其他各給藥組試驗(yàn)動(dòng)物病變程度均有一定程度減輕，其中消渴丸中劑量組、消渴丸低劑量組、消渴丸A高劑量組腎臟的變化程度稍輕，消渴丸高劑量組稍明顯。

3.2 消渴丸、消渴丸A、格列本脲對(duì)GK大鼠心臟、腎臟超微結(jié)構(gòu)的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:1)各給藥組動(dòng)物的心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)與模型對(duì)照組比較，心肌超微結(jié)構(gòu)的異常變化都有不同程度地減輕;而消渴丸高劑量組、消渴丸A高劑量組減輕的程度比較明顯。2)與模型組相比，各藥物組除格列本脲組外均有不同程度的保護(hù)作用;而消渴丸高劑量組、消渴丸A高劑量組、消渴丸中劑量組較明顯，消渴丸高劑量組尤為顯著。見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 消渴丸、消渴丸A、格列本脲對(duì)GK大鼠心臟超微結(jié)構(gòu)的影響

圖2 消渴丸、消渴丸A、格列本脲對(duì)GK大鼠腎臟超微結(jié)構(gòu)的影響

4 討論

GK大鼠是1975年 Goto等人[5]從211個(gè) Wistar大鼠中經(jīng)口服糖耐量實(shí)驗(yàn)選出18個(gè)輕度糖耐量減退的大鼠，經(jīng)反復(fù)篩選培養(yǎng)形成的與人類2型糖尿病相似的自發(fā)性非肥胖2型糖尿病大鼠。該鼠主要表現(xiàn)為葡萄糖刺激的胰島素分泌受損、β細(xì)胞功能受損等，長(zhǎng)期患病后，出現(xiàn)各種并發(fā)癥和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。Willa Hsueh研究表明[7]GK大鼠是研究2型糖尿病的一種較為理想的國(guó)際公認(rèn)的動(dòng)物模型。本研究對(duì)消渴丸進(jìn)行了初步的拆方研究，主要考察消渴丸、消渴丸中藥組分(消渴丸A)、消渴丸化藥組分(格列本脲)對(duì)2型糖尿病GK大鼠血心臟和腎臟的影響。

本研究結(jié)果表明光鏡觀察各實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞未見(jiàn)明顯差別;光鏡觀察腎臟被膜增厚，腎小球體積略增大，皮質(zhì)部小灶性腎小管變性，腎小管間炎細(xì)胞浸潤(rùn);電鏡觀察心肌細(xì)胞發(fā)現(xiàn)肌纖維明顯減少，模糊、排列疏松，Z線模糊;線粒體聚集，嵴斷裂、消失或不發(fā)達(dá);電鏡觀察腎小球毛細(xì)血管袢結(jié)構(gòu)基本清晰，基底膜節(jié)段性均質(zhì)增厚，部分較明顯;毛細(xì)血管周圍足細(xì)胞足突部分融合，形態(tài)短小模糊，表明2型糖尿病大鼠誘發(fā)成功，并且還并發(fā)了心、腎并發(fā)癥。

心、腎組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)研究結(jié)果表明，消渴丸中藥組分、消渴丸對(duì)GK大鼠心腎超微結(jié)構(gòu)和腎臟的組織形態(tài)均具有明顯的保護(hù)作用，而格列本脲對(duì)上述臟器的保護(hù)作用不明顯，早有研究表明糖尿病患者久病并發(fā)糖尿病心肌病和糖尿病腎病的比例非常高[8]，因此，根據(jù)本研究結(jié)果可判斷，消渴丸中藥組分在消渴丸組方中發(fā)揮著預(yù)防糖尿病心、腎并發(fā)癥發(fā)生的作用。

綜上所述，消渴丸中藥組分、消渴丸均具有改善GK大鼠心臟、腎臟超微結(jié)構(gòu)的作用，而格列本脲對(duì)上述測(cè)定指標(biāo)的影響不明顯。根據(jù)本研究結(jié)果可推斷，消渴丸中藥組分在消渴丸組方中主要發(fā)揮著預(yù)防糖尿病心、腎并發(fā)癥的作用，但其具體的作用機(jī)制尚不清晰，值得深入研究。

[1]方琦，胡順金.消渴丸對(duì)優(yōu)降糖繼發(fā)性失效的2型糖尿病的療效觀察及機(jī)理探討[J].安徽中醫(yī)臨床雜志，2008，12(4):280－281.

[2]劉峘，謝雁鳴.消渴丸上市后臨床再評(píng)價(jià)文獻(xiàn)綜述[J].中國(guó)中藥雜志，2011，36(20):2851.

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